基于网络药理学和分子对接探讨六味地黄丸治疗糖尿病肾病的作用机制研究

目的 运用网络药理学和分子对接方法探讨六味地黄丸治疗糖尿病肾病（diabetic nephropathy，DN））的作用机制。方法 通过检索多个数据库及查阅文献筛选出六味地黄丸活性成分和对应靶点，借助Genecard、OMIM和Drugbank数据库收集DN作用靶点并通过Venny 2.1软件筛选出药物-疾病共同作用靶点。随后，利用STRING和Cytoscape软件分析和构建蛋白质-蛋白质相互作用网络并使用CytoNCA插件进行拓扑分析刷选出核心靶点。然后，利用ClueGO插件进行GO （GO Ontology）功能富集分析和KEGG-（Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes）通路分析。最后，使用AutoDock软件通过分子对接验证活性化合物与核心靶点的结合能力。结果 六味地黄丸40个活性成分通过调控128个DN相关靶点，尤其是通过调控28个核心靶点，参与调控体内基因转录、细胞凋亡和增殖、信号转导、炎症反应及蛋白质磷酸化等生物学过程，干预肿瘤、AGE-RAGE、IL-17、MAPK、HIF-1、Toll样受体等信号通路发挥治疗DN的作用。分子对接验证了5种活性化合物与其作用的关键靶点具有可靠的亲和力。结论 推测六味地黄丸治疗DN具有多成分-多靶点-多途径的特点，为进一步研究六味地黄丸治疗DN的分子机制提供了新思路和新方向。     

中药房规范管理中存在的问题分析与调整效果

目的：调查了解中药房规范管理中存在的问题，总结分析后进行管理调整，并评价调整效果。方法：2022年1月起对2021年7—12月中药房的管理数据进行统计调查，通过数据分析找出中药房规范管理中存在的问题，成立专项管理小组，对问题进行分析，并制定针对性的管理调整方案，调整方案于2022年1—6月实施应用，统计调整前(2021年7—12月)和调整后(2022年1—6月)中药房的管理质量评分、药学服务评分，并于调整前后各随机抽取90例患者进行满意度调查，比较调整前后中药房的服务质量评价。结果：调整后中药房的药品摆放、药品质控、工作交接、服务品质评分均显著高于调整前(P<0.05);调整后中药房的健康宣教、处方核对、发药效率评分均显著高于调整前(P<0.05);调整后患者对中药房服务的总体满意度显著高于调整前(P<0.05)。结论：调查了解中药房规范管理中存在的问题，能够为制定针对性的调整方案提供依据，调整后的中药房管理方案显著的提升了管理质量和服务质量评分，也改善了患者对中药房服务的满意度评价。     

高压抗原修复液的pH值对淋巴组织免疫组化染色的影响

目的 研究高压抗原修复液的pH值对淋巴组织免疫组化染色的影响.方法 运用高压的抗原修复方式,按修复液pH值的不同分为pH 6.0枸橼酸抗原修复组和pH8.0EDTA抗原修复组,对76例淋巴组织进行免疫组化染色,每例分别标记抗体CD3、CD20和CD5.结果 pH 6.0枸橼酸抗原修复组有9例阳性标记不明确,其中5例出现了细胞膜破损,67例符合诊断标准;pH8.0EDTA抗原修复组有60例阳性标记不明确,其中59例出现了细胞膜破损,仅有16例组织染色符合诊断标准,两组间比较差异有统计学意义(P<0.05).结论 免疫组化染色中,使用pH 8.0 EDTA抗原修复液对淋巴组织进行高压修复,致使淋巴细胞胞膜破损,使用pH 6.0枸橼酸高压修复有助于避免这一现象.     

基于SWATH定量质谱技术的肥胖小鼠脂肪线粒体蛋白质组分析

目的揭示肥胖诱发脂肪组织线粒体蛋白质组的变化,并探索变化的可能机制,实现针对小鼠脂肪组织线粒体蛋白质组的深度测序和准确定量。方法利用数据依赖型(DDA)质谱方法鉴定小鼠白色脂肪组织和棕色脂肪组织中的线粒体蛋白;利用新型SWATH(sequential windowed acquisition of all theoretical mass spectra)质谱技术定量肥胖小鼠和野生型小鼠不同脂肪组织中线粒体蛋白,同时对表达差异的线粒体蛋白进行功能分析。实验步骤:1用组织线粒体提取试剂盒特异性提取不同类型脂肪组织线粒体蛋白;2用10%聚丙烯酰胺凝胶电泳预分离线粒体蛋白;3利用DDA方法建立线粒体蛋白质谱文库;4利用SWATH质谱方法定量线粒体蛋白;5利用Peak View2.0软件提取碎片离子色谱峰并进行积分计算其峰面积;6根据KEGG(kyoto encyclopedia of genes and genomes)通路和GO(Gene Ontology)功能分类分析肥胖小鼠和正常小鼠脂肪组织表达差异蛋白的生物功能。结果在白色脂肪组织和棕色脂肪组织分别准确鉴定并定量线粒体定位蛋白1000和1039种,3次生物学重复实验中共鉴定包括线粒体氨肟还原成分1在内的25种线粒体蛋白在白色脂肪组织特异性表达,包括非偶联蛋白3在内的21种线粒体蛋白在棕色脂肪组织特异性表达。肥胖小鼠与正常小鼠相比,白色脂肪组织中共有25种线粒体蛋白表达显著上调(上调倍数≥2,P<0.01),有47种线粒体蛋白表达显著下调(下调倍数≥2,P<0.01);棕色脂肪组织中有26种线粒体蛋白表达显著上调(上调倍数≥2,P<0.01),有21种线粒体蛋白表达显著下调(下调倍数≥2,P<0.01)。结论脂肪组织线粒体蛋白质组的定量及生物信息学的分析表明,肥胖导致线粒体内三羧酸循环、氧化磷酸化、脂肪酸的合成和降解以及对外源性物质的代谢等重要的信号通路发生紊乱,并准确鉴定、定量其相关表达差异蛋白,为肥胖导致代谢紊乱的机制研究提供重要的数据支持。     

40例输精管道梗阻性无精子症诊疗策略分析

目的:探讨输精管道梗阻性无精子症(OA)的诊疗策略。方法:40例输精管道OA患者为研究对象。首先行输精管道探查,根据术中探查情况行输精管-输精管显微吻合术(VV)、输精管-附睾显微吻合术(VE)、交叉输精管-输精管吻合术、交叉输精管-附睾管显微吻合术或睾丸取精冻存术。结果:精道探查后,共行吻合手术26例,取精+冻精手术14例。40例患者中,共有3例患者失访(2例吻合患者,1例冻精患者)。随访到的24例吻合术患者术后复通率为58.3%(14/24),自然受孕率为29.1%(7/24)。随访到的13例取精+冻精患者中已有11例行ICSI/冻精助孕。结论:输精管道OA,可根据术前严格评估和术中探查行显微复通手术或取精术;复通术后可获得自然妊娠的机会,交叉显微吻合为输精管道复通的有效途径之一。     

急危重症清醒病人的心理护理技巧

近年来,随着医疗制度的改革,在护理模式上也发生了很大的变化。人们生活水平逐渐提高,对于心理护理要求越来越高,尤其是急危重症患者可能是刚从抢救手术台下来,亟需得到心理的安慰,开展心理护理显得尤其重要。急危重症患者的发病很急,而且病势凶险极易出现生命危险,对于急危重症清醒的患者,需要加强心理护理,不断的疏导患者的不良情绪,增强其治疗依从性。     

马来酸依那普利片的药动学及相对生物利用度

目的研究马来酸依那普利片在健康人体内的药动学及相对生物利用度。方法用双周期交叉实验设计,采用液相色谱-质谱-质谱联用法测定18名健康男性受试者口服马来酸依那普利片(受试制剂)和悦宁定(参比制剂)后不同时刻血浆中依那普利和其活性代谢物依那普利拉的浓度,绘制血药浓度-时间曲线并计算主要药动学参数。结果18名受试者口服含马来酸依那普利20 mg的受试制剂和参比制剂后血浆中依那普利的tm ax分别为(0.83±0.44)和(0.93±0.37)h,ρm ax分别为(70.54±26.84)和(67.01±23.75)μg.L-1,t1/2分别为(2.13±0.52)和(2.14±0.42)h,AUC0t-分别为(122.82±45.31)和(121.45±43.06)μg.h.L-1,AUC0-∞分别为(123.77±45.36)和(122.55±43.32)μg.h.L-1;依那普利拉的tm ax分别为(3.72±1.18)和(3.61±0.92)h,ρm ax分别为(33.14±9.72)和(34.15±10.98)μg.L-1,t1/2分别为(8.88±1.35)和(8.99±1.09)h,AUC0-t分别为(301.64±82.71)和(316.47±99.09)μg.h.L-1,AUC0-∞分别为(307.32±83.54)和(322.70±100.67)μg.h.L-1,以AUC0-t计算,马来酸依那普利的平均相对生物利用度为(103.0±20.1)%,依那普利拉的平均相对生物利用度为(98.4±22.4)%。结论根据双单侧检验表明2种制剂具有生物等效性。     

人肝癌细胞系Slit/Robo启动子甲基化状态及基因表达的研究

目的 研究Slit/Robo信号通路相关基因Slit1、Slit2、Slit3和Robo1、Robo3在多种人肝癌细胞系中的表达及甲基化状态,探讨与肝癌发生和发展的关系. 方法提取9种人肝细胞癌细胞株(Hep3B、HepG2、PLC/PRF/5/PRF/5、SMMC-7721、BEL-7402、MHCC97-H,MHCC97-L、LM3、LM6)及对照细胞株L02的基因组DNA和总RNA,采用半定量逆转录聚合酶链反应技术和甲基化特异性聚合酶链反应技术检测Slit1、Slit2,Slit3和Robo1,Robo3基因的基因表达水平与启动子甲基化状态.实验数据应用Paired t检验. 结果 Slit1、Slit2、Slit3基因除个别细胞株外,在不同转移潜能细胞株中均发生了DNA甲基化,同时Slit1和Slit3在mRNA水平几乎均不表达,Slit2基因表达程度在不同转移潜能的细胞株之间存在差异,随着转移潜能的增加表达大致呈下降趋势.作为Slit2受体的Robo1基因在10株肝癌细胞株中均发生甲基化修饰,但除在SMMC-7721、BEL-7402、L02不表达外,其余7种细胞株均有表达.Robo3基因相关CpG岛在9种肝癌细胞株中均未发生甲基化,同时其在mRNA水平均无表达. 结论 Slit/Robo可能在肝癌发生和发展中发挥作用.而Robo3则在肝癌中不发生表达而且其表达沉默可能不受甲基化方式调控.     

吸烟和环境烟草烟雾暴露与女性肺癌的关系的病例──对照研究

在上海市区进行了女性肺癌病例—对照研究中共调查新病例649例，对照675例。资料分析表明各种组织学类型肺癌都与吸烟有联系．其中鳞癌和小细胞癌与吸烟关系非常密切．OR分别为5.6和9．9，吸烟使腺癌危险性略有增加，OR=1.195％可信阳=0.7～1.7,吸烟对肺癌总的相对危险度为2.4（95％可信限=1.8～3.3）。各类肺癌的危险性均随每日吸烟量的增加、吸烟年限的延长和开始吸烟年龄的提前而增加。鳞癌和小细胞癌危险性上升速度最快，腺癌危险性增加缓慢，且趋势不显著。本研究还发现工作环境中的环境烟草烟雾暴露使女性非吸烟者肺癌危险性增加到1.5倍，95％可信限=1．1～2.0。未发现儿童期父母吸烟和成年期丈夫吸烟增加女性非吸烟者肺癌危险性。