雷帕霉素对动脉粥样硬化小鼠斑块面积影响及机制探讨

[目的]探讨雷帕霉素对ApoE基因敲除小鼠动脉粥样硬化斑块面积影响及机制。[方法]选取30只雄性ApoE基因敲除（ApoE^-/-）小鼠为研究对象,将其随机分为模型组、雷帕霉素组、阳性药物（瑞伐他汀）组。高脂饮食12周后灌胃干预4周。处死后取主动脉斑块组织油红O和苏木精-伊红（HE）染色评估斑块脂质情况、斑块面积;采用酶联免疫吸附（ELISA）法测定外周血中促炎因子肿瘤坏死因子α（TNF-α）、γ干扰素（INF-γ）、白介素-6（IL-6）和转化因子β（TGF-β）、白介素-10（IL-10）表达情况。[结果]雷帕霉素组斑块面积明显小于模型组,差异有统计学意义（P<0.05）;在炎症因子方面,雷帕霉素组能有效降低外周血TNF-α、INF-γ、IL-6表达,增加IL-10、TGF-β表达,差异有统计学意义（P<0.05）。[结论]雷帕霉素可通过增加抗炎因子含量、降低促炎因子含量来调控炎症反应,进而抑制斑块发展,降低血管狭窄程度。     

银杏内酯B对胆固醇和载脂蛋白E4损伤海马神经元凋亡的保护作用

目的:探讨银杏内酯B对高胆固醇和apoE4致海马神经元凋亡的保护作用。方法:采用无血清培养基体外培养新生大鼠海马神经元,采用神经元特异性烯醇化酶免疫萤光进行鉴定。用160μg/mL银杏内酯B处理海马神经元16h,40μg/mL 25-OH-胆固醇和30μg/mL载脂蛋白E4继续处理24h。通过Hoechst试剂盒测定神经元的凋亡,实时定量RT-PCR测定bax和Bcl-2 mRNA的表达。结果:银杏内酯B抑制神经元凋亡,上调bcl-2 mRNA的表达,下调bax mRNA的表达。结论:银杏内酯B对高胆固醇和apoE4损伤海马神经元凋亡有保护作用,其机理可能与调节两种凋亡相关基因有关。     

五田保肝液对酒精性肝病大鼠肝组织Fas、Fasl、Caspase-8蛋白表达的影响

[目的]研究五田保肝液对酒精性肝病大鼠肝细胞凋亡以及肝组织中Fas、Fasl、Caspase-8蛋白表达的影响。[方法]100只Wistar雄性大鼠随机分为正常对照组10只,阳性药对照组、模型组、五田保肝液低、中、高剂量组各18只。采用白酒灌胃的方法制备动物模型,造模12周乙醚麻醉后断头处死大鼠,取肝组织,采用TUNEL法检测肝细胞凋亡指数,采用免疫组化法法检测肝组织Fas、Fasl、Caspase-8蛋白的表达。[结果]模型组凋亡指数高于其他各组,中药中、高剂量组和阳性药对照组凋亡指数低于模型组,中药低剂量组凋亡指数和模型组无显著性差异;各组Fas蛋白表达差异没有显著性。模型组Fasl、Caspase-8蛋白表达高于其它各组;五田保肝液中、高剂量和阳性药组大鼠肝组织Fasl、Caspase-8的表达较模型组降低,五田保肝液低剂量组Fasl的表达与模型组相比,虽然从数据趋势上有下降的趋势,但差异无统计学意义。五田保肝液低剂量组Caspase-8的表达和模型组差异无统计学意义。[结论]五田保肝液可能通过下调Fasl、Caspase-8的表达,减少酒精引起的大鼠肝细胞的凋亡,从而达到防治酒精性肝病的功效。     

心脑血脉宁对家兔动脉粥样硬化易损斑块模型MMP-2＼TIMP-2表达的影响

[目的】探讨心脑血脉宁对家兔动脉粥样硬化易损斑块模型基质金属蛋白酶一2（MMP-2）、基质金属蛋白酶抑制因子一2（TIMP一2）表达的影响。【方法】通过喂养高脂饲料和主动脉球囊内皮拉伤术复制动脉粥样硬化易损斑块模型,实验分为模型组,假手术组,心脑血脉宁组,历时15周。处死后,取腹主动脉行苏木精一伊红（HE）染色,观察镜下病变,计数斑块破裂数,免疫组化方法检测MMP一2、TIMP一2蛋白含量。【结果】1）HE观察：假手术组镜下形态结构完整,模型组斑块中心可见大量脂核,斑块表面覆盖纤维帽,在斑块肩部可见残存泡沫细胞和大炎细胞浸润。心脑血脉宁组介于两者之间。2）免疫组化结果：与假手术组相比,模型组MMP一2、TIMP一2蛋白含量明显升高,差异有显著性（P〈0．01）;心脑血脉宁组MMP一2与模型组比较表达降低,差异有显著性（P〈0．01）,而TIMP一2含量与模型组相比有降低趋势,但无统计学差异（P〉0．05）;心脑血脉宁组能够有效降低两者比值,与模型组相比差异有显著性（P〈0．01）。【结论】心脑血脉宁干预家兔动脉粥样硬化易损斑块模型,能减少斑块破裂,其机制可能与降低斑块MMP一2含量以及调节MMP一2与TIMP一2比值有关。     

间充质干细胞移植防治动脉粥样硬化的研究进展

目前,心脑血管病患病率逐年上升,心脑血管病已成为城乡居民死亡原因的首位[1]。动脉粥样硬化(atherosclero-sis,AS)是众多缺血性心脑血管病共同的病理基础,可导致冠心病、缺血性脑卒中等发生,严重危害人类健康。AS是血管壁相关细胞在细胞因子作用下导致血管损伤的过程,其中机体免疫细胞的免疫反应是斑块形成的重要因素。越来越多的研究显示,干细胞具有修复组织损伤的功能,干细胞技术为受损血管修复提供了新的可能。间充质干细胞(mesen-chymalstemcells,MSC)是一类具有自我更新、多向分化的干细胞。目前,MSC移植已应用于AS的相关治疗,并取得了良好疗效。现将MSC移植与抑制AS发生发展相关的作用机制综述如下,以期为MSC移植防治AS提供思路。1 MSC的生物特性及功能MSC是Friednstein和Petrakova于1966年骨髓中最先发现的具有多向分化潜能的原始细胞。“间充质”主要是由中胚层发育而成的疏松结缔组织。研究表明,许多间充质中含有定向分化的间充质前体细胞及非定向的间充质前体细胞,后者具有多向分化潜能,可以近似的将其认为是MSC。     

基于bFGF基因表达探讨缺氧条件下补阳还五汤促进体外血管三维模型的血管新生分子机制

目的:基于bFGF基因表达情况调控缺氧条件下补阳还五汤促进体外血管三维培养模型中新生血管的分子机制。方法:于Matrigel基质胶上种植腹主动脉血管段构建体外血管三维培养模型,常氧条件下培养5 d后,给予24 h缺氧干预,平行进行补阳还五汤和辛伐他汀治疗,利用倒置显微镜观察新生血管的生长情况,利用实时定量PCR技术分析bFGF、PDGFB、Ang1的基因表达水平。结果:倒置显微镜观察各实验组均有新生血管形成,其中模型组生长最为旺盛,但杂乱无序,补阳还五汤治疗后,新生血管规则有序。RT-PCR结果显示,与正常组相比,模型组bFGF基因表达明显上调(P 0. 01)、PDGFB基因表达上调(P 0. 05),Ang1基因表达下调(P 0. 05);基于补阳还五汤治疗后,bFGF基因表达上调(P 0. 05)、PDGFB基因表达明显上调(P 0. 01),Ang1基因表达上调(P 0. 05)。结论:缺氧条件下,经补阳还五汤治疗后,上调体外血管三维模型的新生血管相关基因水平表达,进而促进新生血管形成。     

分次口服碘油后碘的排泄率和供碘有效期的实验研究

目的：探讨绒猴分７次口服２００ｍｇ碘油后碘的排泄率及供碘有效期。方法；以药代动力学的方法研究碘的排泄过程。结果：分次口服碘油碘的半衰期和有效期较１次性口服等剂量碘油的半衰期和有效期延长。低碘绒猴的半衰期和有效期较正常绒猴有轻度缩短。     

丹酚酸B对离体内皮祖细胞黏附、趋化和增殖的影响*

[目的] 探讨中药单体丹酚酸B对离体内皮祖细胞(EPCs)黏附、趋化和增殖的影响.[方法] 密度梯度离心法和贴壁筛选法培养、纯化EPCs,免疫细胞化学法(CD34/CD133/)鉴定.丹酚酸B最佳药物浓度干预的EPCs,DiI染色法,Transewell小室与DAPI染色法和Brdu免疫细胞化学法测定EPCs的黏附、趋化和增殖能力.[结果]丹酚酸B组EPCs的黏附细胞数量为(37.00±3.27),24 h和48 h趋化的细胞数量分别为(26.32±2.66)和(53.41±3.85),增殖的细胞数量为(41.17±3.43),与对照组比较差异均具有统计学意义(P＜0.05).[结论] 丹酚酸B能够有效促进离体内皮祖细胞的黏附、趋化和增殖能力.     

银杏叶提取物EGB761对高胆固醇血症家兔血脑屏障通透性的影响*

[目的]观察银杏叶提取物EGB761对高胆陶醇血症家兔血脑屏障是否具有保护作用。【方法】以2％高胆阎醇饲料喂养雄性新西兰大白兔,建立高胆固醇血症家兔模型。模型建立后,用50mg／（kg&#183;d）EGB761灌胃3周作为EGB761组,以5mg／（kg&#183;d）辛伐他汀灌胃3周作为阳性药辛伐他汀组。干预结束后,耳缘静脉给予25g／L伊文思蓝（EB）,3h后麻醉,生理盐水心脏灌流后取材,通过比色法测定皮质、海马和嗅球EB含量。[结果]银杏叶提取物EGB761可以降低海马和嗅球EB含量,与模型组相比分别为P〈0．01、P〈0．05;与阳性药辛伐他汀疗效相比差异无显著性,P〉0．05。【结论】银杏叶提取物EGB761能够降低由高胆同醇血症导致的血脑屏障通透性。     

银杏内酯B对动脉粥样硬化家兔模型血清CRP和主动脉VCAM-1 mRNA的影响*

[目的]探讨银杏内酯B(EGB)对动脉粥样硬化家兔模型血清反应蛋白(CRP)含量和主动脉血管细胞黏附分子-1(VCAM-1mRNA)表达的影响.[方法]通过高脂饲料喂养8周复制动脉粥样硬化家兔模型,将35只家兔随机分为对照组、模型组和银杏内酯B组,8周后,银杏内酯B组加喂EGB 5 mg/(kg·d),继续喂养8周.处死前耳缘静脉取血,采用ELISA法检测血清CRP含量;处死后取主动脉,采用实时定量PCR法检测VCAM-1 mRNA表达.[结果]模型组血清CRP含量比对照组升高,银杏内酯B组血清CRP含量降低,与模型组相比两组差异均有显著性,P<0.01.模型组VCAM-1 mRNA表达比对照组升高,银杏内酯B组VCAM-1 mRNA表达降低,与模型组相比两组差异均有显著性,P<0.01.[结论]银杏内酯B能够降低动脉粥样硬化家兔模型血清CRP含量,有效抑制动脉粥样硬化家兔模型主动脉VCAM-1 mRNA表达,从而起到防治动脉粥样硬化的目的.