维生素K2对人骨髓增生异常综合征细胞株MUTZ-1增殖抑制作用的实验研究

目的研究维生素K2(VK2)对人骨髓增生异常综合征细胞株MUTZ-1的生长抑制作用.方法采用光镜或电镜技术观察VK2作用于MUTZ-1细胞株后细胞形态和超微结构的改变;应用四甲基偶氮唑蓝( MTT)法检测细胞的增殖抑制作用.结果VK2作用于MUTZ-1 72 h后呈现典型凋亡细胞的形态学改变, 且随着VK2浓度的增加和作用时间的延长凋亡细胞所占的百分比增高;MTT结果显示10 μmol·L-1及以上浓度的VK2处理MUTZ-1细胞株后细胞生长明显受抑,并呈浓度依赖性,与对照组比有显著性差异(P＜0.05);且随着VK2作用时间的延长细胞凋亡率也逐渐增高,且呈明显的时间依赖性(P＜0.05).5μmol·L-1的VK2有促MUTZ-1细胞株增生的趋势,但与对照组相比无显著性差异(P＞0.05).结论低浓度VK2(5μmol·L-1)对MUTZ-1细胞株有促增殖趋势;较高浓度的VK2(10～40μmol·L-1)主要是通过诱导MUTZ-1细胞凋亡而抑制其增殖.     

口服耐受后过继转输动物模型的建立方法

目的:探讨经口服受鼠脾淋巴细胞诱导耐受的供鼠淋巴细胞输注是否能减轻移植物抗宿主病(GVHD).方法:以雄性DBA-2小鼠(H-2d)为供者,分别用BALB/C鼠脾淋巴细胞、DBA-2鼠脾淋巴细胞、牛血清蛋白、普通饲料隔天喂养,单向混合淋巴细胞反应(MLR)评估诱导耐受状态.以雌性BALB/C小鼠(H-2d)为受者,给予6.0 Gy 60Coγ射线全身照射,尾静脉输注来自于DBA-2小鼠的2×107脾淋巴细胞.结果:耐受供鼠cpm值低于非耐受组,接受已耐受供鼠脾淋巴细胞输注的受鼠,发生GVHD较其他组轻.结论:经口服耐受的过继转输动物模型的实验方法有效可行.     

雷帕霉素抑制小鼠骨髓移植后移植物抗宿主病作用的初步研究

目的:探讨新型免疫抑制药物雷帕霉素(RAPA)对小鼠异基因骨髓移植(allo-BMT)后急性移植物抗宿主病(aGVHD)的抑制作用,并与传统免疫抑制药物比较作用效果。方法:用主要组织相容性抗原(MHC)完全不合的纯种近交系小鼠[供鼠为雄性C57BL/6 J(H-2b)鼠,受鼠为雌性BALB/c(H-2d)鼠]建立allo-BMT/aGVHD动物模型,随机分5组,第1、2和3组分别给予RAPA、环孢菌素A(CsA)加甲氨蝶呤(MTX)、RAPA加CsA加MTX联合用药作为aGVHD抑制方案,第4组为空白对照,第5组为未移植组。观察各组小鼠骨髓移植后aGVHD的出现情况。结果:移植小鼠出现典型的aGVHD症状,未用aGVHD预防方案的移植小鼠(第4组)死亡高峰在移植后第5~7天,死亡率达100%。用不同aGVHD预防方案的第1~3组小鼠aGVHD症状明显减轻,平均生存时间(MST)较第4组显著延长(分别延长3.5、1.9和6.0 d,P<0.05)。不同aGVHD预防方案的移植小鼠之间,移植后外周血常规变化差异无显著性。经用各预防方案后,移植小鼠aGVHD病理表现减轻,且RAPA、CsA和MTX联合用药组的病理分级轻于RAPA单药组或CsA加MTX标准方案组。结论:RAPA可以显著抑制体外T淋巴细胞增殖效应,增强小鼠对骨髓移植的免疫耐受,对小鼠骨髓移植后移植物抗宿主病(GVHD)有明显抑制作用,可减轻GVHD症状和病理损害程度,延长平均生存时间。