肺癌干细胞的球体形成与致瘤性分析

目的：从人肺腺癌细胞株SPC—A1中诱导球体形成，对其中的肺癌干细胞进行鉴定并评估其致瘤能力。方法：无血清条件下培养肺癌细胞，采用表皮生长因子（epidermal growth factor，EGF）、重组人胰岛素样生长因子-1（insulin—like growth factor-1，IGF-1）和重组人成纤维细胞生长因子-10（fibroblast growth factor—10，FGF-10）等细胞生长因子诱导球体形成，球体细胞采用RT—PCR及免疫荧光技术检测干细胞相关标志的表达，并通过NOD—SCID小鼠移植评估其致瘤性。结果：SPC—A1肺腺癌细胞经培养5—10d后，即可形成悬浮生长的细胞球体（肺球体）。RT—PCR检测显示肺球体细胞表达肺癌干细胞表面标志CD24和CD221．细支气管肺泡干细胞标志Clara细胞分泌蛋白和肺泡活性蛋白C，胚胎干细胞主干基因OCT4、Nanog和Bmi-1，以及肺干细咆主干基因甲状腺转录因子-1。采用免疫荧光检测其中3个标志的蛋白表达，证实80％以上的肺球体细胞呈Clara细胞分泌蛋白、肺泡活性蛋白C和OCT4染色阳性。肺球体细胞具有高致瘤性，在NOD—SCID小鼠中移植5103个细胞即可形成肿瘤。结论：肺球体细胞中肺癌干细胞高度富集并具有致瘤性。     

ANGPTL4 基因对不同肝癌细胞株生长的影响

目的:观察血管生成素样蛋白4(angiopoietin-like 4, ANGPTL4 )基因对不同肝癌细胞株生长的影响. 方法:用RT-PCR和Western印迹法检测9种不同肝癌细胞及永生化肝细胞中ANGPTL4的表达水平;选择ANGPTL4低表达的Huh-7、MHCC-LM3 和中度表达的MHCC-97L共3个肝癌细胞株,以pEGFP-N1质粒为载体,用Lipofectamine 2000脂质体转染 ANGPTL4 基因,用G418筛选结合FCM法对转染阳性细胞进行筛选,建立过表达ANGPTL4的稳定细胞株.制备细胞芯片,用 Ki-67 荧光免疫细胞化学技术检测3个稳定细胞株的体外增殖率,用裸小鼠体内成瘤实验观察ANGPTL4对这3个细胞株在裸小鼠体内生长的影响.结果:ANGPTL4 mRNA在未转染肝癌细胞Huh-7和MHCC-LM3中低表达,在MHCC-97L细胞中中度表达,在Hep3B细胞中高表达.细胞芯片检测结果表明,与空载体组相比,稳定过表达ANGPTL4的Huh-7细胞体外增殖率较低( P=0.000 74),而稳定过表达ANGPTL4的MHCC-LM3( P =0.073 08)和MHCC-97L( P=0.011 52)细胞株的体外增殖率则较高.体内实验证实,ANGPTL4可以明显抑制Huh-7细胞的裸鼠体内成瘤( P ＝0.001 10),而促进MHCC-LM3细胞( P＝0.057 50) 和MHCC-97L细胞( P＝0.018 91)的裸鼠体内成瘤.结论:ANGPTL 4对不同肝癌细胞株的生长有不同影响,而对同一种细胞株体内和体外生长的影响基本一致.     

外周血内皮祖细胞数判断抗血管生成化疗剂量的实验研究

目的：研究SGC-7901、MKN-45、Huh-7和U87等荷瘤裸鼠模型中内皮祖细胞（endothelial progenitor cell,EPC）水平,通过检测EPC判断优福定（UFT）抗血管生成的化疗剂量。方法：建立荷瘤动物模型,UFT和环磷酰胺（CTX）对荷瘤动物模型治疗后,FCM检测外周血EPC（circulating EPC,CEP）,免疫组织化学检测微血管密度（microvessel density,MVD）。结果：SGC-7901、MKN-45、Huh-7和U87等荷瘤裸鼠模型中CEP水平升高,与正常对照裸鼠相比,差异有统计学意义（P〈0.05）。不同小剂量UFT持续治疗MNK-45荷瘤裸鼠,检测CEP确定UFT抗血管生成化疗时最佳生物剂量是20mg.kg-1.d-1。最大耐受剂量UFT组治疗1周时,裸鼠处于频死状态,与对照组相比,CEP明显增加（P〈0.05）;持续小剂量UFT组治疗3周后,与对照组相比,CEP明显降低（P〈0.05）。持续小剂量UFT和CTX治疗MNK-45荷瘤裸鼠结果显示,CEP值和MVD显著相关（r=0.998,P=0.044）。结论：CEP检测可估计UFT抗血管生成化疗的最佳生物剂量和抗肿瘤疗效。     

鼻咽通气道在超重与正常体质量人群无痛胃镜检查中预防低氧血症的效果

目的 评价鼻咽通气道（nasopharyngeal airway,NPA）在超重与正常体质量人群无痛胃镜检查中预防低氧血症的效果。方法 选取2019年11月至2022年2月于嘉兴学院附属医院接受无痛胃镜检查患者2000例为研究对象,根据随机数字表法将其分为NPA组和鼻氧管组,每组根据体质量指数（body mass index,BMI）进一步分为10个层级各纳入100例。鼻氧管组患者予常规鼻氧管吸氧,NPA组患者置入NPA后经该通道吸氧,氧流量均为4L/min。比较两组患者基础经皮动脉血氧饱和度（percutaneous arterial oxygen saturation,SpO2）、胃镜检查时间与麻醉期间轻度、中度和重度低氧血症的发生情况及不良反应发生情况。结果 NPA组正常体质量人群轻度、中度低氧血症的发生率均低于鼻氧管组,超重人群轻度、中度及重度低氧血症的发生率均低于鼻氧管组（P<0.05）。相同BMI分层比较,与鼻氧管组相比,NPA组BMI≥23.0kg/m2者轻度及中度低氧血症发生率更低,BMI≥28.0kg/m2者重度低氧血症发生率更低（P<0.05）。NPA组患者术中呛咳及离院前恶心呕吐、头晕头痛发生率低于鼻氧管组,但鼻黏膜出血发生率高于鼻氧管组（P<0.05）。结论 NPA的应用可显著降低超重与正常体质量人群无痛胃镜检查中低氧血症的发生率,且不良反应较少。     

CT引导下经皮穿刺胸交感神经化学切除治疗雷诺综合征

雷诺综合征是一组因血管神经功能紊乱而引起的阵发性末梢动脉痉挛性疾病,尽管因有肢端皮肤颜色呈阵发性苍白-紫绀-潮红-正常周期性改变伴疼痛这一典型的症状体征而易于诊断,但常规药物治疗效果多不佳.本文用CT引导下经皮穿刺胸交感神经阻滞治疗取得了良好效果,现报告如下.资料与方法1.临床资料:经医院伦理委员会批准并取得患者知情同意后,将2010年6月至2011年5月间来我院接受CT引导下经皮穿刺胸交感神经阻滞治疗的26例雷诺综合征患者作为观察对象:男2例,女24例,年龄36 ～ 65岁,平均49.23岁,病史2- 26年,平均8.4年,患者均有双手遇冷后手指出现苍白-紫绀-潮红-正常的周期性变化特点,且这个变化期间手指疼痛剧烈,冬春季节发作频繁,有时情绪紧张、激动或夏天由室外进入有冷空调的室内也会诱发,其中8例双足亦有与双手相同的情况.     

CT引导下经皮穿刺胸交感神经调控治疗头面部多汗症

头面部多汗俗称蒸笼头,与手汗症一样,都是多汗症的一种局部表现形式,胸腔镜下胸交感神经链切断术也是治疗头面部多汗症的经典术式[1],但和治疗手汗症比,要求切断交感神经链的部位高达T2水平,术后更易出现代偿性多汗[2-3].本文采用CT引导下经皮穿刺胸交感神经调控治疗头面部多汗症取得了良好效果,现报告如下.     

凝聚胺法、微柱凝胶法两种配血方法学评价

目的对凝聚胺法(MPT)、微柱凝胶法(MGT)两种交叉配血方法进行方法学比较。方法以1456例输血患者为研究对象,分别用MPT、MGT两种方法进行交叉配血,对交叉配血试验过程中的阳性患者行不完全抗体检测,评价两种交叉配血方法的优缺点。结果 MPT、MGT两种交叉配血方法总阳性率分别为5.5‰、9.6‰,次侧阳性率分别为3.4‰、8.9‰,次侧阳性率经卡方检验分析比较差异有统计学意义(P<0.05),主侧阳性、总阳性率及假阳性率比较差异无统计学意义(P>0.05)。MGT方法学灵敏度、特异度、正确诊断指数、符合率分别为100%、99.9%、0.99、99.9%均好于MPT。结论微柱凝胶法适于输血工作的标准化检测,有很好的灵敏度、特异度对不规则抗体的检测有优势,凝聚胺法能为急诊患者的抢救赢得时间。     

蜈蚣全蝎散对骨癌痛大鼠行为学及其脊髓背角c-fos蛋白表达的影响

目的 研究蜈蚣全蝎散(CS)对骨癌痛大鼠的镇痛作用及其脊髓背角c-fos表达的影响。 方法 将雌性SD大鼠采用随机数字法分为6组:假手术组(S组)、胫骨癌痛组(A组)、生理盐水组(NS组)、CS 20 mg/kg(C₁组)、40 mg/kg(C₂组)、80 mg/kg(C₃组)。采用大鼠左胫骨上端骨髓腔注入Walker256癌细胞悬液(10 μl,2×107cells/ml)的方法建立骨癌痛模型。造模9 d后,采用不同剂量的CS灌胃,2次/d,连续4 d后,测定各组大鼠机械痛阈值;并取L₄和L₅脊髓背角,运用Western blot法测定c-fos蛋白表达及RT-PCR法测定c-fos mRNA表达。 结果 与S组比较,A组造模后第9、12天机械痛阈值均下降,差异均有统计学意义[第9天机械痛阈值分别为:(8.69±0.53)g、(6.61±0.22)g,P<0.05;第12天机械痛阈值分别为:(8.67±0.43)g、(6.56±0.48)g,P<0.05],造模后第12天脊髓背角内c-fos蛋白、c-fos mRNA表达均上调,差异均有统计学意义(蛋白表达量分别为:1.46±0.19、3.61±0.51,P<0.05;mRNA表达量分别为:0.65±0.22、2.53±0.31,P<0.05);与NS组比较,造模第12天后,C₂、C₃组机械痛阈值均升高,差异均有统计学意义(均P<0.05);脊髓背角内c-fos蛋白、c-fos mRNA表达均下调,差异均有统计学意义(蛋白表达量分别为:3.24±0.67、2.71±0.43、2.15±0.37,P<0.05;mRNA表达量分别为:2.39±0.44、1.62±0.21、1.46±0.14,P<0.05)。 结论 蜈蚣全蝎散可缓解骨癌痛大鼠的痛觉过敏,其机制可能与降低其脊髓背角内的c-fos表达有关。      

切开法结合埋线法重睑成形术在临床中的应用

目的 观察切开法结合埋线法对重睑成形术的临床应用.方法 收集行重睑的就诊者63例,分为对照组和观察组.对照组采用常规切开法行重睑成形术33例,观察组采用切开法结合埋线法行重睑成形术30例,比较两种术式在相同年龄段的女性患者中其手术时间、术后水肿消退时间、术后肿胀消退至自然状态的时间,比较术后1个月和1年的重睑形态满意度.结果 对照组和观察组术后1个月的满意度,差异有统计学意义;术后1年的满意度差异无统计学意义（P＞0.05）.观察组与对照组手术时间、术后水肿消退时间、术后肿胀消退至自然状态的时间比较差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 切开法结合埋线法创伤小,手术时间短,重睑自然,术后恢复快,满意度高,其值得在临床推广和应用.