血清miRNA作为胃癌早期诊断标记物的初步研究

背景:已有研究发现部分血清miRNA与胃癌密切相关,但对早期胃癌的研究较少见。目的:探讨血清miR-1、miR-20a、miR-27a、miR-34a、miR-423-5p表达在胃癌尤其是早期胃癌诊断中的价值。方法:采用qRT-PCR法检测180例胃癌患者(包括149例进展期胃癌和31例早期胃癌)、49例癌前变化患者、57名健康对照者的血清miR-1、miR-20a、miR-27a、miR-34a、miR-423-5p表达。采用ROC曲线判断miRNA的诊断敏感性和特异性。结果:胃癌患者血清miR-1、miR-20a、miR-34a、miR-423-5p表达显著升高(P0.05),ROC曲线下面积(AUC)分别为0.894 9、0.814 8、0.644 8、0.589 7,四者联合的AUC为0.921 1,敏感性和特异性分别为85.8%和83.3%。早期胃癌中miR-1和miR-20a的表达明显升高(P0.05),AUC分别为0.813 8和0.774 2,两者联合的AUC为0.865 3,敏感性和特异性分别为80.5%和83.6%。进展期胃癌中miR-1的表达显著高于早期胃癌(P=0.012 1),且术后表达明显降低(P=0.018 5)。结论:miR-1、miR-20a、miR-34a、miR-423-5p可作为肿瘤标记物对胃癌进行诊断,miR-1、miR-20a可作为诊断早期胃癌的标记物。     

肿瘤坏死因子受体p55/p75在重症急性胰腺炎发病机制中的作用

目的探讨肿瘤坏死因子受体p55/p75(TNFR p55/TNFR p75)在重症急性胰腺炎(SAP)发病机制中的作用。方法36只雄性SD大鼠均分为对照组与SAP组。SAP组采用5%牛黄胆酸钠1ml/kg胰胆管逆行穿刺注射建立模型,对照组仅给予剖腹假手术。两组大鼠分别在造模后3、6和12h处死,收集外周血与胰腺标本。ELISA法检测血清TNFα水平,RT PCR法检测外周血单个核细胞(PBMC)与胰腺组织中TNFR p55/TNFR p75mRNA表达,采用血清淀粉酶与病理组织学评分作为SAP严重程度的指标。结果SAP组不同时间点血清淀粉酶、TNFα水平及胰腺组织炎症评分均显著高于对照组(P<0.01)。在PBMC中TNFR p55/TNFR p75mRNA的表达在各时间点均较对照组显著上调(P值均<0.01),且在6h达峰值,分别为1.32±0.07和0.95±0.04;而对照组在6h点为0.84±0.01和0.68±0.04。胰腺组织中TNFR p55/TNFR p75mRNA的表达在各时间点也均高于对照组(P值均<0.05)。结论TNFα是SAP病程中重要的细胞因子并可能通过结合胰腺组织中TNFR p55/TNFR p75参与胰腺组织损伤;同时,TNFα又可能通过与PBMC中TNFR p55/TNFR p75相互作用导致外周血中白细胞活化,从而加重胰腺炎的严重程度。     

真核翻译延长因子1A2对人胰腺癌裸鼠移植瘤生长和血管形成作用的研究

人类真核翻译延伸因子1A2（EEF1A2）是一种管家基因，可能作为一种新的潜在癌基因。参与肿瘤的发生、发展。目的：探讨EEFIA2对人胰腺癌裸鼠移植瘤生长和血管形成的作用。方法：以聚合酶链反应（PCR）扩增目的基因片段，应用基因重组技术构建Ad5／F35。EEF1A2重组腺病毒载体。15只裸鼠建立人胰腺癌移植瘤模型．随机分为对照组、绿色荧光蛋白（GFP）组和EEF1A2组，分别注射PBS0．1ml、Ad5／F35-GFP0．1ml（1×10^8PFU）和Ad5／F35-EEF1A20．1ml（1×10^8 PFU）。测定各组肿瘤体积和质量，应用免疫组化方法检测各组增殖细胞核抗原（PCNA）和CD31的表达。结果：成功构建了表达EEF1A2的重组腺病毒载体。与对照组和GFP组相比，EEF1A2组裸鼠肿瘤体积和质量显著增加（P〈O．05），PCNA和CD31表达显著增高（P〈O．05）。结论：EEF1A2可显著促进人胰腺癌裸鼠移植瘤生长，细胞增殖和肿瘤血管形成可能是其重要作用机制。     

急性胰腺炎发病过程中肿瘤坏死因子受体p55／p75的表达及意义

目的探讨肿瘤坏死因子受体p55/p75(TNFR-p55/TNFR-p75)在实验性急性水肿型胰腺炎(AEP)发病机制中的作用。方法36只雄性SD大鼠随机分为对照组与AEP组。AEP组采用雨蛙肽(20μg/kg体重)腹腔注射,每小时1次,共4次建立大鼠急性水肿型胰腺炎模型,对照组仅给予腹腔注射生理盐水。两组大鼠分别在造模后3、6、12 h处死,收集外周血与胰腺标本。应用ELISA法检测血清TNF-α水平,运用RT-PCR的方法检测外周血单核细胞(PBMC)与胰腺组织中TNFR-p55/TNFR- p75mRNA表达,同时测定血清淀粉酶与病理组织学评分作为急性胰腺炎严重程度的指标。结果MAP组3个时间点血清淀粉酶、TNF-α水平及胰腺组织炎症评分均显著高于对照组(P<0.01),在PBMC及胰腺组织中TNFR-p55/TNFR-p75 mRNA的表达均显著上调(P<0.05)。结论TNF-α是急性胰腺炎病程中的重要细胞因子并通过结合胰腺组织中TNFR-1355、TNFR-p75参与引起胰腺组织损伤;同时TNF-α通过与PBMC中TNFR-p55/TNFR-p75相互作用导致外周血中白细胞活化,从而影响急性胰腺炎的严重程度。     

吸附性血液净化器治疗溃疡性结肠炎患者的护理体会

【摘要】 目的 通过观察接受吸附性血液净化治疗的活动性溃疡性结肠炎患者的治疗及护理过程,分析与总结相应的护理经验体会。方法 选取2012年4月至2013年9月来我院符合入选标准的接受吸附性血液净化治疗的溃疡性结肠炎患者16例,观察患者治疗前后的生命体征、内镜下溃疡性结肠炎活动度、梅奥评分及实验室检查的变化;记录相关的护理措施;观察该治疗期间的安全性及并发症发生情况。结果 16例患者中,其中2例提前退出,其余14例患者均完成所有10次治疗方案,对这14例患者的病例资料整理与分析,根据内镜下活动度评分判断疗效总有效率为92.86%,而根据梅奥评分判断疗效总有效率为78.57%。在静脉血管通路方面,142例次的GMA治疗中,采用双侧肘正中静脉留置针置管占总例数的94.37%;双侧下肢留置针置管占4.22%;采用锁骨下深静脉置管占1.41%。 主要不良反应为偏头痛,其发生率为6.25%。结论 本研究结果示应用吸附性血液净化器对活动期溃疡性结肠炎患者的治疗总体疗效显著,不良反应轻微,无并发症发生,安全性好。积极、有效的护理观察和干预是使患者能够顺利完成治疗的有效保障。     

以多浆膜腔积液就诊的巨大主动脉假性动脉瘤

患者女,14岁,因腹痛胸闷1个月,发现多浆膜腔积液入院.患者2011年7月中旬骑电动车摔倒,当时无明显不适,8月中旬出现上腹部针刺样持续性疼痛,伴胸闷、胃纳减退及间歇性发热,体温最高38℃.8月底于当地医院就诊,贫血貌,肝肋下2指,移动性浊音可疑阳性.实验室检查:Hb 66 g/L,PPD阴性.骨髓穿刺示增生性贫血象.胸部CT、心超示心包积液;腹部CT示肝右叶点状高密度影,腹水.当地医院考虑为结缔组织病引起多浆膜腔积液可能,结核不能排除,故予以地塞米松10 mg×3d及诊断性抗结核治疗1d,因患者依从性差停药,病情无好转.     

信号转导和转录激活子1的活化抑制蛋白对急性胰腺炎的预后判断

目的 检测信号转导和转录激活子1的活化抑制蛋白( PIASl)在急性胰腺炎(AP)大鼠胰腺中的表达,探讨其对AP病情的评估价值.方法 SD大鼠按随机分配表法分为对照组、急性水肿性胰腺炎(AEP)组、急性坏死性胰腺炎(ANP)组,各15只.术后0.5、6、16、24、48、72 h分批处死大鼠,取血清检测C反应蛋白(CRP)、淀粉酶水平,测胰腺组织含水量,行胰腺常规病理检查并评分,采用蛋白质印迹法和免疫组化法检测胰腺组织PIASI表达.记录大鼠72 h生存情况,行Cox多因素风险评估.结果 ANP组16 h时的胰腺病理评分、胰腺含水量、血清CRP和淀粉酶水平分别为(7.70±2.55)分、(2.9l±0.57)％、(0.36 ±0.05) mg/L、(3141±625) U/L,均显著高于AEP组的(2.60±1.04)分、(2.04±0.47)％、(0.24±0.05) mg/L、(1984±637) U/L,亦显著高于对照组的(0.80±0.42)分、(1.21±0.27)％、(0.14±0.03) mg/L、(978±353) U/L(P值＜0.05或＜0.01).ANP组大鼠平均生存时间为(26.4±3.4)h,较AEP组的(57.3±4.2)h和对照组的(71.3±0.5)h显著缩短(P值均＜0.01).ANP组16 h时的胰腺组织PIAS1蛋白表达较AEP组及对照组显著下调(0.10±0.01比0.80±0.07和0.87±0.05,P＜0.01).Cox分析显示PIAS1为影响AP大鼠生存时间的独立因素之一.结论 PIAS1在ANP中低表达,与AP病情严重度呈负相关,可以成为预测病情严重程度及预后的指标.     

轻症急性胰腺炎时细胞免疫功能变化的实验研究

胸腺素α1（TA2）是一种具有免疫调节活性的多肽激素，临床应用已日益广泛，具有抗衰老、抗肿瘤、抗感染、促进伤口愈合等作用，但TA1是否对轻症急性胰腺炎（MAP）具有治疗作用尚不十分清楚。目的：研究MAP时细胞免疫功能的变化，并通过给予外源性TA1观察能否减轻MAP的严重程度。方法：54只雄性Sprague-Dawley大鼠随机分为对照组、MAP组和TA1治疗组。MAP模划采用雨蛙肽（20μg／kg）腹腔注射，1次／h，共4次，建立大鼠MAP模型；TA1组于造模成功后立即皮下注射TA1（100μg／kg）；刘照组仅给予腹腔注射生理盐水。三组大鼠分别在造模后3h、6h、12h处死，收集外周血和胰腺标本。观察MAP时TA1对血清淀粉酶、血清肿瘤坏死因子（TNF）-α和胰腺组织炎症评分的影响。同时应用流式细胞仪观察外周血CD3＋、CD4＋、CD8＋T细胞的变化。结果：MAP组与TAI组各时间点的血清淀粉酶、血清TNF-α水平和胰腺组织炎症评分均显著高于对照组（P〈0．01），但MAP组与TA1组之间无显著差异（P〉0．05）。MAP组6h CD8＋T细胞百分率明显低于对照组（P〈0．05），CD4＋／CD8＋比值明显高于对照组（P〈0．05）；MAP组其他时间点和TA1组与对照组比较无显著差异（P＞0．05）。结论：MAP早期存在细胞免疫功能失调，但可通过自身调节维持正常的免疫功能。MAP时也用TA1对细胞免疫功能可能具有调节作用。     

腺病毒介导XAF1基因诱导人肝癌细胞株SMMC7721凋亡的实验研究

背景：X连锁凋亡抑制蛋白（XIAP）相关因子1（XAF1）是新近鉴定的肿瘤抑制基因,在许多人类恶性肿瘤中低表达甚至不表达。目的：研究Ad5/F35腺病毒介导XAF1基因诱导人肝癌细胞株SMMC7721凋亡的作用及其可能机制。方法：构建重组腺病毒Ad5/F35-XAF1、对照病毒Ad5/F35-Null和报告病毒Ad5/F35-增强型绿色荧光蛋白（EGFP）,分别按不同感染复数（MOI）在同一作用时间点感染人肝癌细胞株SMMC7721。以荧光显微镜和流式细胞仪检测Ad5/F35-EGFP的感染效率;分别以逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）和蛋白质印迹法检测XAF1mRNA和蛋白表达;以甲基噻唑基四唑（MTT）法检测细胞增殖率;以Annexin V-FITC/PI双染法和原位末端标记TUNEL法检测细胞凋亡率;以蛋白质印迹法检测凋亡相关蛋白caspase-3、caspase-8和caspase-9的表达。结果：Ad5/F35-EGFP感染48h,MOI为2.0时,92%以上的SMMC7721细胞表达绿色荧光蛋白。Ad5/F35-XAF1感染48h后,SMMC7721细胞中XAF1 mRNA和蛋白表达增高,细胞增殖受到抑制,细胞凋亡剂量依赖性地增多,并伴随凋亡相关蛋白caspase-3、caspase-8和caspase-9的裂解。结论：重组腺病毒Ad5/F35-XAF1在人肝癌细胞株SMMC7721中具有很强的感染效率,可促进XAF1基因表达,且能明显抑制人肝癌细胞增殖和诱导凋亡,此作用可能与XAF1激活了内、外源性凋亡通路有关。