糖尿病大鼠胃排空功能与胃组织瘦素的关系

大量文献已证实瘦素可抑制胃排空，胃排空延迟是糖尿病常见的并发症。目的：探讨不同病期糖尿病胃排空延迟与胃组织瘦素的关系。方法：40只Wistar大鼠分为对照1周组（NC1组）、对照4周组（NC2组）、糖尿病病期1周组（DM1组）和糖尿病病期4周组（DM2组）。分别于注射链佐霉素或柠檬酸缓冲液1、4周后检测大鼠胃排空、胃组织瘦素和瘦索受体OB—RbmRNA的表达。结果：与NC1组相比，DM1组大鼠胃排空明显加快（P〈0．01），胃组织瘦素表达显著增加（P〈0．01），OB—RbmRNA的表达无显著差异。与NC2组相比，DM2组大鼠胃排空明显减缓（P〈0．01），瘦素表达显著降低（P〈0．01），OB—RbmRNA的表达无显著差异。结论：随着糖尿病病期的持续，大鼠胃排空由加速转为延迟．胃组织瘦素表达反馈性由增加转为减少。     

肝移植术后新发非酒精性脂肪肝患者合并代谢综合征的初步研究

目的分析肝移植(liver transplantation, LT)后新发非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease, NAFLD)患者及新发NAFLD合并代谢综合征(metabolic syndrome, MS)患者的临床特征, 并探讨相关危险因素。方法收集2016年1月至2020年10月于青岛大学附属医院器官移植中心接受肝移植的患者, 随访至2021年10月。将肝移植受者分为有/无新发NAFLD组, 并进一步将肝移植后新发NAFLD患者分为合并/未合并MS组, 分析肝移植后新发NAFLD患者及合并MS患者的临床特征, 通过Logistic回归分析探讨术后新发NAFLD及合并MS的危险因素。结果本研究共纳入符合标准的324例肝移植受者, 中位随访时间为2.9(2.0～4.3)年, 术后新发NAFLD的发病率为21.0%(68/324), 其中, 合并MS的发病率为44.1%(30/68)。与术后无新发NAFLD患者相比, 新发NAFLD患者的术前体重指数(body mass index, BMI)、血糖、糖化血红蛋白水平偏高, 血小板水平偏...     

靶向S区和C区基因的M1GS RNA核酶共同抑制HBV的表达

目的:研究靶向HBVS区和C区基因的M1GSRNA核酶共同作用对HBV基因表达的影响.方法:选择HBVayw亚型S区基因294nt和C区基因2333nt为切割位点,以含有编码M1RNA的DNA序列的质粒pTK117为模板,通过PCR扩增得到M1GSRNA核酶的DNA模板,并将其克隆至真核表达载体pEGFP-C1得到重组质粒pEGFP-GSS和pEGFP-GSC.将2个重组质粒共转染HepG2.2.15细胞,转染后ELISA法测细胞培养液中的HBsAg和HBeAg,RT-PCR检测HBVmRNA.结果:成功构建了分别靶向HBVS区基因和C区基因的真核表达载体.共转染HepG2.2.15细胞后,HBsAg和HBeAg的表达分别被抑制了33.2%和39.1%,HBVCmRNA和SmRNA分别被抑制了32.5%和29.7%,而HepG2.2.15细胞的增殖无明显变化.结论:靶向HBVS区和C区基因的M1GSRNA核酶共同作用可特异性抑制HBVS区和C区基因的表达.     

Notch信号通路对大鼠肝纤维化作用及药物干预价值

目的 研究Notch信号转导通路受体Notch-1、配体Jagged-1及下游因子Hes-1的表达及在大鼠肝纤维化发生、发展中的作用,并探讨扶正化瘀方干预的价值。方法 雄性Wistar大鼠58只,随机分为对照组、模型组、药物组3组。以四氯化碳(CCL4)制备大鼠肝纤维化模型,自造模始药物组即以扶正化瘀方溶液灌胃给予早期干预,8周实验结束后将大鼠处死,取部分组织行苏木精-伊红染色评价肝纤维化程度,采用实时荧光定量PCR方法监测Notch信号转导通路的受体Notch-1、配体Jagged-1及下游因子Hes-1的mRNA表达。结果 模型组肝组织表面可见颗粒状结节、汇管区假小叶形成及肝实质结构紊乱。药物组大鼠肝纤维化程度较模型组减轻。3组Jagged-1、Notch-1、Hes-1的mRNA表达比较差异有显著性(F=332.398~872.015,P<0.001);与对照组相比,模型组肝组织各因子mRNA表达明显升高(P<0.05);与模型组比较,药物组大鼠肝组织各因子的表达明显下降(P<0.05)。结论 Notch信号转导通路可能全程参与肝纤维化的发生、发展及转归过程,而扶正化瘀方可通过抑制Notch信号转导通路下调Hes-1基因而抑制肝纤维化进展。     

下丘脑中Ghrelin、Obestatin水平及其受体表达与糖尿病大鼠胃排空的关系

目的 探讨糖尿病大鼠下丘脑胃促生长素(Ghrelin)、肥胖抑素(Obestafin)水平及受体表达与胃排空的关系.方法 60只雄性Wistar大鼠随机等分为正常对照组、糖尿病组、胰岛素组.链脲佐菌素(STZ)造模,给药2周、6周后测胃排空及下丘脑Ghrelin、Obestatin、生长激素促分泌激素受体(GHSR)和孤儿蛋白受体39(GPR-39).结果 2周后,糖尿病和胰岛素组的胃排空率(%)(74±8、40±5)、Ghrelin(ng/g)(52±9、51±7)和Ghrelin/Obestatin(3.8±1.0、2.8±1.0)分别较正常组[32%±7%、(39±11)ng/g、2.1±0.8]高(均P＜0.05).糖尿病组Obestatin(ng/g)(14.2±2.0)较正常组(21.7±4.7)低(P＜0.05),而GHSR(1.26±0.46)较正常组(0.77±0.21)高(P＜0.05).胃排空率与Ghrelin、Ghrelin/Obestatin和GHSR/β-肌动蛋白(B-actin)正相关(r=0.49;r=0.63;r=0.73;P＜0.01),与Obestatin负相关(r=-0.74,P＜0.01).6周后,糖尿病和胰岛素组胃排空率(78.97%±8.13%.44.06%±5.06%)均较正常组(35.06%±3.91%)高(均P＜0.01).胃排空率与Ghrelin/Obestatin呈正相关(r=0.40,P＜0.05),未检测到GPR-39.结论 高血糖早期胃排空加速可能受Ghrelin和GHSR表达增加影响,而持续期受Ghrelin/Obestatin增大影响.     

早期全肠外营养及肠内、外混合营养对神经外科危重患者免疫功能的影响

目的探讨早期给予全肠外营养（TPN）及肠内营养（EN）、肠外营养（PN）混合支持对神经外科危重患者免疫功能的影响。方法采用前瞻性对照研究将神经外科危重患者按入院顺序随机分为TPN组及EN＋PN组,并对比营养支持前后两组CD3、CD4、CD8、CD4／CD8、CD3／CD25、IgA、IgG、IgM、血清白蛋白的变化。结果给予神经外科危重患者两种营养支持均可提高其CD3、CD4、CD8及CD3＋／CD25＋比值（P〈0．05,P〈0．01）;两种营养支持方式均可显著升高IgA、IgG、IgM、（P〈0．05）及血清白蛋白浓度（P〈0．01）。与TPN组比较,EN＋PN组CD3、CD4、CD8、CD4／CD8比值、IgA、IgG、IgM浓度及血清白蛋白水平均显著升高（P〈0．05,P〈0．01）。结论早期TPN及EN＋PN支持均可促进神经外科危重患者免疫功能的恢复及提高,EN＋PN的作用优于TPN,对于神经外科危重患者应早期给予营养支持治疗。     

刺参粘多糖对人胰腺癌细胞株SW1990增殖的抑制作用

刺参粘多糖(stichopus japonicus acid muco-polysaccharide,SJAMP)是从中国刺参体壁中提炼出来的一类多糖类物质.该物质成分恒定,结构简单,易于克服空间位阻,增加了对黏膜上皮的穿透能力,容易被吸收.初步研究证实[1-4],刺参粘多糖具有广谱的抗肿瘤活性,能抑制肝癌、宫颈癌等恶性肿瘤细胞的增殖,诱导细胞分化.本研究观察SJAMP对胰腺癌细胞SW1990增殖、凋亡的影响,探讨其可能机制.     

Nesfatin-1对肥胖大鼠胃排空及胃平滑肌条收缩性的影响

目的:观察Nesfatin-1对正常及单纯性肥胖大鼠胃排空及离体胃平滑肌条收缩活性的影响.方法:高脂饲料喂养♂大鼠6wk,制作单纯性肥胖大鼠模型;正常及肥胖大鼠实验组中枢注入不同浓度Nesfatin-1(0.5μmol/L、5μmol/L、50μmol/L)后测胃排空率;生理记录仪记录大鼠胃底、胃体平滑肌条自发收缩及不同浓度Nesfatin-1(0.026μmol/L、0.26μmol/L、2.6μmol/L)作用下对乙酰胆碱(Ach)诱导的肌条收缩的影响.结果:Nesfatin-1可抑制正常及肥胖大鼠胃平滑肌条收缩,低、中、高浓度组与生理盐水对照组相比差异均有统计学意义(q=3.93-15.72,P<0.05-0.01).随Nesfatin-1浓度的增高,其抑制作用呈明显剂量依赖关系(q=3.45-5.69,P<0.05-0.01).低浓度Nesfatin-1抑制正常大鼠、肥胖大鼠胃底平滑肌条收缩作用无显著性差异(P>0.05),中、高浓度对正常大鼠胃底平滑肌条抑制作用强于肥胖大鼠(t=2.14,P<0.05;t=2.63,P<0.05).低、中浓度Nesfatin-1抑制正常大鼠、肥胖大鼠离体胃体平滑肌条收缩作用无显著性差异(P>0.05),但高浓度抑制正常大鼠离体胃体平滑肌条收缩作用显著强于肥胖大鼠(t=2.53,P<0.05).结论:Nesfatin-1可抑制正常及肥胖大鼠胃排空,胃排空率随Nesfatin-1浓度增加而降低.Nesfatin-1可抑制乙酰胆碱诱导的单纯性肥胖大鼠离体胃平滑肌条的收缩活动,其抑制作用随Nesfatin-1浓度增高而增强;相同Nesfatin-1浓度抑制正常大鼠离体平滑肌条收缩作用强于肥胖大鼠.     

pRevX-GFP DN突变体抑制HepG2 2.2.15细胞乙型肝炎病毒复制的实验研究

目的 建立pRev X-GFP及其作对照的表达野生X蛋白、绿色荧光蛋白的长期稳定表达细胞克隆，进一步研究以乙型肝炎病毒(HBV)X基因作为治疗靶，运用DN突变体技术，进行抗HBV的稳定表达对抗HBV复制的作用。方法 运用基因工程技术，分别以逆转录病毒载体pRev TRE为载体，构建表达野生型HBV X蛋白，GFP蛋白和X与GFP融合的X-GFP融合蛋白的质粒，并分别导入乙型肝炎的转基因细胞株HepG2 2．2．15细胞(简称2．2．15细胞)中，并通过长期的潮霉素抗性选择，获得能稳定表达DN蛋白的2．2．15细胞克隆。应用dot blot检测细胞上清液及细胞中HBV DNA，Southern blot检测细胞内HBV复制中间体，以观察其表达对HBV病毒复制的影响。结果 所构建的pRev X-GFP突变体、pRev Xwt、pRev GFP质粒均能在2．2．15细胞株中稳定高效表达。PRev X-GFP高效表达后，能有效地抑制或阻断细胞内HBV核酸合成及其分泌入细胞上清液。定量聚合酶链反应结果显示，pRev X-GFP组的平均每毫升HBV DNA浓度较2．2．15细胞组分别下降1．0～1．81g值，对细胞内外dot blot结果进行图像分析，其灰度值仪为对照2．2．15细胞组的7．9％，Southern blot分析则发现，X基因DN突变体对HBV复制中间体rcDNA、ssDNA及dsDNA的形成有全面抑制作用。结论 pRev X-GFP DN突变体具有显著抑制HBV复制作用。初步证实X基因是HBV治疗的一个新靶点。针对X基因的治疗，有望为HBV治疗提供一些新的思路。     

淀粉酶联合CRP和SAA检测对急性胰腺炎诊断价值的评价

目的 探讨淀粉酶、C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)及血清淀粉样物质A(serumamyloid A,SAA)的变化对AP诊断的临床意义.方法 测定MAP和SAP患者发病24 h内、48 h、72 h及第7天的血、尿淀粉酶和CRP、SAA水平.结果 发病24 h内SAP患者的血淀粉酶、尿淀粉酶、CRP和SAA水平分别为(904.5±402.2)U/L、(2280.3±1270.3)U/L、(155.6±36.2)mg/L和(521.9±109.4)mg/L,均明显高于MAP患者的(598.3±400.4)U/L、(1304.9±868.7)U/L、(51.9 4±38.0)mg/L和(158.6±187.6)mg/L(P＜0.05或P＜0.001);血淀粉酶高峰出现于发病后24 h内,而尿淀粉酶、CRP和SAA高峰出现在发病48 h,分别为(2173.5±1110.6)U/L、(185.3±41.4)mg/L和(717.5±144.2)mg/L.MAP和SAP患者血、尿淀粉酶水平在第7天均明显降低(P＜0.05),MAP患者CRP、SAA在第7天也明显降低(P＜0.05),但SAP患者CRP、SAA在第7大无明显降低(P＞0.05).CRP、SAA和病变发展相平行,CRP和SAA呈正相关(r=0.761,P＜0.05).结论 淀粉酶联合CRP、SAA水平的检测能够早期诊断AP,CRP和SAA可作为早期诊断SAP的参考指标.