X线照射对外周血淋巴细胞Ku70表达与染色体易位的影响

目的分析X线照射引起的染色体易位与DNA双链断裂修复蛋白Ku70表达的关系。方法收集12例健康人外周血标本进行X线照射(0.5 Gy、1 Gy和2 Gy剂量),并进行淋巴细胞分离培养。用荧光原位杂交(FISH)检测其染色体易位率,实时荧光定量PCR(RT-PCR)和western blot分别检测Ku70 mRNA和蛋白质的表达水平。分析X线照射剂量对染色体易位率和Ku70表达水平影响,以及染色体易位率与Ku70表达水平的相关性。结果 FISH检测结果表明,淋巴细胞经1 Gy和2 Gy剂量X线照射后,染色体易位率均高于对照组(P均0.05);Ku70 mRNA表达量随照射剂量增加而增加(P0.05);并且染色体易位率与Ku70在mRNA和蛋白质水平的表达存在弱相关(r分别为0.473、0.386,P均0.05)。结论染色体易位率和Ku70的表达都与X线照射剂量关系密切,且染色体易位率与Ku70表达间也存在相关性。     

血液病患者9号染色体倒位检测结果调查

目的调查血液病患者9号染色体倒位(pericentric inversion of chromosome 9,inv(9))的发生率。方法用R显带技术分析2010年1月至2015年10月苏州大学附属第一医院确诊的39 589例血液病患者染色体核型,比较各血液病患者inv(9)检出率的差异。结果血液病患者inv(9)总检出率为1.44%(571/39 589);急性髓系白血病(AML)和非AML患者inv(9)检出率分别为3.28%(172/5 251)和1.17%(399/34 338),差异有统计学意义(P0.01);在AA和非AA患者inv(9)检出率分别为3.64%(43/1 181)和1.39%(528/38 408),差异有统计学意义(P0.01)。结论 AML和AA患者inv(9)检出率升高。     

临床微生物形态学及特殊耐药性检测室间质量评价体系的建立及应用

目的研究临床微生物形态学及特殊耐药性检测室间质量评价(external quality assessment,EQA)体系的建立、运行与实施,探讨该体系的临床应用价值。方法每年2次定期在甘肃省对各参评实验室发放已知的临床微生物细(真)菌落、革兰染色、抗酸染色图片,以及美国临床和实验室标准化协会(Clinical and Laboratory Standards Institute,CLSI)标准更新的知识点(特殊耐药性检测)结果图片。要求各参评单位在规定时间内完成判读并上报结果。回报结果以完全符合、基本符合和不符合的形式进行总结、分析。结果临床微生物形态学及特殊耐药性检测EQA体系运行2年,共进行24次,年度完全符合率逐年上升,2015年达到91.3%。结论临床微生物形态学及CLSI标准知识点考核EQA体系可督导二级以上医院临床微生物检验人员掌握形态学识别技能及学习CLSI知识点,全面提高临床微生物人员专业技能。     

Ⅰ型胶原羧基端肽β特殊序列和Ⅰ型前胶原N 端前肽在绝经后女性骨质疏松性骨折愈合中的变化

目的观察血清Ⅰ型胶原羧基端肽β特殊序列(β-CTx)和Ⅰ型前胶原N端前肽(P1NP)在绝经后女性骨质疏松性骨折愈合中的变化特征。方法对2014-2015年就诊的560例绝经后女性患者进行追踪随访,剔除不符合条件者及失访者,余下51例绝经后女性骨质疏松性骨折患者作为实验组,同时随机选择40例未发生骨折的对应年龄段的绝经后女性作为对照组,分别检测各研究对象的骨密度值。追踪并检测对照组人群首诊时以及实验组患者骨折48 h内、第3个月、第6个月、第12个月的β-CTx、P1NP值,并进行对比分析。结果实验组患者48 h内、第3个月、第6个月、第12个月β-CTx值分别为(554.14±243.13)、(682.41±265.08)、(594.21±260.72)、(556.25±226.28)pg/m L;P1NP值分别为(55.56±22.86)、(69.52±21.62)、(59.02±26.92)、(56.63±25.39)ng/m L,对照组患者β-CTx、P1NP值分别为(348.65±150.54)pg/m L、(41.89±16.94)ng/m L,实验组β-CTx、P1NP各个时间截点的值均明显高于对照组(P均0.01);绝经后女性发生骨质疏松性骨折后β-CTx、P1NP增加明显(P0.01)。结论绝经后女性骨质疏松症患者发生非暴力骨折后β-CTx、P1NP明显增加,3个月时基本达到峰值水平,持续到12个月仍处于高水平状态。     

mTOR活化对抗β2 GPI抗体/β2 GPI复合物诱导THP-1细胞组织因子表达的影响

目的探讨雷帕霉素靶蛋白(mTOR)在抗β_2糖蛋白I(β_2GPI)/β_2GPI复合物诱导THP-1细胞组织因子(TF)表达中的作用。方法用抗β_2GPI抗体/β_2GPI和β_2GPI/Ig G-APS处理THP-1细胞,mTOR抑制剂雷帕霉素(100 nmol/L)进行干预实验;收集细胞总RNA和蛋白质,实时定量PCR(RT-q PCR)和TF活性试剂盒分别检测THP-1细胞中TF mRNA表达水平及其活性,western blot检测THP-1细胞中mTOR、磷酸化mTOR(p-mTOR)、p38、p-p38、ERK1/2、p-ERK1/2、JNK、p-JNK、NF-κB p65和p-NF-κB p65的表达情况。结果抗β_2GPI抗体/β_2GPI和β_2GPI/Ig G-APS复合物均能明显增加THP-1细胞TF mRNA和TF活性以及mTOR磷酸化水平(P均0.05);雷帕霉素能明显降低抗β_2GPI抗体/β_2GPI和β_2GPI/Ig G-APS诱导THP-1细胞TF的表达水平以及mTOR磷酸化的效应(P均0.05),也能明显地削弱p38、ERK1/2和NF-κB p65的磷酸化水平(P均0.05),而对JNK的磷酸化水平无抑制效应(P0.05)。结论抗β_2GPI抗体/β_2GPI复合物能够刺激THP-1细胞mTOR的活化,并能影响TF的表达。     

维持性血透治疗的2型糖尿病肾病患者血浆eotaxin-2、sTNFRⅡ等表达水平与代谢综合征状态的关系

目的探讨维持性血透(MHD)治疗的2型糖尿病肾病(DN)患者血浆嗜酸性粒细胞趋化因子-2(eotaxin-2)、可溶性肿瘤坏死因子受体Ⅰ、Ⅱ(s TNFRⅠ、Ⅱ)等表达水平与代谢综合征(MS)状态的关系。方法选取接受MHD治疗3个月以上且病情稳定的DN患者30例,以首次确诊且尚未实施任何治疗的单纯2型糖尿病(T2D)患者和体检健康者各30例为对照;检测MS相关指标血压、腰围、体质指数、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、空腹血糖(FBG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、C反应蛋白(CRP)等;AAH-INF-G3抗体芯片法分析40种细胞因子的表达水平;Pearson法分析其与MS相关指标的相关性。结果 DN患者和T2D患者MS发生率分别为88.89%和33.33%。与T2D患者和健康人对照者相比,DN患者有较多的MS危险因素个数、较高的腰围和较低的体质指数;血浆eotaxin-2和趋化因子I-309水平升高,同时伴有s TNFRⅠ、Ⅱ的表达水平升高。Pearson相关分析提示,血浆eotaxin-2、I-309与MS危险因素TG、FBG及舒张压(DBP)水平等呈现明显正相关。此外,血浆s TNFRⅡ和I-309表达水平均与CRP水平呈显著正相关。结论 MHD治疗的DN患者机体内存在着消耗性MS微炎症状态。糖脂代谢的异常影响机体的免疫生理状态,造成免疫炎症微环境。eotaxin-2、I-309可能参与这种微炎症状态的慢性化、持续化,并进一步通过s TNFRⅠ、Ⅱ的上调而加重肾脏损伤,导致MHD治疗的DN患者MS状态的形成。     

常规临床检验项目如何选择不同分析性能规范模型

2014年,欧洲临床化学和检验医学联合会(EFLM)等机构在米兰联合召开了一次关于设定分析性能规范(analytical performance specifications)的战略性会议。该会成立了一个任务完成小组,专门负责根据不同分析性能规范设定模型的准则,为常规临床检验项目选择合理的模型并设定合理的分析性能规范。模型1,基于分析性能对临床结果的影响设定分析性能规范。选择该模型的被测量应在特殊疾病的诊断和/或监测以及医疗决策的制定中起关键且明确的作用,其相应测量结果所建立的切值/决定限在疾病的诊断、筛查或监测过程中也起核心作用。模型2,基于被测量的生物学变异组分来设定分析性能规范。选择该模型的被测量应在特殊疾病的诊断和/或监测,以及临床表现中不起关键作用,且被测量的浓度处于稳定状态。模型3,基于测量的当前技术水平来设定分析性能规范。选择该模型的被测量应该是无法使用前2种模型以及需要进一步研究临床结果或生物学变异数据的被测量。该文介绍常规临床检验项目如何选择不同分析性能规范模型。     

全封闭一次性小培养基的研制及其在丝状真菌小培养中的应用

目的研制一种安全实用的一次性真菌小培养基。方法参照钢圈小培养法原理。底板选用透明度高的PVC为原材料,同常规使用的载玻片大小(25.2 mm×75.9 mm×1.05 mm),板面两端磨砂设计;圆形培养皿直径19.4 mm,侧面高3.75mm,其上接种孔直径为2.4 mm,可随用户需求灌注PDA琼脂等培养基,加孔塞封闭;上封盖片采用钢化玻璃制成。一次性真菌小培养基用培养湿盒进行保存,两端水槽内加海绵条,加盖密封盖。分别观察临床丝状真菌在该全封闭一次性小培养基中的生长状况、镜下形态及染色效果以及培养基的保存效果。结果该全封闭一次性小培养基实际应用效果良好,真菌生长状况可视、色素明显,镜下可观察到真菌原生态生长形态,可直接进行染料灌注染色,且效果良好。培养基包装后于4℃保存3个月后外观不变,量未见减少。结论成功研制一种操作简单、透明度高、密封效果好、培养性能可靠、生物安全性高的全封闭一次性小培养基。可随时在镜下观察生长状况、适用于油镜下直接观察、可直接进行棉蓝染色,临床试用效果良好,适用于各级实验室的真菌形态学检查。     

眼部感染性疾病患者标本涂片检查结果分析

目的通过对眼部感染性疾病患者眼部标本的涂片和培养结果的分析,探讨如何提高眼部标本微生物的检出率。方法收集771份眼部微生物标本,采用革兰染色进行涂片镜检和微生物培养,并对结果进行统计学分析。结果 771份眼部标本涂片阳性率为33.07%,培养阳性率为42.28%,涂片联合培养阳性率为50.84%。涂片联合培养阳性率明显高于涂片、培养单独检测的阳性率(P0.05)。涂片标本共检出病原菌261株,培养共检出338株。结论涂片检查是培养很好的补充,两者联合应用的阳性检出率优于任何单一方法;涂片结果报告速度较培养快,能在早期为眼部感染的诊断和治疗提供重要依据,临床实验室应该重视涂片检查。     

透景HPV检测试剂在高危HPV DNA检测及宫颈上皮内瘤变筛查中的应用

目的评价国产透景试剂(透景HPV)用于HR-HPV DNA检测及宫颈病变诊断的有效性和可行性。方法 602例来自医院门诊健康体检的妇女或者宫颈上皮内瘤变(CIN)住院治疗的患者,经病理学明确诊断。采用透景试剂和Roche试剂(cobas HPV)平行检测子宫颈脱落细胞标本,比较两种方法的一致性。以病理诊断结果作为金标准,评估透景试剂和Roche试剂筛查子宫颈上皮内瘤变的敏感性和特异性。结果透景试剂与Roche试剂总一致率为94.62%(Kappa=0.881),阳性一致率为96.85%,阴性一致率为90.53%;透景试剂与Roche试剂HPV16、HPV18及其他12种高危型HPV的总一致率分别为95.92%(Kappa=0.906),98.70%(Kappa=0.885)和92.76%(Kappa=0.805)。校正后两种检测的总一致率为98.51%(Kappa=0.967),阳性一致率为98.87%,阴性一致率为97.81%;校正后HPV16,HPV18及其他12种高危型HPV的总一致率分别为97.40%(Kappa=0.940),100%(Kappa=1.00)和97.58%(Kappa=0.950)。透景试剂筛查CIN2+的敏感性和特异性分别为91.52%和52.06%,Roche试剂筛查CIN2+的敏感性和特异性分别为91.52%和54.29%,无统计学差异(P0.05)。结论国产透景试剂与进口Roche试剂检测HR-HPV的一致性高,是有效的HPV DNA检测方法,可用于人群中宫颈癌和癌前病变的筛查。