具有靶向免疫抑制作用新型重组融合蛋白B7-2-PE40KDEL真核表达载体的构建及其生物效应

目的:构建B7-2-PE40KDEL的真核表达载体,探讨通过体内表达重组融合蛋白,特异性杀伤高表达CD28 T细胞,阻断B7∶CD28/CTLA4共刺激信号途径诱导免疫耐受的可能性.方法:以原核表达载体pRSETA-B7-2-PE40KDEL质粒为模板,采用PCR及酶切连接的方法构建真核表达载体pcDNA3.1/Zeo( )-B7-2-PE40KDEL.利用RT-PCR、Western 印迹及ELISA法从mRNA、蛋白质水平检测了B7-2-PE40KDEL在RPE-CHO真核细胞中的表达情况.采用MTT法对其特异性杀伤高表达CD28 T细胞的生物活性进行测定.结果:成功构建了pcDNA3.1/Zeo( )-B7-2-PE40KDEL真核表达载体,转染入RPE-CHO细胞后可转录翻译为重组融合毒素蛋白,相对分子质量约为71×103,平均106个转染细胞24 h表达0.23 μg/L.活性测定显示真核载体所表达的B7-2-PE40KDEL可特异性地抑制高表达CD28的人T淋巴细胞系,而对CD28阴性的人白血病细胞系的抑制率较低.结论:真核载体表达的B7-2-PE40KDEL具有良好的靶向性免疫抑制活性,为进一步开展其体内特异性防治移植排斥反应及自身免疫性疾病奠定了基础.     

高海拔地区吲哒帕胺治疗原发性高血压疗效及安全性观察

目的：评价吲哒帕胺在高海拔地区对轻、中度高血压病人降压有效性及安全性。方法：采用随机对照方法,以依那普利作为对照,92例服吲哒帕胺2.5 mg,1次/d。96例服依那普利10-20 mg,2-3次/d。在治疗24、6、和8 w末测坐位收缩压和舒张压。治疗前及治疗后8 w末查血生化、电解质、血液流变学及心电图。结果：吲哒帕胺组治疗2、4、6和8 w血压较治疗前明显降低（P〈0.05-0.01）,8 w末总有效率为88.03%,与依那普利组间对比差异无显著性（P〉0.05）。吲哒帕胺组治疗前后血流变学无明显改变（P〉0.05）,其中有2例血钾下降和4例尿酸增高,余实验室检查无明显改变。结论：高海拔地区吲哒帕胺治疗轻、中度高血压与依那普利疗效相当,耐受性好,副作用少,对患者血液流变学无明显影响。     

吻合指背静脉断指再植成功一例

女,20岁。右拇指末节被机器压伤2小时入院。检查:拇指于甲根部完全离断,近端尺侧有动脉搏动。显微镜下见动脉壁有多处挫伤;近端指腹偏桡侧见一静脉,直径约0.8mm,有明显的静脉返流,远端指腹侧亦有一口径相近的静脉。若将尺侧     

大鼠视交叉上核内VIP、AVP及SOM样神经元的相互关系──免疫组化双重反应法研究

视交叉上核具有生物钟功能已为很多实验研究所证实，但其功能机制尚在探索之中。本实验采用双重免疫组织化学反应技术对大鼠视交叉上核内ＶＩＰ、ＡＶＰ及ＳＯＭ样三大神经元群之间的相互联系进行了观察．结果表明：（１）ＶＩＰ样扣结广泛分布于ＡＶＰ样神经元周围，数量最多、密度最大；而ＳＯＭ样扣结贴附于ＶＩＰ及ＡＶＰ样神经元的数量次之；（２）ＡＶＰ样扣结与ＶＩＰ样神经元之间，ＶＩＰ样扣结与ＳＯＭ样神经元之间也形成联系．上述发现为视交叉上核功能机制的研究提供了进一步的形态学依据．     

摘除双侧眼球对大鼠视交叉上核节律性的影响

成年Ｗｉｓｔａｒ雌鼠５７只，随机分为实验组３０只，行双眼摘除术。对照组２７只。术后４周将各组动物体重相近的每３只列为一个配伍组，分别在０９：００～１０：００、１７：００～１８：００、２３：００～２４：００三个时间处死。将含有视交叉上核的脑组织经固定、恒冷箱切片后，用免疫组化ＡＢＣ法染色显示视交叉上核内含ＶＩＰ或ＡＶＰ的神经元，微机图像分析仪上测量光镜下这两种神经元的相对切面面积及平均免疫反应强度。结果：（１）对照组不同时间处死的动物ＶＩＰ能神经元切面面积以２３：００～２４：００最大，０９：００～１０：００次之，１７：００～１８：００最小，呈昼夜节律变化，ＡＶＰ能神经元也以２３：００～２４：００最大，但在０９：００～１０：００和１７：００～１８：００间差异无显著性；（２）摘除双眼后各时间组间ＶＩＰ能神经元和ＡＶＰ能神经元切面面积均不再显示显著性差异。提示实验组动物视交叉上核的这两种神经元功能活动的昼夜节律已发生改变；（３）实验组和对照组动物的ＶＩＰ能神经元和ＡＶＰ能神经元平均免疫反应强度在所测的三个时间中，均未见明显差异。     

视网膜节细胞与视交叉上核AVP神经元联系的研究Ⅱ.假狂犬病毒顺行追踪与免疫荧光双重标记

为进一步揭示视网膜节细胞与视交叉上校精氨酸血管加压素神经元间有无直接的联系，本文将假狂犬病毒注入大鼠眼球内通过顺行追踪结合免疫荧光双重标记法观察到：（1）视交叉上核神经元被病毒感染的时间始于病毒注入后56h，并随存活时间的延长而增多；（2）呈绿色荧光的病毒感染神经元见于双侧视交叉上核，注射对侧优于同侧，主要位于视交叉上核的腹外侧部和嘴侧份，个别散在于二者之外;（3）视交叉上核内个别病毒感染的神经元可同时呈精氨酸血管加压素的红色荧光，此类双标神经元系病毒由视网膜节细胞顺行运输并跨突触传给视交叉上核的精氨酸血管加压素神经元所致。表明视网膜节细胞与视交叉上核的精氨酸血管加压素神经元间有直接的突触性联系。这一结果为视交叉上核节律机制和精氨酸血管加压素神经元的机能调控提供了进一步研究的线索。     

我国部分省份（地区）汉族人群HLA-I类基因多态性地区差异分析

目的探讨我国部分省份（地区）汉族人群HLA-I类经典基因座位HLA-A、HLA-B、HLA-Cw位点的群体遗传学特点及其基因频率分布的地区差异。方法选取1014例无关汉族拟行造血干细胞移植治疗患者及其健康家系供者的血液样本,提取基因组DNA后,采用序列特异性引物聚合酶链式反应（PCR-SSP）分型技术进行HLA-A、HLA-B、HLA-Cw位点基因分型,分析不同地区汉族人群及不同种族间的基因频率分布特征。基于文献报道的我国不同地区汉族人群及不同种族的HLA-I类基因频率资料,计算种群间遗传距离（D）,比较不同地区汉族人群及不同种族间遗传距离差异。结果Hard-Weinberg吻合度检验表明,本研究抽样群体适于进行遗传学统计分析。HLA-A位点共检测出14种基因型,最常见的是A^＊02（0.330）、A^＊11（0.240）、A^＊24（0.155）、A^＊33（0.075）;HLA-B位点共检测出27种基因型,最常见的是B^＊13（0.134）、B^＊15（0.143）、B^＊40（0.133）、B^＊46（0.102）;HLA-Cw位点共检测出13种基因型,最常见的是Cw^＊01（0.157）、Cw^＊03（0.247）、Cw^＊07（0.181）、Cw^＊08（0.106）。群体汉族与其他人种间HLA-A、HLA-B基因频率差异均有统计学意义（P〈0.05）;除兰州汉族人群仅同南方汉族、湖南、山东、江苏、台湾汉族人群间HLA-A、HLA-B基因频率差异有统计学意义（P〈0.05）外,其余各地区汉族人群间HLA-A、HLA-B基因频率差异均有统计学意义（P〈0.05）。各地区汉族人群间平均遗传距离D=0.164,辽宁和北方汉族人群间遗传距离（D=0.064）最小,江苏与湖南汉族人群间遗传距离（D=0.299）最大;不同地区汉族人群间遗传距离普遍小于种族间遗传距离。结论我国不同地区汉族人群HLA-I类基因频率分布存在显著差异,但其差异要明显小于世界不同人种间的分布差异。我国汉族人群所特有的HLA-I类基因频率分布格局资料对区域性疾?     

电针结合有氧运动对自然衰老大鼠骨骼肌IGF-I/Akt通路的作用

目的:探索低频电针结合有氧运动对增龄性骨骼肌萎缩的效应,以及IGF-I/Akt及其下游蛋白质合成相关通路信号蛋白的影响。方法:以自然衰老SD大鼠为研究对象,将6月龄雄性SD大鼠32只,体重400～450 g,饲养至大鼠12月龄,根据体重随机分为4组。对照组(YC,只抓取、固定、放回,不做其他干预),电针组(YA,电针干预),运动组(YE,运动干预),电针+运动组(YEA,电针结合运动干预),自SD大鼠12月龄开始持续干预至18月龄,实验结束时观察各组自然衰老大鼠:骨骼肌湿重/体重比;光学显微镜下比目鱼肌HE染色形态;Real-time qPCR法检测骨骼肌中IGF-I mRNA的表达水平;Western印迹法测定的大鼠腓肠肌中AKT、mTOR、p70S6K和p-p70S6K相关蛋白表达情况。结果:与YC组相比,YA组、YEA组皆明显增加18月龄大鼠腓肠肌湿重/体重比(P0.05);YEA组能明显增加比目鱼肌湿重/体重比,高于YC组和YA组(P0.05)。与YC组相比,各个干预组大鼠的腓肠肌IGF-I mRNA表达水平皆有上升趋势,其中YEA组IGF-I mRNA表达增加更为明显(P=0.051)。与YC组相比,电针组(YA)p-Akt,p-mTOR表达升高(P0.05),电针+运动组(YEA)p-Akt,p-mTOR,p-p70S6K表达也显示出升高趋势(P0.05)。结论:电针结合有氧运动可延缓18月龄自然衰老大鼠增龄性骨骼肌萎缩,其分子机制可能与通过激活IGF-I/Akt通路,促进蛋白合成有关。     

K562细胞中N-乙酰基转移酶10的RNA结合图谱分析

目的 对N-乙酰基转移酶10 (NAT10)在人慢性髓原白血病细胞系K562中的RNA结合图谱进行描绘。方法 利用紫外交联免疫沉淀技术(eCLIP)捕获NAT10在K562细胞中结合的转录本集合,对其进行高通量测序,并对数据进行生物信息学分析。通过peak-calling分析和对peaks进行注释,鉴定NAT10结合位点。并对所结合基因的类型和结合区域进行分析。进一步通过基因功能富集分析,探索其结合的RNA的功能。结果 NAT10主要结合于蛋白质编码基因的转录本,并在3′非翻译区域(3′UTR)富集,预测显示其结合的转录本与DNA损伤修复等功能相关。结论 NAT10可能通过与DNA损伤修复相关信使RNA(mRNA)的3′UTR区域结合,实现基因表达调控作用。     

医学新学科文献的归类

随着医学科学技术的发展,医学新学科、新理论、新设备、新方法的图书文献大量出版,如何使用《中图法》第四版将这些文献归于恰当类目中,以便正确地排架管理。现将一些专家教授对这方面文献分类方法和意见整理介绍如下: