小鼠固醇载体蛋白2原核表达载体的构建与表达纯化

目的 构建小鼠固醇载体蛋白2(SCP-2)融合蛋白表达载体,并在原核细胞内表达及纯化获得具有活性的融合蛋白,为进一步研究SCP-2的生物学功能提供基础.方法 提取BALB/c小鼠肝脏组织总RNA,通过RT-PCR扩增得到鼠SCP-2编码序列,然后将该编码序列克隆到带有His标记的载体pET14b上,重组质粒经PCR、酶切及测序鉴定正确后转化大肠埃希菌BL21(DE3),用异丙基β-D硫代半乳糖(IPTG)诱导融合蛋白表达,用镍离子亲和层析的方法纯化融合蛋白并进行复性,然后切取分子量正确的条带用SDS-PAGE及质谱技术进行鉴定.结果 重组质粒经PCR、酶切和测序鉴定证明载体构建正确.融合蛋白表达纯化后获得了分子量约59kD的融合蛋白,符合预期大小,并经质谱分析证明该融合蛋白的表达正确.结论 成功构建了带His标签的SCP-2原核表达载体,并成功表达及纯化出该融合蛋白,为深入研究SCP-2的相关生物学功能提供了一个重要的工具.     

主动脉夹层动脉瘤诊断及治疗进展

主动脉夹层动脉瘤又称主动脉夹层分离 ,是指血液渗入主动脉壁中层形成夹层血肿并沿主动脉壁延伸剥离的一种心血管系统的危重疾病。临床表现复杂 ,死亡率极高。及时的药物及外科治疗使此类病人早期生存率超过 90 %并使远期生存率增加 ,故早期诊断及治疗是降低死亡率的关键。1　发病率、生存率、死亡率主动脉夹层动脉瘤在国外是最常见且危险的主动脉急症 ,美国发病率为 5～ 10人 / 10 0万人口 ,且发病率有逐年增长趋势 ,美国每年至少新发现夹层动脉瘤2 0 0 0例 ,由于拥有先进的诊断技术 ,目前西方此病几乎可 10 0 %诊断。但在国内 ,由于认识不…     

急性创伤性膈疝误诊病例分析

我院自1976年5月至1986年3月,收治创伤性膈疝4例,其中右侧1例,左侧3例。经手术治愈3例,死亡1例。这4例闭合性膈疝,入院时均误诊。为总结经验教训,报告如下。     

缓释异搏定与尼群地平治疗高血压性左心室肥厚的疗效比较

按照随机和单盲法，将５４例原发性高血压左心室肥厚患者分为缓释异搏定组和尼群地平组，治疗前后进行血压，心率，心功能及左心室肥厚测定，结果发现，治疗１６周后两组患者血压的均明显降低，与治疗前相比较，差异有显著性意义（Ｐ〈０．０１），缓释异搏定组患者心率下降（Ｐ〈０．０１），左心室舒张功能明显改善（Ｐ〈０．０１），肥厚的左心室逆转（Ｐ〈０．０５）；尼群地平组患者心率，心功能和左心室肥厚均无明显改变（Ｐ，     

序贯吻合在非体外循环下冠状动脉旁路移植术中的应用

目的 探讨非体外循环下序贯吻合冠脉搭桥术的临床疗效.方法 冠心病患者20例择期手术,均采用非体外循环下,序贯吻合的方式行冠状动脉旁路移植术.术中精细操作,围手术期应用血管活性药物进行有效的心血管功能支持.结果 20例患者分别搭桥3～6支,手术经过均顺利,围术期无严重并发症发生,术后第1d均顺利拔管转入普通病房.术后平均...     

NP方案与TP方案治疗晚期非小细胞肺癌临床分析

目的评价NP方案、TP方案治疗晚期非小细胞肺癌的疗效和毒副反应.方法 NP方案:长春瑞滨(NVB) 25 mg/m2,快速静脉滴注,第1、8天;顺铂(PDD)45 mg/m2,静脉点滴,第1～2天.TP方案:紫杉醇(PTX)135 mg/m2,静脉点滴,第1天,持续3 h;PDD 80 mg/m2,静脉点滴,第2天.21 d为一周期.结果 NP组30例,CR 2例(6.7%),PR 12例(40.0%),SD 12例(40.0%),总有效率46.7%;TP组29例,CR 1例(3.4%),PR 12例(41.4%),SD 11例(37.9%),总有效率44.8%.NP组和TP组中位缓解时间分别为5.5个月和4.5个月.初治优于复治(NP组为72.7%对31.6%,P=0.0308;TP组为75.0%对33.3%,P=0.0480);Ⅲb期优于Ⅳ期(NP组为77.8%对33.3%,P=0.0288;TP组为85.7%对31.8%,P=0.0176).剂量限制性毒性主要为骨髓抑制,NP组较TP组稍重,白细胞、血小板减少发生率分别为66.7%、51.7%和33.3%、31.0%.TP组脱发、周围神经毒性/疼痛较NP组重,而NP组静脉炎及胃肠道反应较TP组重.无Ⅳ度反应出现,患者均能够较好地耐受,不影响化疗继续进行.结论 NP方案、TP方案治疗晚期非小细胞肺癌安全有效,既可用作一线方案,也可用作二线方案,且二者无明显交叉耐药性,可互为挽救方案.     

Extracorporeal regulation effect of cytokines combination on stem cell or progenitor of umbilical blood

AIM：To study the regulation effect of different cytokines combinations on stem cell or progemitor of umbilical blood when no blood serum and matrix exist.METHODS:Collect and analyze the 23 sample of umbilical blood.RESULTS:(1) The combination of SCF+Flk2/Flt3 ligand and (FL)&;#177;TPO can amplify CD34^+,CD34+Thy-1^+,CD34+CD33+and LTC-IC in umbilical blood effectively and rapidly.(2) After add solubility type (sIL-6R) of IL-6 and IL-6 receptor into this combination,the stem cell or progenitor pmliferated prominently,When add IL-6 alone(without sIL 6R),the content of CD34^+ cells and LTC IC didn‘‘‘‘‘‘‘‘t increased obviously in early stage,but the amplification of CFU-Mix and BFU-E was not prominent as CFU-GM.(3) Detect apoptosis rate of cells by FITC-Annexin-V labeled by membranous change in early stage of cellular apoptosis,After add Flt3L and /or IL-6+ sIL-6R,the Annexin-V positive cells decreased from 15.2%-19.1% to 2.8%-3.5%,CONCLUSION:In suspending system composed with SCF+TPO+Flt3L+IL-6+sIL-6R without matrix and blood serum,the umbilical blood can not only produce large amount of committed progenitor but also Keep certain quantitive hematopoietic cells of early stage.     

纳络酮对犬心跳骤停复苏后血流动力学影响的实验研究

目的观察纳络酮(naloxone)对犬心跳骤停复苏后血流动力学的影响。方法体外电击诱发犬室颤(VF)，3min后复苏，25只犬随机分为常规治疗组(CPR组)12只，纳络酮组(NLX组)7只，正常对照组(NS组)6只，采用Swan—Ganz漂浮导管监测复苏前和后6h的CO。结果CPR组和NLX组各有6只完成6h的观察，两组间的恢复自主循环时间(ROSC)无差异。CPR组的平均动脉压在复苏后4、6h低于NS组，而NLX组在复苏后2、4、6h高于CPR组，与NS组无差异。复苏成功后0—JhNLX组和CPR组的CO均低于NS组，而NLX组则在复苏后1～6h高于CPR组。结论诱发室颤犬复苏成功后存在着心功能不全，NLX能改善犬心肺复苏后血流动力学状态。     

代谢综合征患者红细胞膜胰岛素受体及油酸干预研究

目的对比研究男性代谢综合征(MMS)患者与健康男性红细胞膜胰岛素受体(EIR)数目及亲和力差异及其与血浆游离脂肪酸(FFAs)、胰岛素敏感指数(ISI)的关系;观察油酸对两组人群离体红细胞的干预影响,初步探讨FFAs致胰岛素抵抗的机理。方法测定30例MMS患者与30例健康男性的空腹血糖(FBS)、空腹胰岛素(FINS)、FFAs,EIR的数目和亲和力;各组随机抽取10例,分离洗涤红细胞,以油酸或平行对照组液体孵育,测定两组干预前后EIR的数目和亲和力。结果①MMS组高、低亲和力EIR数目显著低于正常对照组(P<0·05),高亲和力EIR数目与FFAs显著负相关(P<0·05),ISI与高亲和力EIR数目显著正相关(P<0·05)。③油酸干预后,正常对照组中高、低亲和力EIR数目较干预前明显下降,经平行对照组校正后,差异仍有显著性(P<0·05);MMS组中高、低亲和力EIR数目较干预前明显下降,经平行对照组校正后,仅高亲和力EIR数目变化值差异具有显著性(P<0·05)。各组干预前后高、低亲和力EIR的亲和常数均无显著性改变。结论①MMS患者存在胰岛素抵抗。②MMS患者EIR的高亲和力位点数下降与血浆中FFAs升高密切相关,并间接反映了胰岛素抵抗程度。③油酸可能使胰岛素受体结合胰岛素能力下降,导致胰岛素抵抗。     

关节镜手术患者的心理调查及对策

关节镜手术具有术后病残率低、患者体力恢复快、切口小、刀口愈合瘢痕不明显等特点。为提高其疗效 ,我们对 10 6例行关节镜手术的患者于术前行心理调查 ,并依据调查结果制定护理对策 ,取得较好效果 ,现报告如下。资料与方法 :本组患者年龄 2 0～ 83岁 ,平均 6 9.8± 13.7岁。文化程度高中以上 36例 ,初中以下 5 8例。采用问卷调查的方法 ,自行设计调查表 ,向患者说明目的 ,当场收回调查表。主要调查内容为手术前后对疾病相关内容的需求、最担心的问题及注意事项。结果 :患者对手术前后疾病相关内容的需要依次为手术后恢复情况 (98例 )、术后…