全反式维甲酸对外周血干细胞移植患者骨髓基质细胞黏附分子表达及黏附力的影响

本研究探讨全反式维甲酸（all—transretinoic acid，ATRA）能否促进外周血造血干细胞移植（peripheral blood stem cell transplantation，PBSCT）预处理致伤的骨髓基质细胞（bonemarrow stromal cells，BMSC）功能的恢复。用流式细胞术检测27例造血干细胞移植患者预处理前后BMSC表面细胞间黏附分子-1（intercellular adhesion molecule—1，ICAM-1）和血管黏附分子-1（vascular adhesion molecule-1，VCAM-1）表达，用放射免疫法测定BMSC培养上清液中可溶性ICAM—1（sICAM-1）水平以及BMSC对CD34^＋细胞的黏附率，并检测浓度分别为0、01、0．1、1μmol/L的ATRA作用后上述指标的动态变化。结果显示：PBSCT预处理后，BMSC表面ICAM-1和VCAM-1的表达以及BMSC培养上清液中sICAM-1的表达水平降低，BMSC对CD34^＋细胞黏附率降低，而在ATRA作用后，BMSC表面ICAM—1表达增加，培养上清液中sICAM-1水平升高，BMSC对CD34^＋细胞的黏附率增加．但VCAM-1表达变化不明显。结论：全反式维甲酸可部分修复受损的BMSC的黏附功能，有助于促进骨髓造血重建。     

特异性RNA干扰阻抑骨髓基质细胞SDF-1表达对Jurkat细胞黏附及药物敏感性的影响

目的观察特异性RNA干扰(RNA i)阻抑急性白血病骨髓基质细胞衍生因子-1(SDF-1)表达对共培养的急性白血病细胞系Jurkat细胞黏附及药物敏感性的影响。方法脂质体介导SDF-1特异性RNA i质粒转染培养的急性白血病患者骨髓基质细胞,G418筛选阳性混合克隆,ELISA法检测SDF-1表达;Jurkat细胞与之共培养,通过细胞计数计算黏附率,MTT法检测对阿霉素的药物敏感性。以未转染急性白血病骨髓基质细胞及正常骨髓基质细胞作为对照。结果转染阳性克隆组、未转染急性白血病组及正常对照组骨髓基质细胞培养上清SDF-1水平分别为每周(1920±205)pg/105细胞、(12 370±1355)pg/105细胞和(6620±770)pg/105细胞;与之共培养的Jurkat细胞黏附率分别为(28.8±2.6)%,(57.4±3.8)%和(45.2±4.0)%,阿霉素50%抑制浓度分别为585,6162,1758 nmol/L。结论RNA i阻抑SDF-1表达的骨髓基质细胞使Jurkat细胞黏附减少,对阿霉素的敏感性增加。     

不同培养体系培养人脐血源基质细胞的探索性研究

目的 探索不同培养体系对人脐血源基质细胞原代培养的影响，并观察人脐血源基质细胞的生物学特性。方法 取产科胎儿脐带血，采用经典和改良Dexter培养体系培养人脐血源基质细胞。倒置显微镜动态观察细胞生长情况，瑞氏染色观察细胞形态特征，采用细胞化学和免疫细胞化学进行鉴定。结果 改良Dexter培养体系在48 h细胞贴壁数、细胞开始伸展时间及原代培养时间明显优于经典Dexter培养体系。原代培养9-14天(平均12.1天)时贴壁细胞集落开始形成，15-21天(平均19.4天)时集落数量最多，培养28天贴壁细胞铺满培养皿底，细胞类型以成纤维样细胞、巨噬样细胞、“小圆”类细胞为主。细胞化学染色显示：非特异性酯酶染色法(NSE)显示阳性，阳性率100％；过氧化物酶染色法(POX)显示阴性；糖原染色(PAS)显示阳性，阳性率为100％；碱性磷酸酶(ALP)染色显示部分阳性，阳性率26％。免疫细胞化学染色显示：CD31显示阳性率为96％，CD68显示阳性率为95％，CD45阴性，Fn显示阳性率94％。结论 改良Dexter培养体系是一种理想人脐血源基质细胞培养体系，人脐血源基质细胞在体外的成功培养为从一新的角度进一步研究其在临床的早日应用提供理论基础。     

外周血干细胞移植患者骨髓基质细胞形态学改变的观察

目的：进一步探讨外周血干细胞移植后患者骨髓造血微环境损伤的机理。方法：采用光镜、扫描电镜和透射电镜观察外周血干细胞移植患者在单纯化疗或放化疗结合预处理前后骨髓基质细胞的形态变化。结果：①光镜和扫描电镜：与预处理前骨髓基质细胞相比，单化组和放化组出现不同特征的形态学变化；②透射电镜观察：放化组骨髓基质细胞的内质网扩张，线粒体基质变淡，嵴消失；单化组基质细胞的线粒体重度退行性变，结构紊乱。结论：外周血干细胞移植患者经单化或放化预处理后骨髓基质细胞形态的改变可能是导致造血微环境损伤的重要原因之一。     

大剂量化疗、自体外周血干细胞移植、生物治疗、长间歇维持化疗序贯治疗急性白血病的临床观察

目的观察大剂量化疗、自体外周血干细胞移植、生物治疗、长间歇维持化疗序贯治疗急性白血病的临床疗效。方法自2001年3月~2009年12月对第三军医大学新桥医院69名急性白血病患者进行大剂量化疗、自体外周血干细胞移植、白介素-2(IL-2)生物治疗、长间歇维持化疗序贯治疗,其中,急性淋巴细胞白血病(ALL)40例,急性髓细胞白血病(AML)29例,观察临床疗效和并发症。结果除1例ALL外,68名患者移植后造血功能均快速重建。急性淋巴细胞白血病首次完全缓解(ALL-CR1)25例,其中无病存活17例,带病存活2例,死亡6例,急性淋巴细胞白血病再次完全缓解(ALL-CR2)15例,其中无病存活3例,带病存活3例,死亡9例;急性髓细胞白血病首次完全缓解(AML-CR1)17,其中无病存活10例,带病存活2例,死亡5例,急性髓细胞白血病再次完全缓解(AML-CR2)12例,其中无病存活5例,带病存活1例,死亡6例。结论该序贯疗法治疗急性白血病安全有效,CR1患者较CR2患者疗效更好。     

bFGF预防小鼠半相合造血干细胞移植后a-GvHD的实验研究

目的探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对半相合造血干细胞移植(HSCT)小鼠急性移植物抗宿主病(a-GVHD)的影响及其可能机制。方法建立小鼠半相合HSCT模型,随机分为分为实验1组(n=12):每只小鼠按100μg/kg输注bFGF;实验2组(n=12):每只小鼠按20μg/kg输注bFGF;空白对照组:半相合HSCT移植后不作任何处理。观察各组小鼠的a-GVHD临床表现及生存时间,移植后14 d对小鼠皮肤、肝脏和小肠进行病理分析,并检测小鼠间充质干细胞(MSC)变化情况。结果和对照组相比,实验组的GVHD明显减轻。Kaplan-Meier生存曲线显示实验1组的生存率明显高于实验2组和对照组(P<0.05)。病理切片显示实验1、2组的GVHD严重程度显著轻于对照组,实验1组骨髓间充质干细胞增殖良好。结论 bFGF对半相合HSCT小鼠的a-GVHD具有一定的预防作用。     

异甘草酸镁治疗化疗药物性肝损害的临床疗效观察

目的观察异甘草酸镁治疗化疗药物所致肝损害的临床疗效。方法 108例化疗患者随机分为治疗组63例和对照组45例,在预防性保肝药物基础上,治疗组予异甘草酸镁0.15 g,对照组予硫普罗宁0.2 g,静脉滴注1次/天,直到转氨酶降至正常。每3天复查1次肝功能,对比9 d内谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)的复常率。结果治疗组9 d内ALT复常率为95.83%,AST复常率为92.42%;对照组ALT复常率为74.23%,AST复常率为71.12%,两组比较差异有统计学意义(P<0.01)。两组均未出现严重的不良反应。结论异甘草酸镁治疗化疗药物性肝损害具有肝功恢复快、不良反应少的优点,临床疗效优于硫普罗宁。     

硼替佐米联合地塞米松和沙利度胺治疗多发性骨髓瘤的临床研究

目的 观察硼替佐米联合地塞米松和沙利度胺(VTD)方案对多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)患者的临床疗效.方法 收集2008年4月至2012年2月于本院接受VTD方案治疗的58例MM患者临床资料,并以同期30例传统长春新碱+蒽环类+地塞米松+沙利度胺(VADT)方案化疗的MM患者作为对照,分析病情转归及不良反应.患者均完成2个及以上疗程治疗.结果 随访6个月至2年的MM患者:①VTD用于初治和复发和(或)难治MM患者的总有效率显著高于VADT组(63.8％vs 40.0％,P＜0.05).VTD方案中初治患者治疗总有效率显著高于复发和(或)难治患者(77.8％ vs 40.9％,P＜0.05);VTD组治疗初治MM的有效率也明显高于VADT组(36.0％),差异有统计学意义(P＜0.05).VTD治疗复发和(或)难治MM的有效率与VADT组(60.0％)无差异(P＞0.05).VTD组内轻链型、非轻链型MM患者疗效无显著统计学差异(P＞0.05).②VTD治疗不良反应主要有消化道症状、感染、周围神经病变及血小板减少.结论 硼替佐米联合地塞米松和沙利度胺治疗MM缓解率高,副作用少且一般较轻微,可首选用于治疗初治及复发和(或)难治MM患者.     

异基因造血干细胞移植治疗年轻慢性淋巴细胞白血病患者3例

目的 探讨异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)治疗慢性淋巴细胞白血病(CLL)的安全性和有效性.方法 总结分析3例行HLA全相合allo-HSCT治疗的年轻CLL患者的临床特征、实验室检查指标、移植经过及转归,并进行相关文献复习和讨论.结果 3例患者年龄均在50岁以下,Rai分期属于高危组,给予allo-HSCT治疗,白细胞植活中位时间为12(11～13)d,血小板植活中位时间为13(12～14)d.移植后出现慢性局限皮肤型移植物抗宿主病(GVHD)1例.随访至2012年4月,平均随访时间25(10 ～53)个月,3例均无病生存.结论 allo-HSCT是CLL唯一具有治愈可能的手段,有合适供者的年轻高危CLL患者可考虑行造血干细胞移植.