Chk1与Chk2高表达对DADS阻滞人胃癌 BGC823细胞G2/M期的影响

目的：在建立Chk1/2基因高表达人胃癌BGC823细胞的基础上,探讨Chk1/2基因在二烯丙基二硫(DADS)诱导人胃癌BGC823细胞G2/M期阻滞中的作用。方法：采用流式细胞术检测DADS作用于Chk1/2高表达BGC823细胞周期分布情况。Western blot检测Chk1、p-Chk1、Chk2、p-Chk2、Cdc25C与Cyclin B1表达变化。结果：流式细胞术显示,Chk1高表达组G2/M期细胞较对照组与空载体组增加 (P＜0.05)。而15 mg·L-1 DADS处理后,各组G2/M期细胞较处理前增加,Chk1高表达组较空载体组差异有统计学意义(P＜0.05)。Chk2高表达组G2/M期细胞较对照组与空载体组差异无统计学意义 (P>0.05)。而DADS处理Chk2高表达组后,G2/M期细胞较对照组与空载体组差异有统计学意义 (P＜0.05)。Western blot显示,Chk1/2蛋白及p-Chk2表达水平不受DADS的影响,但p-Chk1呈时间依赖性上调(P<0.05)。DADS处理Chk1高表达BGC823细胞12、24、36、48 h后,Cdc25C磷酸酶与Cyclin B1表达较对照组呈时间依赖性下降 (P＜0.05)。结论：DADS阻滞人胃癌BGC823细胞G2/M期与激活Chk1/Cdc25C/Cyclin B1通路有关。Chk1高表达可增强DADS阻滞G2/M期细胞的作用,而Chk2高表达对DADS无影响。     

气囊助产对加速产程的作用

目的 探讨气囊助产与产程的关系。方法 对采用气囊助产的５０例初产妇的第一产程,第二产程时间与周期不采用助产分娩的５０例初次妇产程的临床资料进行回顾性比较。结果 ５０例采用气囊助产的初产妇中,平均第一产程为６ｈ６ｍｉｎ,平均第二产程为３７ｍｉｎ;５０例不采用助产的产妇中,平均第一产程为１１ｈ４５ｍｉｎ,平均第二产程为１ｈ１９ｍｉｎ;采用气囊助产组的产程明显低于对照组。结论 气囊助产可以明显缩短产程,     

顺铂腹腔化疗对卵巢癌模型鼠雌激素影响的实验研究

目的观察鼠卵巢癌模型在顺铂化疗前后雌激素水平的变化,评估顺铂腹腔化疗对卵巢功能的影响。方法取8周龄裸鼠36只,随机分为空白对照组(A组,n=8)、肿瘤细胞接种后不化疗组(B组,n=12)、肿瘤细胞接种后静脉化疗组(C组,n=8)、肿瘤细胞接种后腹腔化疗组(D组,n=8)。所有裸鼠均行一侧附件切除术,除A组外,术中向其余3组鼠腹腔内注射卵巢癌细胞悬液。于术后第9天对A组和B组裸鼠腹腔内注入生理盐水,C组裸鼠尾静脉注射顺铂(20μg/g)+腹腔内注射生理盐水,D组裸鼠腹腔内注射顺铂(20μg/g)。第1次化疗后第0、10、20天分别取鼠尾静脉血测量雌激素水平。化疗22d后重复第1次化疗方法1次。于第2次化疗后第10、20及30天分别取鼠尾静脉血测量雌激素水平。结果腹腔内接种肿瘤细胞后B、C及D组裸鼠雌激素水平明显高于A组(P＜0.05),A与B组的雌激素水平相对稳定,C和D组雌激素水平在化疗后显著降低,但C组高于D组(P＜0.05),随着化疗后时间延长,C与D组裸鼠雌激素水平逐渐下降至A组水平(P＞0.05)。结论 顺铂化疗会损伤卵巢功能,腹腔化疗对卵巢皮质的损伤可能大于静脉化疗,随着化疗间隙期的延长卵巢功能可以得到恢复。     

RORα拮抗剂T0901317通过RORα/β-catenin信号促进人胃癌MGC803细胞上皮间质转化

目的 探讨RORα拮抗剂T0901317通过RORα/β-catenin信号对促进人胃癌MGC803细胞上皮-间质转化(epithelial–mesenchymal transition, EMT)的影响。方法 MTT检测细胞增殖;细胞划痕和Transwell实验分别检测细胞迁移与侵袭。Western blot与免疫荧光检测RORα/β-catenin信号相关分子,免疫共沉淀检测RORα蛋白与β-catenin蛋白结合。结果 MTT检测显示,T0901317处理组较MGC803细胞增殖能力呈时间依赖性增加(P<0.05)。细胞划痕和Transwell实验显示,T0901317处理组细胞迁移与侵袭能力较MGC803细胞明显增强(P<0.05)。Western blot检测显示,T0901317处理后较未处理组RORα蛋白明显下调(P<0.05),并且可上调MGC803细胞β-catenin总蛋白与核内β-catenin(P<0.05)。T0901317处理后较对照组RORα蛋白与β-catenin蛋白结合分别明显减少(P<0.05)。T0901317处理的细...     

沉默LIMK1促进DADS抑制SW480细胞迁移与侵袭

目的探讨LIMK1沉默对DADS抑制SW480细胞迁移与侵袭的影响。方法 RNA干扰技术建立稳定LIMK1-miRNA/SW480细胞株;免疫组化和Western blot检测DADS对沉默LIMK1结肠癌SW480细胞LIMK1和磷酸化LIMK1蛋白表达的影响。划痕实验和侵袭实验检测LIMK1 RNA沉默与DADS对SW480细胞迁移与侵袭的影响。结果 RT-PCR与Western blot显示,LIMK1-miR/SW480细胞LIMK1mNRA与蛋白表达明显下调,表明成功构建稳定沉默LIMK1基因的SW480细胞株。免疫组化和Western blot显示,45 mg.L-1DADS处理和沉默LIMK1组较未转染组与空载体组SW480细胞LIMK1蛋白和磷酸化LIMK1明显下调(P<0.05)。划痕实验和侵袭实验发现,沉默LIMK1或DADS处理SW480细胞的迁移与侵袭能力较未转染组与空载体组明显抑制(P<0.05)。而DADS处理沉默组抑制SW480细胞迁移和侵袭能力更为明显(P<0.05)。结论沉默LIMK1基因可抑制SW480细胞迁移与侵袭,增强DADS抑制SW480细胞迁移与侵袭作用。     

喷雾干燥法制备灯盏花素含药微球的工艺研究

目的:研究灯盏花素给药微球的制备工艺。方法:以高分子材料明胶和阿拉伯胶的混合物作为囊材,以喷雾干燥法制备微球,用单因素考察法考察了影响微球质量的指标,并采用均匀设计优化了处方工艺。结果:根据优化条件所制得的灯盏花素微球形态良好,粒径较均匀,包封率为87.03%,载药量为20.99%。验证实验表明优化方法正确可靠。结论:所优化的制备工艺可用于灯盏花素给药微球的制备。     

宫颈癌细胞外泌体hsa_circ_0087432对人脐静脉内皮细胞增殖及迁移的影响

目的 分析环状RNA 0087432(hsa_circ_0087432)在宫颈癌患者血清外泌体中的表达,探讨其与宫颈癌转移可能存在的关系.方法 收集广州市番禺区中心医院2019年6月-2020年6月诊断为宫颈鳞癌且术前未行放化疗的30例患者的宫颈癌组织及血清作为实验组,另将30例未患宫颈癌的女性正常宫颈组织及血清作为对...     

7-二氟甲基金雀异黄素对H_2O_2诱导PC12细胞损伤的保护作用

目的:探讨7-二氟甲基金雀异黄素对PC12细胞氧化应激损伤的保护作用。方法:采用过氧化氢(H2O2)诱导PC12细胞氧化应激损伤的模型,MTT法检测细胞增殖活性,碘化丙啶(PI)染色流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡,多功能生化分析仪测定培养液上清中的乳酸脱氢酶(LDH)活性。结果:7-二氟甲基金雀异黄素能有效拮抗40.0μmol/L的H2O2孵育24h对PC12细胞增殖活性的抑制作用和对PC12细胞凋亡的诱导作用,并能减少40.0μmol/L的H2O2诱导的PC12细胞的LDH释放。结论:7-二氟甲基金雀异黄素对过氧化氢诱导PC12细胞的氧化应激损伤具有保护作用。     

LIMK1过表达通过LIMK1/cofilin1通路促进人胃癌MGC803细胞增殖与迁移侵袭

目的:探讨LIMK1过表达对人胃癌MGC803细胞增殖与迁移侵袭的影响.方法:真核表达载体转染技术构建过表达LIMK1基因MGC803细胞;RT-PCR和Western blot检测LIMK1、Cofilin1、p-Cofilin1表达;MTT、流式细胞术、细胞划痕和侵袭实验分别检测LIMK1过表达对MGC803细胞增...     

芦荟凝胶对大鼠多柔比星外渗性损伤的影响

背景与目的:芦荟对多种化疗药物外渗性损伤有良好的防护作用.本实验主要研究芦荟凝胶对大鼠多柔比星外渗性损伤的防治作用,初步探讨芦荟凝胶促进大鼠多柔比星外渗性损伤伤口愈合的机制.方法:建立SD大鼠多柔比星外渗性损伤动物模型,将30只SD大鼠采用自身对照法随机分组:对照组(生理盐水)、实验组(芦荟凝胶l g/L)和硫酸镁组(50%硫酸镁湿敷),测量各组大鼠外渗性损伤的面积,观察损伤程度;在治疗后第1、4、7、11、18天各组分别随机取2只大鼠,切除损伤组织,HE染色观察病理形态学改变.另取30只外渗性损伤模型大鼠随机分组,分组同上.于损伤后第5天切除外渗损伤部位的皮肤及皮下组织,间断缝合,术后第7天拆线,观察手术伤口I期愈合情况和愈合时间.用免疫组化法检测损伤部位的皮肤及皮下组织中的血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor.EGFR)的表达情况.结果:芦荟凝胶组和硫酸镁组的外渗性损伤面积及程度明显低于生理盐水组(P<0.01).对照组、芦荟凝胶组和硫酸镁组的手术伤口I期愈合率分别为20.0%、60.0%和66.7%.伤口愈合时间分别为(12.1±2.1)d、(9.6±1.6)d和(9.3±1.4)d,对照组与另外两组之间的差异均有统计学意义(P<0.01).免疫组化检测结果显示,芦荟凝胶组与生理盐水组比较,VEGF、EGFR的表达呈现上调.结论:芦荟凝胶对大鼠多柔比星外渗性损伤有良好的防治作用,其促进伤口愈合的机制可能与组织中VEGF、EGFR的表达上调有关.