中医院校病理学教学改革初探

中医院校的病理学教育是为培养中医方面人才服务的,因此在教学方法上和西医院校应该有所不同,文章就天津中医药大学病理教研室为了适应中医院校病理学教学目的在教学方法上进行的一些初步改革探索。     

银杏叶提取物对家兔高胆固醇血症模型脑组织形态学的影响

[目的]通过高胆固醇血症家兔模型观察银杏叶提取物(EGB761)对中枢神经纤维的影响。[方法]以成年雄性新西兰大白兔复制高胆固醇血症模型,实验分为4组:对照组、模型组、阳性药辛伐他汀组、EGB761组。用苏木精-伊红(HE)染色和嗜银染色法观察神经元及神经纤维的形态学改变。[结果]外周胆固醇升高时,模型组海马出现较多神经元变性、坏死,神经纤维缠结等病理改变。EGB761组变性、坏死的神经元明显少于模型组,细胞核形态基本规则,嗜神经现象少见,神经纤维缠结少于模型组。[结论]EGB761可有效保护高胆固醇血症时神经纤维结构的完整性。     

银杏内酯和银杏黄酮干预β－淀粉样蛋白跨血脑屏障低氧模型转运的体外研究

目的：观察银杏内酯和银杏黄酮干预β－淀粉样蛋白（Aβ）跨血脑屏障（BBB）低氧模型的转运情况及与晚期糖基化终产物受体（RAGE）、低密度脂蛋白受体相关蛋白1（LRP1）表达的相关性。方法利用 Tran－swell 装置共培养大鼠脑微血管内皮细胞与星形胶质细胞建立 BBB 模型,并分为对照组、低氧模型组、银杏内酯组、银杏黄酮组及联合用药组。观察 Aβ由脑侧向血管侧的转运情况,并检测 TEER 值及 FD4通透率以评价 BBB完整性,采用 RT －qPCR 及 Western blot 法检测转运体 RAGE、LRP1的表达。结果在低氧条件下,受试药物单独或联合干预后,Aβ的外向转运率明显上升,差异有统计学意义,且联合用药效果更优。各组处理均未破坏 BBB 的完整性;低氧上调 RAGE 的表达,下调 LRP1的表达,药物单独干预均能改善低氧对 LRP1的抑制作用,但不影响RAGE 的表达;而联合用药下调 RAGE 表达,同时上调 LRP1表达。结论银杏叶活性成分银杏内酯和银杏黄酮通过干预 BBB 低氧模型 RAGE 及 LRP1的表达,促进 Aβ的外向转运,从而降低脑 Aβ水平,延缓了阿尔茨海默病的进展。     

案例式教学在病理学教学中的应用初探

病理学是一门理论性和实践性均很强的学科,为了提高病理学教学质量,改革传统教学方法,在本科生病理学教学的部分章节采用案例式教学法。文章就案例式教学法的具体实施过程,与传统教学法相比具有的优势,以及在实施过程中发现的问题做初步探讨。     

银杏叶提取物EGB761对阿尔茨海默病家兔模型ACAT1和LCAT mRNA表达的影响

[目的]观察银杏叶提取物EGB761对阿尔茨海默(AD)病家兔模型胆固醇酰基转移酶(ACAT1)和卵磷脂-胆固醇酰基转移酶(LCAT)mRNA表达的影响。[方法]以2%高胆固醇饲料喂养雄性新西兰大白兔,建立AD家兔模型。模型建立后,用50 mg/(kg·d)EGB761灌胃3周作为EGB761组,以5 mg/(kg·d)辛伐他汀作为阳性药对照组。干预结束后,通过实时定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测海马卵磷脂-胆固醇酰基转移酶mRNA和胆固醇酰基转移酶1 mRNA的表达。[结果]银杏叶提取物EGB761可以下调ACAT1 mRNA的表达,不影响LCAT mRNA的表达。[结论]银杏叶提取物EGB761可下调AD家兔模型ACAT1 mRNA表达,对LCAT mRNA表达无调节作用。     

胎盘生长因子与缺血性疾病关系的研究进展

<正>良好的血液循环供应是组织、细胞获得充足的氧和营养物质并排出代谢产物的基本保证。组织血液灌流量减少将导致组织、细胞发生缺血性损伤。随着中国社会经济的发展和生活习惯的改变,缺血损伤性疾病的发病率逐年上升,特别是心、脑等重     

银杏内酯A、B对高胆固醇诱导的PC12细胞胆固醇代谢的影响

[目的] 基于体外血脑屏障(BBB)环境, 观察高胆固醇环境下PC12细胞胆固醇的代谢情况及银杏内酯A、B对其的影响。[方法] 利用Transwell装置共培养星形胶质细胞和脑微血管内皮细胞建立体外BBB, 并与PC12细胞共培养。在Transwell 内皮细胞侧添加40 μmol/L胆固醇, 并分别给予30 μmol/L 银杏内酯A和25 μmol/L 银杏内酯B进行干预。干预结束后, 采用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术, 检测胆固醇代谢关键酶低密度脂蛋白受体相关蛋白-1(LRP-1)、胆固醇酰基转移酶(ACAT)、ATP结合盒转运子A1(ABCA1)及胆固醇24S-羟化酶基因(CYP46)在mRNA水平的表达。[结果] 高胆固醇环境下, LRP-1表达下调(P<0.01), ACAT 及ABCA1表达上调(P<0.05), CYP46的表达有上调趋势;药物干预后, 除LRP-1有不同程度的升高(P<0.05), 其余各指标均无明显变化。[结论] GKA、B对高胆固醇环境下PC12细胞胆固醇代谢关键酶LRP-1的表达有一定影响。     

银杏内酯B对高胆固醇诱导的PC12细胞胆固醇含量的影响

目的: 基于体外血脑屏障环境下观察银杏内酯B(ginkgolide B,GB)对高胆固醇诱导PC12细胞胆固醇含量的影响。方法: 利用Transwell共培养脑微血管内皮细胞和星形胶质细胞建立体外血脑屏障,并与PC12细胞共培养。在Transwell内皮细胞侧添加40 μmol/L胆固醇,并选择不同浓度银杏内酯B分别干预上述模型。观察PC12细胞的形态学变化,通过MTT法筛选银杏内酯B的干预浓度,用HPLC法检测PC12细胞内胆固醇含量的变化。结果: 倒置相差显微镜观察发现PC12细胞大多呈圆形、短梭形或三角形,胞浆伸展,细胞两极有短突起,细胞折光性好,胞核可见。通过MTT确定的银杏内酯B干预剂量分别为低剂量1 μmol/L、中剂量5 μmol/L和高剂量25 μmol/L。HPLC法检测显示模型组PC12细胞内胆固醇含量升高,与对照组相比差异显著 (P<0.01)。银杏内酯B干预上述模型16 h后,25 μmol/L GB降胆固醇的效果最佳,与模型组相比差异显著(P<0.05),25 μmol/L GB与阳性对照药辛伐他汀相比差异无显著(P>0.05)。结论: 中药银杏叶有效单体GB可以降低体外血脑屏障环境下PC12细胞内胆固醇含量。     

TIMP-3甲基化调控与大肠癌转移的关系研究

目的探讨TIMP-3基因启动子5’CpG岛甲基化状况与大肠癌转移的关系。方法随机收集45例大肠癌病例。用甲基化特异性PCR检测TIMP-3基因启动子5’CpG岛甲基化状况;用免疫组化方法检测TIMP-3蛋白的表达水平;分析TIMP-3基因启动子甲基化与大肠癌转移之间的关系。结果大肠癌肝转移组、淋巴结转移组TIMP-3基因甲基化率分别高于非肝转移组（P〈0．01）、非淋巴结转移组（P〈0．01）;Duck＇s C＋D组甲基化率高于Duck’s A＋B组。大肠癌TIMP-3基因甲基化与TIMP-3蛋白的表达缺失有关（P〈0．01）。结论TIMP-3甲基化是大肠癌中TIMP-3蛋白表达缺失的主要原因,在大肠癌转移中发挥重要的作用,提示预后不良。     

基于TGF-β1/Smad4信号探讨缺氧条件下补阳还五汤促进新生血管成熟的机制

目的:研究在缺氧条件下补阳还五汤通过调控转化生长因子-β_1(transforming growth factor-β_1,TGF-β_1)/Smad蛋白4(drosophila mothers against decapentaplegic protein,Smad4)基因信号促进新生血管成熟的分子机制。方法:于体外鼠尾胶基质上种植胸主动脉血管段构建新生血管三维培养模型,随机分为正常组,缺氧模型组,辛伐他汀组,补阳还五汤组。缺氧模型组,常氧条件下培养5 d后缺氧24 h,药物治疗组在缺氧同时分别给予辛伐他汀(10μg·L~(-1))和补阳还五汤载药血清(10%),正常组则常氧条件下培养6 d。利用倒置显微镜观察新生血管生长情况,利用酶联免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测新生血管培养液中TGF-β_1的含量,利用实时荧光定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测新生血管TGF-β_1和Smad4 mRNA的表达,利用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测新生血管神经型钙黏蛋白(neural-Cadherin,NCadherin)蛋白表达。结果:各实验组结果显示,培养6 d,倒置显微镜下均可观察到新生血管生成,与正常组比较,模型组中存活的新生血管数量减少(P0.05),给予补阳还五汤干预后存活的新生血管数量增多(P0.05);ELISA结果显示与正常组比较,缺氧模型组TGF-β_1含量明显降低(P0.01),给予补阳还五汤干预后TGF-β_1含量升高(P0.05);Real-time PCR结果显示,与正常组比较,模型组TGF-β_1和Smad4 mRNA表达下调(P0.05),经补阳还五汤治疗后TGF-β_1和Smad4 mRNA表达明显上调(P0.05);Western blot结果显示与正常组比较,模型组N-Cadherin蛋白表达下调(p0.05),补阳还五汤干预后NCadherin蛋白表达上调(P0.05)。结论:在缺氧条件下补阳还五汤促进成熟新生血管形成,其机制与激活TGF-β_1/Smad4信号进而启动下游N-Cadherin蛋白合成,形成细胞间紧密连接有关。