携带BMP-2基因的慢病毒感染大鼠骨髓间质干细胞定向分化

目的构建含有人骨形态发生蛋白2（human bone morphogenetic protein 2, hBMP2）cDNA的重组慢病毒DNA，在293T细胞中进行慢病毒包装和表达检测。用慢病毒感染大鼠骨髓间质干细胞后，观察其向成骨细胞分化的情况。方法从GenBank中调出hBMP2基因序列，设计带有NheⅠ、AgeⅠ酶切位点引物。从人肝脏组织中抽提总RNA，再反转录成cDNA，扩增出hBMP2 cDNA的全长序列。测序验证后克隆到慢病毒载体pHIV-CS-CDF-CG-PRE上，通过PCR扩增、酶切、测序等方法鉴定重组慢病毒DNA。将该重组慢病毒DNA同辅助质粒一起共感染293T细胞，通过重组而包装成能表达hBMP2基因的有活性的慢病毒。慢病毒感染大鼠骨髓间质干细胞，通过碱性磷酸酶（AP）、钙沉积定量测定、Ⅰ型胶原蛋白表达观察干细胞向成骨细胞转化的情况。结果①扩增出1．2kb左右的hBMP2全长cDNA与GeneBank中的hBMP2阅读框架序列完全一致；②成功构建和克隆了含hBMP2基因的慢病毒重组DNA（pHIV-hBMP2）；③对重组慢病毒DNA进行了成功包装和分析。④大鼠骨髓间质干细胞感染慢病毒后，碱性磷酸酶分泌增加，钙沉积增加，Ⅰ型胶原蛋白表达增加，成功向成骨细胞转化。结论重组慢病毒携带hBMP2基因感染大鼠骨髓间质干细胞可以使其向成骨细胞定向分化，为组织工程研究提供良好的种子细胞。     

糖尿病足下肢动脉血运重建的疗效观察

目的探讨糖尿病足下肢动脉血管重建的临床效果。方法对52例糖尿病足病患者分别行动脉旁路术、膝下经皮血管腔内血管成形术(PTA)、自体干细胞移植术,并对治疗结果进行分析。结果术后47例糖尿病足病患者静息痛完全缓解,9例截趾术后伤口愈合,6例仍有间歇性跛行,5例血运重建术无效后行膝下截肢;患者术后ABI 0.62±0.04较术前ABI 0.42±0.048显著增高(P<0.05)。结论通过行动脉旁路术、PTA和自体干细胞移植术等综合治疗糖尿病足病,疗效肯定。     

儿童紫癜性肾炎患者临床分型、病理特征和病原菌感染的相关性临床分析

目的:探讨儿童紫癜性肾炎患者临床分型、病理特征和病原菌感染的相关性.方法:选择我院2011年1月~2016年1月住院紫癜性肾炎患儿80例,参照中华医学会儿科学分会的相关分型和病理分级标准对患者进行分级和分型.分析紫癜性肾炎患儿的临床分型、免疫复合物沉积、病原菌感染和病理分级的关系.结果:(1)一共80例儿童紫癜性肾炎患者,肾脏病理分级情况:Ⅰ级病例5例,Ⅱ级病例34例,Ⅲ级病例40例,Ⅳ级病例1例.(2)单纯性血尿或尿蛋白以Ⅱ级和Ⅲ级病理分级为主,Ⅱ级占比40%(8/20),Ⅲ级占比45%(9/20);血尿和尿蛋白合并以Ⅱ级和Ⅲ级病理分级为主,Ⅱ级占比60.53(23/38),Ⅲ级占比31.58%(12/38);肾病综合征以Ⅲ级病理分级为主,占比83.33(15/18).临床分型的严重程度和病理分级呈显著正相关关系,症状越明显,病理级别越高.(3)单纯IgA以Ⅱ级和Ⅲ级病理分级为主,Ⅱ级占比46.15%(6/13),Ⅲ级占比30.77%(4/13);IgA+IgM以Ⅱ级和Ⅲ级病理分级为主,Ⅱ级占比36.17%(17/47),Ⅲ级占比53.19%(25/47);IgA+IgG+IgM以Ⅱ级病理分级为主,占比53.33%(8/15).免疫复合物沉积的严重程度和病理分级无显著关系;补体C3沉积和病理分级呈显著正相关关系,补体C3沉积越严重,病理级别越高.(4)I型以Ⅱ级病理分级为主,占比51.43%(18/35);Ⅱ型以Ⅲ级病理分级为主,占比55.56%(25/45).幽门螺杆菌感染分型的严重程度和病理分级呈显著正相关关系,幽门螺杆菌感染分型越明显,病理级别越高.结论:儿童紫癜性肾炎患者临床分型、病理特征和病原菌感染密切相关,可以通过临床分型、病原菌感染、免疫复合物等病理情况对儿童紫癜性肾炎的病理损害进行评级,建议对于儿童紫癜性肾炎患儿应当尽早进行肾脏活检术,以确定病理分级,从而为选择合适的治疗方案提供有力的参考依据.     

乳酸脱氢酶同工酶“非脱氢酶”效应的鉴定

一组体外循环下行心脏直视手术的患者,在开胸前后的不同时间,分别取静脉血测定乳酸脱氢酶LDH总活性及其同工酶,观察到LDH同工酶电泳谱带的LDH阳极端有一快速移动的新区带,随着手术的进行逐渐消失。经过稳定性试验、改变基质成份试验、双氧水氧化试验、异常带的定位试验及红细胞的溶血试验等,最终证实此异常带为静脉注射大剂量还原性物质VitC(200mg/kg体重)所致的“非脱氢酶”效应。并且进一步做了VitC的体内、外试验以及还原NAD和NBT反应的荧光扫描,认为用荧光扫描方法可在一定程度上防止LDH同工酶测定过程中异常的干扰作用,并为LDH同工酶“非脱氢酶”效应的鉴定提供了一套较完整的试验方法。     

钢丝环扎加张力带治疗髌骨粉碎性骨折

目的探讨钢丝环扎加张力带治疗髌骨粉碎性骨折的临床疗效。方法作者利用钢丝环扎加张力带治疗髌骨粉碎性骨折42例,其中男性30例,女性12例,年龄最小20岁,最大78岁,平均年龄45岁。本组选择的病例均是含横断型的星状和粉碎骨折。其中直接暴力致伤12例,间接暴力致伤30例。结果42例病人均获得随访2个月至9个月,平均7个月,42例病人骨折全部愈合。采用髌骨骨折疗效评分标准（Bostman）进行功能评判,优秀38例,良好4例,优良率100％。结论钢丝环扎加张力带治疗髌骨粉碎性骨折能够很好复位骨折及固定牢靠,操作简单,费用少,是基层医院治疗髌骨粉碎性骨折较佳选择。     

大鼠骨髓来源树突状细胞外泌体的提取及功能研究

目的:探讨在不同成熟状态下树突状细胞(dendritic cell,DC)分泌的外泌体(exosomes,Dex)的制备、提取及体外功能鉴定。方法:F344大鼠骨髓来源DC培养6后分为2组,一组为未成熟树突状细胞组(immature DC,imDC):直接收集上清;一组为成熟树突状细胞组(mature DC,mDC):每孔加入终浓度为1μg/ml的LPS培养48h后,收集上清。然后用多步离心法分离得到Dex,流式细胞术检测两组Dex的表型,酶联免疫吸附测定(ELISA)检测两组Dex与Wistar大鼠骨髓来源的imDC共培养上清的白细胞介素10(IL-10)、白细胞介素12(IL-12p70)的含量,混合淋巴细胞实验(MLR)检测共培养DCs刺激T细胞增殖能力。结果:与mDC分泌的exosomes相比,imDC分泌的exosomes表面中度表达MHC-Ⅱ类分子、低表达CD80、CD86、CD40共刺激分子,而且与Wistar大鼠骨髓来源的imDC共培养后刺激IL-12p70分泌能力较低(P<0.05),刺激T淋巴细胞增殖的能力也较mDC分泌的exosomes组弱(P<0.05)。结论:不同成熟状态下的DC分泌...     

大鼠肺缺血再灌注损伤后前炎症细胞因子IL-1βmRNA的表达分析

 [摘要] 目的 通过对大鼠移植肺灌洗后、冷缺血保存和再灌注期间前炎症细胞因子IL-1βmRNA的表达进行分析，探讨IL-1β在此过程中介导的移植肺炎性损伤机制。 方法 本研究大鼠分6组，包括：正常肺（未灌洗）对照组、仅肺灌洗处理组、肺灌洗后冷缺血保存6h、12h、24h各1组、冷缺血保存24h后左肺移植再灌注3h组。在相应各时间点采取肺组织，用荧光定量实时PCR法检测IL-1βmRNA的表达并进行髓过氧化物酶（MPO）活性测定。 结果 除冷缺血12h组和冷缺血24h组之间IL-1βmRNA表达相对量差别不显著外（P=0.167），其余各组之间IL-1β表达相对量差别均有显著统计学意义(P<0.05)。仅灌洗组、冷缺血组和24h冷缺血移植再灌注3h组的IL-1βmRNA表达相对量均高于正常对照组，且随处理时间的延长而表达增加。仅灌洗组、冷缺血组和24h冷缺血移植再灌注3h组的MPO活性均高于正常对照组，且随处理时间的延长而表达增加，P<0.05。各组肺组织中MPO活性和IL-1βmRNA相对表达量呈较强的正相关关系，相关系数r=0.869，P<0.01。结论 前炎症因子IL-1β在肺缺血再灌注损伤机制中发挥着重要炎性损伤作用，可以作为移植肺功能评价及预后的重要指标之一；IL-1β基因的表达在保存液灌洗后的冷缺血保存早期就开始出现，而不是在再灌注之后的事件。     

安钠咖注射液的双波长标准加入法测定

安钠咖注射液的双波长标准加入法测定．严拯宇，姜新民，孙艳秋．中国医药工业杂志，１９９６；２７（３），１３１本文根据标准加入法的特点与双波长等吸收原理，将二者结合起来，使成为双波长标准加入法。该法弥补了双波长法测定点少、误差大，操作繁琐以及常规标准加入...     

海水浸泡诱导小鼠脑组织自由基的改变及其防护的研究

目的:观察海水浸泡下,小鼠脑组织自由基的改变及超氧化物歧化酶(SOD)的防护作用。方法:选用120只小鼠,随机分组,检测其脑组织的SOD活性和丙二醛(MDA)含量的变化。结果:显示了各组与相应对照组比较,SOD活性减低,而MDA含量增高,并有显著差异。注射SOD小鼠浸泡不同时间后,其相应各时点SOD活性较未注射SOD小鼠高,而MDA含量相反,并与注射SOD剂量有关。结论:在海水浸泡下,可诱导小鼠脑组织自由基改变,可能引起脑组织损伤,而注射SOD对小鼠脑组织自由基改变有防护作用,因此,为加强对海水浸泡的防护,使用SOD制剂应值得重视。     

经侧裂岛叶入路治疗基底节区脑出血分析

目的:分析经侧裂岛叶入路治疗基底节区脑出血的临床效果。方法:32例基底节脑出血患者,20例行去大骨瓣侧裂岛叶入路血肿清除术(去大骨瓣组),12例行微骨窗侧裂岛叶入路血肿清除术(微骨窗组)。结果:去大骨瓣组72 h内清醒者10例,3～7 d清醒者6例,7～14 d清醒者4例;微骨窗组均于72 h内清醒;术后随访6～11个月,去大骨瓣组轻度残疾7例,重度残疾13例;微骨窗组轻度残疾7例,重度残疾5例。结论:经侧裂岛叶入路治疗基底节区血肿是一个较佳选择,对于术前意识状态相对较好的患者,微骨窗入路微创,术后清醒早,且避免了二次颅骨修补手术。