OSBPL2介导RhoA/ROCK2信号通路调控听觉细胞肌动蛋白细胞骨架

目的：探索氧化固醇结合蛋白样蛋白2(oxysterol binding protein-like 2,OSBPL2)对听觉细胞肌动蛋白骨架形态和功能的影响及其相关分子机制。方法：采用OSBPL2基因敲除（Osbpl2-KO）HEI-OC1细胞探讨OSBPL2缺陷对听觉细胞肌动蛋白细胞骨架形态和功能的影响;扫描电镜观察Osbpl2-KO小鼠毛细胞静纤毛形态;Western blot实验检测HEI-OC1细胞和耳蜗内Rho/ROCK信号通路关键效应因子Rho激酶2(Rho-associated coiled-coil-containing protein kinase 2,ROCK2)、Lim激酶1(LIM domain kinase 1,LIMK1)、肌动蛋白解聚因子/丝切蛋白1(actin depolymerizing factor/cofilin 1,ADF/CFL-1)的表达水平。结果：Osbpl2-KO HEI-OC1细胞微丝骨架中纤维肌动蛋白（F-actin）的分布明显减少,细胞外周微刺突和丝状伪足明显减少,细胞迁移能力明显减弱;扫描电镜下观察发现Osbpl2敲除导致小鼠耳蜗内...     

USP14调控OSBPL2蛋白去泛素化作用的实验研究

目的：研究泛素特异性蛋白酶14（ubiquitin?specific peptidase 14,USP14）通过调控氧化固醇结合样蛋白2（oxysterol binding protein?like 2,OSBPL2）的泛素化水平稳定OSBPL2表达的分子机制。方法：以HeLa细胞为工具细胞,通过对USP14过表达、敲降以及活性抑制,检测OSBPL2的表达水平;采用体外过表达实验考察USP14对OSBPL2的泛素信号和泛素化水平的调控;采用免疫共沉淀（co?immunoprecipitation,Co?IP）阐明USP14与OSBPL2相互作用的具体结构域、不同结构域在蛋白相互作用中的作用以及OSBPL2的关键泛素化位点。结果：USP14与OSBPL2存在相互作用关系并稳定OSBPL2的表达而不改变其转录水平;体外过表达和Co?IP实验结果表明,USP14催化（catalytic,CAT）结构域与OSBPL2氧固醇结合蛋白相关结构域（OSBP?related domain,ORD）的相互作用降低OSBPL2的泛素化水平;类泛素（ubiquitin?like,UBL）结构域在USP14与OSBPL2相互作用中起到了促进作用;Lys209和Lys361是OSBPL2泛素化和去泛素化的关键位点。结论：USP14通过调控OSBPL2蛋白Lys209和Lys361两个位点的泛素化进而调控其泛素化水平,稳定OSBPL2蛋白的表达。     

医联体“四重四轻”难题怎么解

正医联体建设是建立分级诊疗制度的重要抓手,是国际医疗体系发展和改革的趋势,也是近年来国家和省级综合医改工作的重要内容之一。江苏在省医联体建设方面先行先试,虽取得了一些成效,但目前仍处于初步探索阶段,存在"四重四轻"的问题。建设困境:"四重四轻"难题显现在组建方式上,重行政主导,轻内在动力。从江苏已经建立的医联体看,大多是公立的,由政府"拉郎配",医疗机构之间缺乏"整合"的内在动力。对     

SIMV＋PSV模式无创通气治疗COPD并Ⅱ型呼吸衰竭15例分析

目的：观察SIMV＋PSV无创通气对慢性阻塞性肺疾病（COPD）并发严重呼吸衰竭患者的治疗作用。方法：在常规治疗的基础上,应用SIMV＋PSV模式通气对15例COPD并II型呼吸衰竭患者观察其治疗前后6 h、1 d、3 d动脉血气及临床变化。结果：15例患者应用呼吸机后PaO2明显升高（P〈0.01）,PaCO2明显下降（P〈0.05）,4例患者病情恶化行气管插管呼吸机辅助通气治疗。结论：SIMV＋PSV对COPD并严重呼吸衰竭疗效肯定,无严重不良反应。     

变应性鼻炎患者转录因子GATA-3和细胞间黏附分子-1的表达及其相关性的实验研究

目的：探讨变应性鼻炎患者鼻黏膜组织中转录因子GATA3和细胞间黏附分子-1（ICAM-1）的表达及关系。方法：通过逆转录多聚酶链反应（RTPCR）和酶联免疫吸附试验（ELISA）,检测32例变应性鼻炎患者和12例对照鼻黏膜组织中GATA3和ICAM1的表达。结果：PCR反应后变应性鼻炎患者和对照鼻黏膜组织中GATA3相对密度分别为0．632±0．121和0．131±0．024;ICAM-1的含量为（237．5±37．3）pg／mg和（121．7±22．4）pg／mg;GATA-3与ICAM-1的表达呈正相关关系（r=0．8128,P〈0．05）。结论：GATA-3参与了变应性鼻炎病理过程中ICAM1的过度表达,对变应性鼻炎的发生、发展具有重要的意义。     

海风藤酮治疗大鼠实验性急性胰腺炎

目的:探讨海风藤酮对急性胰腺炎炎症介质的影响及其治疗作用. 方法:雄性SD大鼠104只,质量250～300 g,随机分为假手术对照组(n=24),急性胰腺炎组(n=40)和海风藤酮治疗组(n=40),每组又按3,6,12,24 h分为4小组. 结果:急性胰腺炎组各时段血清PAF,TNF-α,IL-6显著升高,其中PAF在各时相持续升高,TNF-α在6 h时达高峰,而IL-6在12 h达高峰,与假手术组各个时相段比较有显著性差异(P＜0.01);用药后治疗组各个时相段可显著降低血清PAF,TNF-α,IL-6的水平(P＜0.05). 结论:海风藤酮可抑制炎症介质,明显减轻胰腺/肺组织病理损害.     

乳头切开术治疗胆管下端良性狭窄74例

胆管下端良性狭窄主要由胆管和胰管炎症引起,过去多采用oddi括约肌切开成形术和胆肠吻合等外科手术方式治疗。我们在用乳头括约肌切开术(EST)治疗胆管结石基础上,应用EST成功治疗胆管下端良性狭窄,取得较好的临床效果。对象与方法1.对象:2001年1月~2006年5月经ERCP诊断胆管下端     

腹腔镜脾切除术治疗门静脉高压症术后并发症及相关因素分析

目的探讨腹腔镜脾切除术治疗门静脉高压症术后并发症及其相关因素。方法选取2012年1月至2015年6月于武汉市武昌区院85例行腹腔镜脾切除术的门静脉高压症病人,分析术后并发症及相关危险因素。结果术后16例病人出现24例次并发症,发生率为18.82%。按照Clavien-Dindo分级标准,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲa、Ⅲb、Ⅳa、Ⅳb和V级并发症病人例数分别为3、7、1、3、1、0、1例。单因素分析显示术后并发症的发生与ASA分级、Child-Pugh分级、手术方式、联合贲门周围血管离断术、术者经验有关(均P0.05),而与年龄、性别、术前胆红素升高、术前血浆白蛋白水平和脾脏长径无关(P均0.05)。多因素分析显示,ASAⅢ级、Child-Pugh B级和术者经验20例是术后并发症发生的独立危险因素(P均0.05)。结论腹腔镜脾切除术治疗门静脉高压症术后并发症发生率较高,其发生与ASAⅢ级、Child-Pugh B级和术者经验20例的病人。     

GPRASP2基因编辑猪胎儿成纤维细胞系的建立

目的:采用CRISPR/Cas9基因编辑技术构建G蛋白偶联受体相关分选蛋白2(G protein-coupled receptor associated sorting protein 2,GPRASP2)基因敲除的猪胎儿成纤维细胞(porcine fetal fibroblast,PFF),为构建GPRASP2基因敲...     

抗TNF-α单克隆抗体治疗豚鼠分泌性中耳炎的实验研究

目的:观察抗TNF-α单克隆抗体对豚鼠分泌性中耳炎的治疗效果.方法:建立分泌性中耳炎的动物模型,随机分成空白对照组、造模组和TNF-αMcAb治疗组三组.比较光镜和电镜下中耳、咽鼓管粘膜的组织形态及处理组TNF-α蛋白含量变化.结果:TNF-αMcAb治疗组中耳、咽鼓管粘膜的组织形态接近于正常对照组,其TNF-α蛋白含量明显低于造模组(p＜0.001).结论:抗TNF-α单克隆抗体能拮抗TNF-α的炎症介导作用,对豚鼠分泌性中耳炎治疗有效.