Effects of anti-CXCR4 monoclonal antibody 12G5 on proliferation and apoptosis of human acute myelocytic leukemia cell line HL-60

Objective:To investigate the expression of CXCR, on HL-60 cell line and the proliferation, apoptosis of HL-60 cell line cocultured with bone marrow stromal cells, so as to assess the possibility of 12G5. an anti-CXCR4 monoclonal antibody, in eradicating the minimal residual disease. Methods:The activity of SDF-1 was inhibited by 10μg/ml 12G5. After treatment with 12G5. the status of adhesion was observed, and the adhesion rates, apoptosis and cell cycles were detected after 24 h of treatment. Cell growth rates were measured by trypan blue exclusion. Cell growth curve was plotted, and the expression of PCNA and apoptosis related protein including PCNA, Bcl-2 and Fas were detected with immunohis-tochemical technique. Results :(1) There was middling degree expression of CXCR4 on HL-60 membrane. From 0 h to 6 h, as the time of 12G5 incubation along, the expression of CXCR4 decreased gradually. (2) After treatment for 24 h, the adhesion rates in the experiment group and the control were (39. 4±7. 9)% and (51. 4±5. 9)%, respectively. (3)After treatment for 24 h, the percentage of HL-60 cells in G0/G1 phase were (55. 21±4. 9)%, and that in S phase and G2/M phase were (30. 40±4. 1)% and (14. 39±5.2)%, respectively, with the corresponding proportions being (44. 67±2. 2) % , (45. 30±3. 7)% . and (10. 03±2. 6)% in the control. (4) The percentage of apoptotic HL-60 cells was (8. 95±1. 7)% in the experiment group, compared to (3. 97±2. 4)% in the control. (5)The survival rates of HL-60 cells decreased markedly at 48 h to 96 h, and the proliferation slowed down at this time duration. (6)The expression of PCNA and Bcl-2 down-regulated significantly, but the Fas protein expression was up-regulated. Conclusion :12G5 could inhibit the capability of adhesion and proliferation of HL-60 cells and it can induce more cells to enter G0/G1 phase and promote apoptosis. It may be helpful by inhibiting the bioactivity of SDF-1 with 12G5 in the therapy of marrow residual disease.     

对提高培养研究生水平的探讨

西部大开发，关键是人才。除从发达地区引进人才外，不断培养高层次的科学人才是解决西部地区人才相对匮乏的重要举措之一，而研究生教育则担负着培养高素质人才和促进科学技术发展的双重任务。从全国研究生培养工作现状来看，西部地区仍处于比较落后的状态，尽快改善这种局面，如何为西部大开发培养高素质的科研人才，值得深入地研究。     

以眼眶绿色瘤起病伴t(8;21)的儿童M4Eo 1例及文献复习

目的报告1例以眼眶绿色瘤起病的伴t（8；21）的儿童M4Eo，并综合国内外文献进行讨论，以提高对该病的认识。方法对此例患儿的临床表现、实验室检查、诊断和治疗进行分析，结合文献讨论该病的临床特征、遗传学特点及诊断。结果本例以眼眶绿色瘤起病的儿童急性髓系自血病（acute myeloid leukemia，AML）经血象、骨髓象确诊为M4Eo，染色体核型分析为40-45，XY，t（8：21）（q22，q22），常规化疗及大剂量阿糖胞苷治疗疗效欠佳。结论眼眶绿色瘤是急性髓性白血病的一种特殊临床表现，除常见于AML—M2型外，也可见于M4Eo；AML—M4Eo的染色体核型除了常见的inv（16）外，也可以是t（8；21）。通过对该例患儿的临床特点及治疗经过的分析，提示以眼眶绿色瘤起病、伴t（8；21）及亚二倍体核型改变的儿童M4Eo可能是一种预后不良的临床亚型。     

铁蛋白在胎盘组织的定位及其在母—胎铁转运中的作用

目的：通过了解铁蛋白在胎盘组织中的定位及含量，探讨其在母胎铁转运中的作用。方法：采用免疫细胞化学分析的方法，对不同妊娠阶段的胎盘绒毛组织中铁蛋白的定位和分布进行了研究，并同时进行了胎盘微绒毛膜铁蛋白含量的放射免疫分析。结果：①胎盘合体细胞膜表面和基底膜上铁蛋白分布较多；②孕母患缺铁性贫血（ＩＤＡ）时胎盘组织中铁蛋白含量明显降低（Ｐ＜０．０１）。结论：铁蛋白可作为胎盘铁转运的重要载体，通过铁蛋白受体的介导，完成由母体经胎盘向胎儿的铁转运过程，而孕母ＩＤＡ时经胎盘的铁转运可能减少。实验还表明，随孕龄增加，胎盘微绒毛组织中铁蛋白含量增加，提示在妊娠过程中，经胎盘铁转运也是逐渐增加的。     

造血干细胞移植患者院外随访的实施及体会

目的提高干细胞移植患者的临床效果和生活质量。方法建立移植后随访观察表和登记制度,采取电话和门诊随访,建立电子文档登记,指导患者后续治疗并监测其病情变化。结果 85.25%的患者坚持了门诊随访,43%的患者接受了用药和临床护理指导。随访患者院外感染发生率较未随访患者低。结论坚持对造血干细胞移植患者出院后的长期规范化随访,有利于患者的后续治疗,可减少移植后相关并发症的发生,同时达到早期发现和控制并发症的目的,提高移植患者的总生存率,改善生活质量。     

SDF-1 cDNA转染人骨髓间充质干细胞的实验研究

本研究旨在探讨基质细胞衍生因子-1（SDF-1）cDNA瞬时转染人骨髓间充质干细胞（hBMSCs）前后hBMSCs中SDF-1mRNA表达的情况。在分离、培养、鉴定人骨髓间充质干细胞（hBMSCs）和构建SDF-1-pIRES2-EGFP真核表达载体的基础上,通过脂质体介导法将SDF-1真核表达质粒转染至hBMSCs,观测绿色荧光蛋白的表达并用RT-PCR方法检测瞬时转染效率。结果发现：SDF-1-pIRES2-EGFP瞬时转染后hBMSCs的SDF-1mRNA表达增高约20%左右。结论：阳离子脂质体可以将SDF-1cDNA真核表达质粒瞬时转染入hBMSCs,但转染效率低下,不能获得足够数量的稳定转染细胞供后续实验,因此需对转染方法作进一步的探讨。     

自体外周血干细胞移植治疗血液肿瘤206例观察

目的:观察自体外周血干细胞移植(APBSCT)治疗血液恶性肿瘤临床疗效。方法:自2001年3月—2006年12月对206例血液肿瘤患者施行APBSCT,其中急性淋巴细胞白血病(ALL)40例,急性髓细胞白血病(AML)29例,非何杰金淋巴瘤(NHL)95例,何杰金淋巴瘤(HD)26例,多发性骨髓瘤(MM)16例,观察临床疗效和并发症。结果:除1例ALL外,205例患者移植后造血功能均快速重建。急性淋巴细胞白血病首次完全缓解(ALL-CR1)25例,其中无病存活17例,带病存活2例,死亡6例,急性淋巴细胞白血病再次完全缓解(ALL-CR2)15例,其中无病存活3例,带病存活3例,死亡9例;急性髓细胞白血病首次完全缓解(AML-CR1)17,其中无病存活10例,带病存活2例,死亡5例,急性髓细胞白血病再次完全缓解(AML-CR2)12例,其中无病存活5例,带病存活1例,死亡6例;非何杰金淋巴瘤首次缓解(NHL-CR1)57例,其中无病存活42例,带病存活6例,死亡9例,非何杰金淋巴瘤再次缓解(NHL-CR2)28例,其中无病存活18例,带病存活4例,死亡6例,非何杰金淋巴瘤未缓解(NHL-NR)10例,其中无病存活2例,带病存活3例,死亡5例;何杰金淋巴瘤首次缓解(HD-CR1)8例,其中无病存活8例;何杰金淋巴瘤部分缓解(HD-PR)13例,其中无病存活11例,带病存活2例;RE5例,其中无病存活3例,带病存活1例,死亡1例;MM16例,其中无病存活5例,带病存活4例,死亡7例。结论:APBSCT是一种治疗血液肿瘤安全有效的方法。     

scl原癌基因表达产物对造血调控作用的研究进展

scl基因编码一个碱性螺旋-环-螺旋(bHLH)转录因子，属bHLH家族。该家族的成员对多种细胞系或组织的发生和发育有调控作用。scl基因的最初发现是因为在肿瘤细胞中有其重排。在人T细胞急性淋巴细胞白血病(T-ALL)中scl发生突变，scl在小鼠T淋巴细胞株表达使细胞转化，这些表现强烈地提示它是T细胞的原癌基因。目前人和鼠的scl基因均已被克隆。scl基因产物的几种蛋白中两个主要研究对象是磷酸蛋白PP24和PP42．它们可能有反式激活特性。SCL蛋白表达于原始的多系祖细胞及红系、巨核系和肥大细胞系的定向祖细胞。SCL对造血细胞增殖和分化的调控有赖于细胞在分化途径所处的阶段。scl的突变是负显性突变。新近证实SCL基因产物是造血干细胞分化的一个关键调节蛋白，为所有造血细胞系发育所必需。无scl基因的ES细胞不能产生任何类型造血细胞，包括T和B细胞。剔除scl基因所产生的结果是特有的，它完全取消了所有细胞系及其祖细胞的产生。SCL蛋白可能通过与bHLH家族其它成更或RBTN2、GATA等其它转录因子形成异聚体复合物，借以同靶启动子的“E盒”结合，调节正常造血细胞和T细胞生瘤过程。     

大剂量化疗、自体外周血造血干细胞移植、长间歇维持化疗序贯治疗成人急性淋巴细胞白血病疗效观察

急性淋巴细胞白血病（ALL）是一种常见的血液系统恶性肿瘤，其治疗包括常规化疗和造血干细胞移植（HSCT）。常规化疗对成人ALL效果较差，据报道其长期生存率只有20％～30％，而且要进行长期维持治疗。2001年3月至2003年8月，我们对我院14例初次诱导治疗缓解的成人ALL患者进行连续3个周期大剂量甲氨蝶呤（Hi—MTX）治疗，之后行自体外周血造血干细胞移植（auto—PBSCT），移植后长间歇常规剂量化疗维持2年，取得了较好的治疗效果。