无乳链球菌中可接合性转移元件的检测及携带菌株的分子流行特征调查

目的了解临床分离的无乳链球菌中可接合性转移元件(ICE)的分布,分析其耐药和分子流行病学特征。方法对临床分离的无乳链球菌进行纸片扩散法药敏试验,通过PCR检测ICESa2603家族和类ICESa2603家族ICE不同的整合酶基因及插入位点基因筛选可能携带ICE的菌株;对携带ICE的菌株进行多位点序列分型(MLST),了解其分子流行特征;对部分ICE阳性菌株进行接合试验,了解ICE及相关耐药基因的转移性并通过脉冲场凝胶电泳(PFGE)、MLST及药敏试验证实。结果 178株无乳链球菌中检出携带ICE菌株27株(15.2%),其中ICESa2603家族14株,类ICESa2603家族19株,两类家族皆为阳性的有6株。27株携带ICE的无乳链球菌MLST结果显示:最多的为ST-12型10株(37.0%),其次为ST-27型4株(14.8%)、ST-24型3株(11.1%)、ST-19型3株(11.1%)。15株红霉素耐药ICE阳性的无乳链球菌中,10株(66.7%)检测到了ICE与红霉素耐药性的接合转移。ICE阳性的无乳链球菌对红霉素、克林霉素和四环素的耐药率明显高于ICE阴性的菌株,但对左氧氟沙星的耐药率前者明显低于后者。结论 ICE在临床分离的无乳链球菌中具有较高的检出率,且可能在红霉素、四环素等耐药基因的水平传播上起着一定作用,ICE阳性菌株中的主要克隆型为ST-12型。     

头孢曲松对表皮葡萄球菌生物膜形成的抑制作用

目的观察头孢曲松等4种抗生素抑制表皮葡萄球菌生物膜的作用,探讨抗生素防治葡萄球菌感染的作用环节。方法用半定量粘附实验筛选出形成生物膜的表皮葡萄球菌15株,观察不同浓度的药物对生物膜形成的抑制作用。结果发现头孢曲松能抑制生物膜形成,而头孢他啶、红霉素无抑制葡萄球菌生物膜的作用,万古霉素对葡萄球菌有很强的杀菌作用,但无抑制生物膜的作用。结论头孢曲松能抑制葡萄球菌生物膜形成,可利用头孢曲松抑制生物膜的作用,通过阻止粘附来阻断葡萄球菌引起的粘附相关感染,达到预防感染的目的。     

2008年中国CHINET细菌耐药性监测

目的 了解国内主要地区医院临床分离菌对常用抗菌药物的耐药性.方法 国内主要地区12所教学医院(10所综合性医院,2所儿童医院)临床分离菌采用K-B法按统一方案进行抗菌药物药敏试验.按CLSI 2008版判断结果.结果 2008年1-12月收集各医院临床分离株共36 216株,其中革兰阳性菌占30.5%,革兰阴性菌占69.5%.各医院金葡菌(SA)和凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)中甲氧西林耐药株平均为55.9%和75.9%.大肠埃希菌、克雷伯菌属(肺炎克雷伯菌和产酸克雷伯菌)中产ESBLs株平均为56.2%和43.6%.葡萄球菌属中甲氧西林耐药株对β内酰胺类抗生素和其他测试药的耐药率显著高于甲氧西林敏感株,但仍有72.4%和61.2%的金葡菌分别对复方磺胺甲口恶唑和磷霉素敏感;88.8%和60.1%的CNS分别对利福平、磷霉素敏感,未发现万古霉素、替考拉宁和利奈唑胺耐药株.肠球菌属中粪肠球菌对多数测试药物的耐药率低于屎肠球菌,但对氯霉素的耐药率相反.两者中均出现少数耐万古霉素和替考拉宁菌株,根据表型推测多数为VanA型耐药,无利奈唑胺耐药株.肺炎链球菌儿童分离株中青霉素不敏感株较成人株多.肠杆菌科细菌中产ESBLs株对抗菌药的耐药率均比非产ESBLs株高.肠杆菌科细菌对碳青霉烯类抗生素仍高度敏感,总耐药率<1%.铜绿假单胞菌对亚胺培南、美罗培南耐药率分别为30.5%、24.5%;不动杆菌属对两者的耐药率分别为48.1%、49.3%.米诺环素对嗜麦芽窄食单胞菌和伯克霍尔德菌有良好抗菌活性,敏感率均>90%.出现了较多泛耐药鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌.结论 细菌耐药性仍呈增长趋势,尤其万古霉素耐药肠球菌属和泛耐药鲍曼不动杆菌有显著增多,应引起注意,并及早采取防控措施.     

2008年上海地区细菌耐药性监测

目的了解上海地区2008年14所医院临床分离株的耐药情况。方法采用纸片扩散法（K—B法）对临床分离菌株进行药敏试验。以CLSI2008年版为判断标准。结果共收集临床分离菌35797株,其中革兰阳性菌占32．3％,革兰阴性菌占67．7％。4486株金葡菌中MRSA检出率为62．3％,2025株凝固酶阴性葡萄球菌（CNS）中MRCNS检出率为77．0％。未发现万古霉素、替考拉宁和利奈唑胺耐药株。616株肺炎链球菌中7株为脑膜炎肺炎链球菌,609株为非脑膜炎肺炎链球菌。568株儿童患者非脑膜炎肺炎链球菌中青霉素敏感菌株（PSSP）占78．5％,青霉素中介株（PISP）和青霉素耐药株（PRSP）检出率分别为11．3％和10．2％。41株成人患者非脑膜炎肺炎链球菌均为PSSP,未发现青霉素不敏感株。检出3株万古霉素耐药屎肠球菌。2株为VanA型。1株为VanB型。大肠埃希菌、克雷伯菌属（肺炎克雷伯菌＋产酸克雷伯菌）和奇异变形杆菌中产ESBLs检出率分别为58．9％、49．6％和15．8％。铜绿假单胞菌对亚胺培南和美罗培南的耐药率分别为22．8％和19．2％。不动杆菌属对亚胺培南和美罗培南的耐药率分别为27．4％和28．3％。出现少数铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌、弗劳地柠檬酸杆菌和肺炎克雷伯菌对现用抗菌药（除多黏菌素外）均耐药的泛耐药株。结论细菌耐药性仍呈上升趋势,出现少数泛耐药革兰阴性杆菌,特别是泛耐药鲍曼不动杆菌较往年有较显著的增加,应引起重视。     

2007年全国CHINET链球菌属分布及耐药性监测

目的 了解全国不同地区12所医院2007年临床分离链球菌属的耐药性.方法 收集12所医院2007年度临床分离链球菌属1 821株,采用纸片扩散法( K-B 法)作药敏试验,并采用CLSI 2007 年的判断标准.结果 1 821株链球菌中肺炎链球菌占38.1 %(694/1 821) ,β溶血性链球菌占44.0 %(802/1 821),草绿色链球菌群17.8%(325/1 821).肺炎链球菌中儿童和成人患者青霉素敏感株(PSSP)的检出率分别为11.5 %和73.7%,儿童分离株中青霉素不敏感株(PISP和PRSP)的检出率分别为69.2 %和19.3 %,成人分离株中PISP和PRSP的检出率分别为13.8%和12.6%.802株β溶血性链球菌中A群占61.2%(491/802),B群23.3%(187/802),C、G、F群共占11.2%(90/802).A及B群对红霉素耐药率高,分别为93.6%和42.9%,其他菌群的耐药率为51.0%～ 64.7% ,5种菌群对青霉素保持较高敏感性.无菌部位草绿色链球菌群对青霉素、红霉素耐药率分别为20.0%和63.3%.未发现对万古霉素、利奈唑胺、替考拉宁耐药的链球菌菌株.结论 肺炎链球菌及β溶血链球菌仍是我国常见病原菌,儿童患者肺炎链球菌对青霉素的耐药率高于成人.我国β溶血链球菌对红霉素的耐药率高且存在群间差异.     

2007年中国CHINET肠球菌属耐药性监测

目的 了解中国不同地区临床分离肠球菌属对各类抗菌药物的耐药性.方法 国内主要地区12所教学医院(10所综合性医院,2所儿童医院)按统一方案、采用统一的材料、方法(KB法)和判断标准(CLSI 2007年版)进行肠球菌属的耐药性监测.结果 共分离到2 634株非重复肠球菌,最常见菌种为粪肠球菌1 281株(48.6%)、屎肠球菌1 017株(38.6%)、耐久肠球菌94株(3.6%)、鸟肠球菌50株(1.9%)、鹑鸡肠球菌50株(1.9%).粪肠球菌对呋喃妥因、磷霉素的耐药率均低于10%,对氨苄西林耐药率为12.9%,对高浓度庆大霉素耐药率接近50%;屎肠球菌耐药性明显高于粪肠球菌,对氨苄西林耐药率接近90%,对高浓度庆大霉素耐药率>70%,但对氯霉素耐药率仅为6.1%.全年共检出万古霉素耐药粪肠球菌6株和屎肠球菌21株,经PCR证实均系VanA型耐药,未发现利奈唑胺耐药株.结论 肠球菌属耐药性较为严重,VRE的发生率有增加趋势,应引起临床和实验室高度重视.     

一株福氏志贺菌中同时检出CTX-M-3型超广谱β-内酰胺酶和质粒介导的喹诺酮耐药基因qnrS

目的明确1株福氏志贺菌RJ506对第3代头孢菌素和氟喹诺酮同时耐药的分子机制。方法通过E-test检测RJ506对各抗菌药物的最低抑菌浓度(MIC),接合试验了解耐药性是否由质粒介导;用聚合酶链反应(PCR)分别扩增染色体和质粒介导的喹诺酮耐药基因并进行序列分析,检测染色体介导耐药的突变位点和质粒介导耐药的基因型;用PCR扩增CTX-M各组超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)基因并进行序列分析,检测ESBLs的基因型。结果RJ506对头孢噻肟和环丙沙星同时耐药,其染色体DNA旋转酶gyrA亚基的83位发现Ser→Leu突变,而gyrB和parC未见突变;该菌株同时含有ESBLs基因blaCTX-M-3和喹诺酮耐药基因qnrS,且分别位于不同的可接合质粒上。结论本实验在国内的志贺菌中检出质粒介导的喹诺酮耐药基因qnrS和CTX-M-3型ESBLs。     

高水平莫匹罗星耐药MRSA体外生物膜形成能力及相关基因检测

目的 了解高水平莫匹罗星耐药甲氧西林耐药金葡菌(MuH MRSA)体外生物膜形成能力及介导生物膜形成相关基因的分布.方法 对分离自上海和浙江省温州地区5所教学医院的803 株临床分离MRSA进行莫匹罗星纸片扩散法检测最低抑菌浓度(MIC),mupA基因PCR扩增筛选MuH MRSA,分光光度计检测MuH MRSA菌株体外生物膜的形成能力,PCR扩增生物膜形成相关基因(icaA、icaD、agr、sarA、sasG、bap和ccpA).结果 共筛选出53株MuH MRSA,其中仅5株(9.4%,5/53)具有体外形成生物膜的能力;基因检测显示,icaD和agr基因存在于全部MuH MRSA菌株中,而icaA、sarA、sasG和ccpA基因则分别存在于83.0%、86.8%、84.9%和92.5%的菌株中,仅有1株细菌携带bap基因.结论 大部分生物膜形成相关基因广泛分布于MuH MRSA菌株中,但仅agr基因可能是该类菌株体外生物膜形成能力的主要影响因素.     

卫生部全国细菌耐药监测网2010年华东地区细菌耐药监测

目的 总结2010年华东地区18家医院临床分离菌的分布和耐药特征.方法 采用纸片扩散法或微量稀释法对2010年华东地区18家医院临床分离菌株进行药敏试验及ESBL的检测,按CLSI 2010年标准判定结果,并用WHONET5.4软件进行数据分析.结果 18家医院共分离菌种70282株,其中革兰阴性杆菌49303株,占70.2％;革兰阳性菌20979株,占29.8％.大肠埃希菌和金黄色葡萄球菌分别占革兰阴性杆菌和革兰阳性球菌的首位.金黄色葡萄球菌中MRSA检出率为57.4％;按照CLSI新折点判断,肠杆菌科细菌对碳氢霉烯类的敏感率下 降;铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌对大部分抗菌药物的敏感率均低于70％.肠球菌属对万古霉素和替考拉宁的敏感率在99.3％ ～94.6％.结论华东地区细菌耐药性问题相对较为严重,尤其是耐药鲍曼不动杆菌等仍呈上升之势.     

2010年CHINET克雷伯菌属细菌耐药性监测

目的了解2010年中国CHINET所属14所医院临床分离克雷伯菌属细菌的耐药情况。方法采用纸片扩散法(K-B法)或自动化仪器对临床分离株作药敏试验,并按CLSI 2010年版标准判断药敏试验结果。结果临床分离的肺炎克雷伯菌5 032株和产酸克雷伯菌429株,其中<18岁患者分离的克雷伯菌属细菌占19.4%(1 058/5 461)。62.4%分离株来源于呼吸道标本。药敏试验结果显示,克雷伯菌属对亚胺培南、美罗培南和厄他培南3种碳青霉烯类抗生素的耐药率分别为8.9%、8.9%和10.7%,对头孢哌酮-舒巴坦和哌拉西林-他唑巴坦的耐药率分别为14.8%和16.7%。所有14所医院均分离出对1种以上碳青霉烯类抗生素耐药菌株,其中肺炎克雷伯菌508株,产酸克雷伯菌31株。221株肺炎克雷伯菌和1株产酸克雷伯菌为泛耐药株,主要集中于2所医院(共188株)。结论克雷伯菌属细菌对碳青霉烯类抗生素、头孢哌酮-舒巴坦和哌拉西林-他唑巴坦仍保持良好的敏感性。按CLSI 2010年版标准,肺炎克雷伯菌和产酸克雷伯菌对碳青霉烯类抗生素耐药菌株的分离率分别为10%和7.2%,且耐药株主要集中于2所医院,加强医院感染控制,防止此类耐药菌株在医院内播散至关重要。