上海地区志贺菌耐药性及超广谱β内酰胺酶基因型分析

目的 了解上海地区志贺菌的耐药特征,明确其所携带ESBLs的基因型.方法 用K-B纸片扩散法对收集到的216株临床分离的志贺菌进行耐药性检测和ESBLs确证试验;采用接合试验了解耐药性是否由质粒介导;用CTX-M通用引物对产ESBLs的菌株的耐药基因进行PCR扩增.结果 药敏结果显示志贺菌对萘啶酸、氨苄西林、氨苄西林-舒巴坦和复方磺胺甲口恶唑的敏感率均低于50%,对头孢噻肟的敏感率为81.5%,ESBLs的检出率为18.5%(40/216),其中87.5%(35/40)的ESBLs接合试验阳性.PCR扩增显示CTX-M基因阳性率为90%(36/40),序列分析证实其型别主要为CTX-M-14(20/40)、CTX-M-15(13/40)和CTX-M-3(3/40).结论 上海地区志贺菌呈多重耐药,对第三代头孢菌素耐药性有增高趋势.上海地区志贺菌所携带ESBLs的基因型主要为CTX-M-14、CTX-M-15和CTX-M-3.     

错配PCR对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 mecI基因点突变的分析

目的建立用于检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）上mecI常见突变位点的错配聚合酶链反应（PCR）,并用该方法分析上海地区分离MRSA中mecI G→T突变的发生情况。方法用头孢西丁纸片扩散法、mecA基因PCR法检测MRSA,用琼脂稀释法检测细菌的最低抑菌浓度（MIC）,用PCR检测mecI基因,建立错配PCR并用20株mecI基因和mec启动子区分析清楚的菌株对该方法进行评价,用错配PCR分析111株MRSA中mecI基因的突变情况。结果111株mecI阳性的MRSA中,mecI43位突变的5株,mecI202位突变的102株,另有4株MRSA的mecI43位和202位碱基均无突变。结论就其简便易行和准确性而言,错配PCR可用于检测mecI上已知的突变。     

革兰阴性菌中1类整合子的分布及其与耐药的关系

目的在革兰阴性细菌中检测1～3类整合子，并分析整合子对细菌耐药性的影响。方法应用聚合酶链反应对临床分离的340株革兰阴性细菌进行整合子的初筛，对于整合子阳性的菌株，再利用限制性片段长度多态性技术(RFLP)进行分型。结果340株菌中有87株(25．6％)含有1类整合子，其中有1株同时含有2类整合子，它们对10种抗菌药物的耐药率依次为亚胺培南(9．2％)、哌拉西林/他唑巴坦(34．5％)、阿米卡星(34．5％)、头孢吡肟(35．6％)、头孢他啶(41．4％)、头孢噻肟(65．5％)、庆大霉素(66．7％)、头孢曲松(67．8％)，替卡西林/克拉维酸(72．4％)、环丙沙星(73．6％)。结论1类整合子广泛地存在革兰阴性细菌中，1类整合子阳性菌株对多种抗生素的耐药率大于整合子阴性的菌株。     

血浆(1,3)-β-D葡聚糖在诊断侵袭性真菌感染的荟萃分析

目的 通过荟萃分析系统评价血浆(1,3)-β-D葡聚糖在诊断侵袭性真菌感染的诊断价值.方法 按照系统评价的要求检索CNKI数据库等,获得12篇符合纳入标准的文献,患者共2884例,对其进行荟萃分析,并评价荟萃分析结果的稳定性和发表偏倚.结果 血浆(1,3)-β-D葡聚糖诊断侵袭性真菌感染的研究资料具有同质性(异质性检验x2 =15.17,P=0.17,I2=28％),因此,合并效应量OR采用固定效应模型,OR合并=2.02,其95％CI=1.81～2.25,总体效应检验,差异有统计学意义(Z=12.49,P＜0.01);试验组检出率高于对照组.结论 从现有的临床证据来看,血浆(1,3)-β-D葡聚糖是诊断侵袭性真菌感染的有效方法,起到辅助临床诊断作用.     

SEANIR监测中国15所教学医院不发酵糖革兰阴性杆菌对13种抗菌药物的药敏试验

目的分析SEANIR监测2008年中国15所教学医院医院获得性不发酵糖革兰阴性杆菌对抗菌药物的敏感性,并评价帕尼培南体外药敏试验方法。方法收集2008年分离自中国15所教学医院医院获得性感染患者的非重复鲍曼不动杆菌349株、铜绿假单胞菌359株、嗜麦芽窄食单胞菌145株和洋葱伯克霍尔德菌100株,用琼脂稀释法测定13种抗菌药物的MIC,对比MH培养基和1:40 MH培养基对帕尼培南药敏试验结果的影响。结果鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类抗生素的敏感率仅为51.6%～63.7%;多黏菌素B和米诺环素对鲍曼不动杆菌的体外抑菌活性最强,且对亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌仍具有较高的抑菌率(分别98.1%和72.8%)。多黏菌素B和阿米卡星对铜绿假单胞菌的抑菌率最高(分别为96.1%和83.3%),其次为用1:40 MH培养基测定帕尼培南、哌拉西林-他唑巴坦和美罗培南的抑菌率(72.4%～77.2%)。嗜麦芽窄食单胞菌和洋葱伯克霍尔德菌对米诺环素和甲氧苄啶-磺胺甲噁唑均较敏感(敏感率为78.6%～98.0%)。结论多黏菌素B对鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌,米诺环素对鲍曼不动杆菌、嗜麦芽窄食单胞菌和洋葱伯克霍尔德菌,具有较强的体外抗菌活性。帕尼培南的体外药敏试验,鲍曼不动杆菌应采用MH培养基测定,铜绿假单胞菌应采用1:40 MH培养基测定,其抗菌作用与亚胺培南较为接近。     

2011年中国CHINET细菌耐药性监测

目的了解国内主要地区临床分离菌对常用抗菌药的敏感性和耐药性。方法国内主要地区15所教学医院(13所综合性医院、2所儿童医院)临床分离菌采用纸片扩散法或自动化仪器法按统一方案进行细菌药敏试验。按CLSI 2011年版判断结果。结果 2011年1 12月收集各医院临床分离菌共59 287株,其中革兰阳性菌16 872株,占28.5%,革兰阴性菌42 415株,占71.5%。金葡菌(SA)和凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)中甲氧西林耐药株的检出率平均分别为50.6%和74.6%。甲氧西林耐药株对β内酰胺类抗生素和其他测试药的耐药率显著高于甲氧西林敏感株。MRSA中有73.3%的菌株对甲氧苄啶磺胺甲噁唑敏感;MRCNS中有88.2%的菌株对利福平敏感。未发现万古霉素、替考拉宁和利奈唑胺耐药株。肠球菌属细菌中粪肠球菌对所测试的抗菌药(氯霉素除外)的耐药率均显著低于屎肠球菌,两者中均有少数万古霉素耐药株,根据表型推测多数为VanA型耐药。肺炎链球菌非脑膜炎株成人株和儿童株中PSSP所占比例较2010年均略有升高,PRSP的检出率均有所下降。大肠埃希菌、克雷伯菌属细菌(肺炎克雷伯菌和产酸克雷伯菌)和奇异变形杆菌中产ESBLs株分别平均为50.7%、38.5%和13.8%。肠杆菌科细菌中产ESBLs株对测试药物的耐药率均比非产ESBLs株高。肠杆菌科细菌对碳青霉烯类抗生素仍高度敏感,总耐药率4%～6%。不动杆菌属细菌(鲍曼不动杆菌占88.6%)对亚胺培南和美罗培南的耐药率分别为60.4%和61.4%。肺炎克雷伯菌、鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌中仍有少数泛耐药株。结论细菌耐药性仍呈增长趋势,多重耐药和泛耐药菌株在某些科室内的流行播散对临床构成严重威胁,应进行流行病学调查并采取有效的控制措施。     

2007年CHINET大肠埃希菌和克雷伯菌属耐药性监测

目的 了解2007年我国不同地区12所医院临床分离的大肠埃希菌和克雷伯菌属的耐药性.方法 采用纸片扩散法( K-B 法)对临床分离株作药敏试验.结果 共收集CHINET 细菌耐药性监测网12所医院分离的大肠埃希菌6 527株,肺炎克雷伯菌3 051株,催产克雷伯菌206株.其中儿童分离株大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌分别占24.0%(1 566/6 527)和 17.8% (542/3 051).大肠埃希菌和克雷伯菌属产ESBLs菌株检出率分别平均为55.0%(12.3%~72.1%)和44.9%(15.4%~ 70.6% ).各医院ESBLs检出率存在一定差异.药敏结果显示,大肠埃希菌和克雷伯菌属对亚胺培南、美罗培南和头孢哌酮-舒巴坦都保持高度敏感,耐药率均低于10%.产ESBLs株对上述3种药物的耐药率也均低于20%.50%以上的产ESBLs株对庆大霉素和环丙沙星耐药.有5所医院分离出对碳青霉烯类抗生素不敏感菌株,其中肺炎克雷伯菌21株,大肠埃希菌2株,产酸克雷伯菌1株.其中20株肺炎克雷伯菌为泛耐药株,占0.7%(20/3 051).结论 大肠埃希菌和克雷伯菌属对碳青霉烯类抗生素和头孢哌酮-舒巴坦仍保持高度敏感性,不同地区的分离株中产ESBLs菌株检出率和药敏试验结果存在差异,儿童分离株中产ESBLs检出率上升值得关注.     

105株志贺菌流行菌株的血清分型及耐药性分析

目的 调查志贺菌在上海地区流行的主要血清型和耐药性。方法 收集临床分离的志贺菌105株进行生化鉴定、血清学分型和抗生素敏感性试验。结果 105株志贺菌中51株为宋氏志贺菌，占48．6％；54株为福氏志贺菌，占51．4％(包括5株福氏变异株，占总数的4．7％)。宋氏志贺菌对抗菌药物的敏感率依次为氟喹诺酮类100％、头孢噻肟94．1％。而福氏志贺菌对抗菌药物的敏感率依次为头孢噻肟98．1％、氟喹诺酮类70％。结论 上海地区志贺菌感染以福氏志贺菌和宋氏志贺菌为主，福氏志贺菌中以福氏2型为主，占66．7％，其次为福氏1型，占20．4％。福氏志贺菌对各种抗生素耐药性有增高趋势，必须引起临床重视。     

2010年中国CHINET铜绿假单胞菌耐药性监测

目的了解2010年我国不同地区铜绿假单胞菌临床分离株的耐药性和耐药特征,指导临床合理使用抗菌药物。方法对全国14所医院临床分离的5 080株铜绿假单胞菌按照统一的方案,采用统一的材料、方法(K-B法)和判断标准(CLSI 2010年版),进行铜绿假单胞菌的耐药性监测,并用WHONET5.4软件进行数据分析。结果 2010年14所医院共收集5 080株临床分离的铜绿假单胞菌,其中91.2%分离自住院患者;69.9%分离自呼吸道标本。铜绿假单胞菌对阿米卡星的耐药率最低,平均为15.3%,对其他抗菌药物的耐药率均高于18%。昆明一医院的分离株对各种抗菌药物的耐药率均高于28%,对其中13种抗菌药物的耐药率是14所医院中最高者;北京一医院分离的菌株对大多数抗菌药物的耐药率在40%左右,甘肃省一医院的分离株对抗菌药物(除头孢哌酮和氨曲南外)耐药率均低于20%;上海一儿童医院的分离株对各抗菌药物的耐药率均低于5%。从ICU分离菌对各种抗菌药物的耐药率均高于门诊、内科、外科和整体分离菌的耐药率(P=0.001)。各医院泛耐药铜绿假单胞菌的检出率平均为1.7%。结论我国临床分离的铜绿假单胞菌对常用抗菌药物的耐药性仍处于较高水平,但本次有轻微下降趋势。不同地区、不同医院的分离株对抗菌药物的耐药性相差较大,ICU仍应是监控重点。医疗机构应加强细菌耐药监测,指导临床合理使用抗菌药物。同时要加强感染控制措施,预防和控制耐药菌株的医院内流行。     

2010年中国CHINET尿液标本中细菌的分布和耐药性监测

目的了解国内主要地区14所教学医院尿标本中的临床分离菌及其对常用抗菌药物的耐药性。方法采用K-B法按统一方案进行细菌药物敏感试验。按CLSI 2010版标准判断结果。结果 2010年1—12月各医院尿标本临床分离菌共9 301株;占临床分离菌株的19.4%(9 301/47 850)。其中革兰阳性菌2 403株,占25.8%,革兰阴性菌6 898株,占74.2%。以大肠埃希菌最为多见,占49.0%;其次为肠球菌属细菌占22.1%。约68%的菌株分离自住院患者,32%的菌株分离自门急诊患者;约64%的菌株分离自女性患者,36%的菌株分离自男性患者。大肠埃希菌、克雷伯菌属细菌(肺炎克雷伯菌+产酸克雷伯菌)以及奇异变形杆菌中的ESBLs的检出率(58.4%、59.8%和14.4%)与同期CHINET监测的检出率相仿。粪肠球菌和屎肠球菌中均有少数万古霉素耐药株,万古霉素耐药肠球菌(VRE)的检出率粪肠球菌为0.5%(5株),屎肠球菌为2.4%(24株)。粪肠球菌对呋喃妥因、磷霉素和氨苄西林的耐药率≤10%;屎肠球菌除对糖肽类抗生素、利奈唑胺和磷霉素外,对其他测试药的耐药率在40%～94%。大肠埃希菌对碳青霉烯类抗生素的耐药率较同期其他标本分离株略低,铜绿假单胞菌和不动杆菌属细菌对之耐药率则较低。在部分肠杆菌科细菌和不发酵糖革兰阴性杆菌中检出少数泛耐药菌株。结论尿标本分离菌主要为大肠埃希菌、其次为肠球菌属细菌,两者约占70%。VRE的检出率为2.4%。与其他标本分离菌相比,尿标本中分离的大肠埃希菌、铜绿假单胞菌和不动杆菌属细菌对碳青霉烯类抗生素的耐药率较低。不同医院尿培养分离菌对常用抗菌药的耐药率较低,且有很大差异,提示治疗尿路感染应根据本单位细菌耐药性监测资料选用抗菌药物。