基因芯片监测拉米夫定致乙型肝炎病毒耐药突变的临床研究

目的 研究基因芯片技术在监测拉米夫定致乙型肝炎病毒(HBV)耐药突变中的临床意义。方法应用前瞻性方法,对20例经拉米夫定治疗和10例未治疗的乙型肝炎患者观察18个月,以聚合酶链反应扩增血清HBV,应用已研发的4位点拉米夫定耐药检测芯片监测YMDD相关突变。结果 基因芯片技术监测能有效分辨野生型和突变型HBV。HBV的耐药突变随用药时间延长,突变率显著增加(x~2=6.6 9,P<0.01),突变类型以M539V L515M为主,次之为M539I。HBV在YMDD突变后,继续应用拉米夫定对突变型病毒无效。结论 在应用拉米夫定时需要定期检测YMDD突变,常规的HBV DNA定性技术与基因芯片相比,可能会出现结论偏差,后者是最好的方法之一。出现耐药突变后,继续使用拉米夫定对耐药株无效,应停用或更换其它治疗方案。     

HBx-GFP DN突变子长期稳定表达抑制2.2.15细胞乙型肝炎病毒基因的表达

目的　探索和寻找更有效的乙型肝炎治疗新的靶点和新的治疗方法 ,研究其抗病毒基因表达作用。方法　运用基因工程技术 ,建立了HBx GFP及其作对照的表达野生X蛋白、绿色荧光蛋白 (GFP)的长期稳定表达细胞克隆 ,Northernblot检测细胞内的乙型肝炎病毒相关基因RNA转录 ,应用RIA检测细胞上清液中HBsAg和HBeAg表达 ,观察对乙型肝炎病毒基因表达的影响。 结果所构建的X GFP突变子 ,Xwt,GFP质粒均能在 2 .2 .15细胞株中稳定高效表达并使细胞上清液中HBsAgHBeAg表达水平分别较 2 .2 .15组的 ( 10 1± 5.5)ng/ml、 ( 12 1± 8.6)ng/ml显著降低为平均( 7.6± 11.5)ng/ml、 ( 3 5± 3 .5)ng/ml (P <0 .0 1) ,细胞内的病毒 3 .5kb ,2 .1kb及 2 .4kb的RNA与各对照组比较均有显著降低 ,以 2 .1kb及 2 .4kb的mRNA下降最为显著。结论　乙型肝炎X基因DN突变子X GFP能显著抑制乙型肝炎病毒基因转录和S ,C基因的表达。提示 ,X基因亦是乙型肝炎治疗的一个靶基因     

ENBD和ERBD对胆总管结石ERCP后并发症预防作用

目的比较两种引流方法对胆管结石逆行胰胆管造影术(ERCP)后并发症的预防作用。方法将263例接受ERCP治疗的胆管结石病人随机分成3组,A组88例采用经内镜鼻胆管引流术(ENBD)治疗,B组86例采用经内镜胆管内引流术(ERBD)治疗,C组89例采用常规药物治疗。记录3组病人ERCP后胰腺炎、高淀粉酶血症及胆管感染发生率并进行比较。结果 A组ERCP后胰腺炎发生率为1.1%,B组为1.2%,C组为11.2%;A组高淀粉酶血症发生率为8.0%,B组为9.3%,C组为22.5%;A组胆管感染发生率为1.1%,B组为1.2%,C组为9.0%。A、B组以上3种并发症发生率与C组比较差异有显著性(χ2=5.491～7.744,P0.05)。3组均无穿孔、出血、死亡等并发症。结论 ENBD或ERBD可减少胆管结石ERCP后并发症的发生率,且作用相近。     

GLP-1对糖尿病大鼠胃排空调控机制的研究

目的探讨胰高血糖素样肽-1(GLP-1)对糖尿病大鼠胃排空的调控作用机制。方法 40只雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组(NC组)、糖尿病组(DM组)、GLP-1低剂量组(LG组)、GLP-1高剂量组(HG组)。腹腔注射链脲佐菌素(STZ)制备糖尿病大鼠模型,给药2周后采用酚红灌胃法检测胃排空情况;用酶联免疫法检测血浆和下丘脑匀浆中ghrelin和obestatin水平。结果 DM组胃排空较NC组明显加快(F=102.964,q=14.286,P0.01);血浆ghrelin和obestatin水平明显增高(F=8.360、11.626,q=3.558、2.332,P0.05)。LG组胃排空较NC组明显加快,而较DM组明显减慢(q=4.015、9.589,P0.01);血浆ghrelin和obestatin水平较NC组明显增高(q=3.911、4.918,P0.01)。HG组胃排空较NC组、DM组和LG组明显减慢(q=2.244~16.112,P0.05);血浆ghrelin和obestatin水平较DM组和LG组明显降低(q=2.719~5.232,P0.05)。DM组下丘脑ghrelin水平较NC组明显增加(F=4.091,q=2.841,P0.05),obestatin水平明显降低(F=6.084,q=3.384,P0.01),G/O比值明显增大(F=9.093,q=4.704,P0.01)。LG组下丘脑G/O比值较NC组明显增大(q=3.145,P0.01)。HG组下丘脑ghrelin水平较DM组和LG组明显降低(q=2.473、3.155,P0.05);obestatin水平较NC组明显降低(q=3.773,P0.01);G/O比值较DM组和LG组明显下降(q=3.738、2.248,P0.05)。结论 GLP-1可能直接或者通过下调血浆ghrelin水平或降低下丘脑中ghrelin/obestatin比值参与延迟胃排空。     

核酶在肿瘤基因治疗中的研究进展

核酶是一类具有酶活性的RNA分子，它可以序列特异性地定点切割靶RNA，从而阻断有害基因的表达。作为一种新的基因治疗手段，核酶技术近年来发展迅速，在基因调控、抗病毒复制和灭活癌基因方面有很大的应用潜力。本文就核酶在肿瘤的基因治疗方面的应用作一介绍。     

替诺福韦单一用药预防肝移植术后乙肝复发的疗效分析

目的 探讨乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)相关肝移植(liver transplantation,LT)后停用乙肝免疫球蛋白(hepatitis B immunoglobulin,HBIG)单用替诺福韦(tenofovir disoproxil fumarate,TDF)预防HBV复发的有效性...     

消炎痛栓预防胆总管结石ERCP术后胰腺炎的效果

目的观察直肠应用消炎痛栓预防胆总管结石病人内镜下逆行胰胆管造影术（ERCP）术后胰腺炎、高淀粉酶血症的效果。方法将符合标准的胆总管结石病人113例随机分为2组,预防组60例,对照组53例。预防组术前1h给予消炎痛栓100mg塞肛,对照组不给予消炎痛栓。测定两组病人术前及术后6、24h血清淀粉酶水平,观察ERCP术后高淀粉酶血症、急性胰腺炎的发生率。结果预防组ERCP术后6、24h血清淀粉酶水平明显低于对照组（t=-2．31、-2．20,P％0．05）。预防组胰腺炎及高淀粉酶血症发生率明显低于对照组（χ^2=3．902、5．316,P〈0．05）。结论直肠应用消炎痛栓可以预防胆总管结石病人ERCP术后高淀粉酶血症及胰腺炎的发生。     

超声引导下瘤体内注入超声造影剂和P53基因治疗大鼠肝癌的初步研究

目的　探讨超声引导下将超声造影剂和人野生型 p5 3基因直接注入瘤体内对大鼠肝癌基因表达的影响。方法　采用免疫抑制法建立大鼠原位肝癌模型。 2 4只实验Wistar大鼠随机分成 4组。第 1组 :超声引导下将基因直接注入瘤体内并不用超声照射 ;第 2组 :注入基因后用超声照射瘤体 ;第 3组 :注入造影剂和p5 3基因后不行超声照射 ;第 4组 :用超声照射注入造影剂和基因的瘤体。 48h后用半定量逆转录 聚合酶链式反应 (RT PCR)测定肝癌细胞内 p5 3mRNA的表达情况。 结果　超声引导下可准确地将基因注入肝癌内 ,4组肝癌细胞内均有 p5 3mRNA的表达 ,第 4组的表达量最高 ,明显高于其他三组 ( P <0 .0 0 1)。第 2组的基因表达量次之 ,高于另外两组 (P <0 .0 5 )。第 1、3组间在外源基因表达上的差异没有显著性意义 (P >0 .0 5 )。结论　超声引导下瘤体内注射超声造影剂和p5 3基因后用超声照射 ,既可有效地控制肝癌基因治疗的靶向性 ,又能提高外源基因的表达量。     

TFF3和β-catenin在不同大肠黏膜组织中的表达

目的:研究三叶因子3(TFF3)和β-catenin在不同大肠黏膜组织中的表达及其相互关系,探讨其在大肠腺癌及腺瘤发生、发展中的作用.方法:采用免疫组织化学PV6000法检测20例正常大肠黏膜、30例非腺瘤性息肉、20例大肠腺瘤、20例大肠腺瘤伴不典型增生和40例大肠腺癌组织中TFF3和β-catenin的表达,分析二...