猪囊尾蚴谷胱甘肽S-转移酶活性研究

目的 :探讨猪囊尾蚴头节及囊壁 GST活性。方法 :用 GST底物催化测定法检测成熟、未成熟猪囊尾蚴头节及囊壁匀浆的 GST活性。结果 :成熟猪囊尾蚴头节、囊壁 GST活性分别为 0 .2 2 65± 0 .0 2 81、0 .1 765± 0 .0 1 99,未成熟猪囊尾蚴头节、囊壁 GST活性分别为 0 .1 766± 0 .0 2 2 3、0 .1 758± 0 .0 2 1 4 ,成熟猪囊尾蚴头节与囊壁之间、未成熟猪囊尾蚴头节与囊壁之间、成熟与未成熟猪囊尾蚴之间 GST活性均无显著性差异( P>0 .0 5)。结论 :猪囊尾蚴头节及囊壁内存在相同的 GST活性 ,且 GST活性与猪囊尾蚴的成熟程度无关     

中国中部地区间日疟原虫分离株Duffy血型结合蛋白Ⅱ区的克隆表达与初步鉴定

目的克隆中国中部地区间日疟原虫分离株Duffy血型结合蛋白Ⅱ区基因(PvDBPⅡ),体外表达和鉴定重组PvDBPⅡ蛋白。方法PCR法从间日疟患者血液DNA样品中扩增PvDBPⅡ基因,将产物插入到原核表达载体pET28a(+)中,构建pET28a PvDBPⅡ重组表达质粒,转化大肠埃希菌(E.coli)BL21(DE3+),异丙基βD硫代吡喃半乳糖苷诱导表达带有His标签的重组蛋白,采用镍柱亲和层析纯化重组蛋白,相应表达物分别采用十二烷基磺酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳和Western blot进行分析鉴定。结果PCR扩增的PvDBPII基因为1.1 kb,重组pET28a PvDBPⅡ质粒经测序验证,其插入片段序列与GenBank参考序列相似性为99%,转化E.coli所表达的重组蛋白分子量约为44 kDa,且能被间日疟患者血清特异性识别。结论成功克隆了PvDBPⅡ基因,表达了重组PvDBPII蛋白,为进一步研究基于PvDBPⅡ的红内期间日疟疫苗奠定了基础。     

在校大学生蠕形螨感染的调查及治疗观察

目的探索大学生中蠕形螨的感染现状,并观察抗蚴灵(邻苯二甲酸二丁酯乳化液,简称OP乳化液)的治疗效果。方法采用透明胶纸带粘贴法检查面部的蠕形螨并统计其总感染率和男女之间的感染率,并对寄生部位及有面部皮肤疾病患者的带螨状况进行了研究。结果在校大学生的总感染率为33.28%(239/718),男性(43.53%)的感染率明显高于女性(25.18%)(χ2=26.83,P<0.005)。脸部以颊部感染率最高(69%),其次顺序为颏部(58%),前额(50%),鼻沟(50%)和鼻尖部(40%)。面部有皮肤病患者的感染率(80.64%)明显高于正常人群的感染率(26.66%)(χ2=17.89,P<0.005)。采用OP乳化液治疗感染者,其阴转率达92.72%,治疗有皮肤疾病患者的有效率为92.0%。结论在校大学生中蠕形螨的感染率较高,且男性多于女性。面部有皮肤病者螨的感染率更高,脸部以颊部的感染率最高。OP乳化液治疗蠕形螨病不仅疗效好,且安全、可靠。     

间日疟原虫抗原体外诱导间日疟患者PBMC凋亡的研究

目的分析间日疟原虫抗原(PvAg)诱导宿主外周血单个核细胞(PBMC)的凋亡水平方法采用流式细胞术结合应用膜联蛋白-V(Annexin-V),测定7例间日疟现症感染者PBMC经PvAg刺激后CD4+T细胞、CD8+T细胞及CD19+B细胞的凋亡率,并与空白对照组比较。结果经PvAg刺激后的间日疟现症感染者CD19+B细胞及CD4+T细胞凋亡率分别为7.26%和48.08%,与空白对照凋亡率4.08%和22.80%比较差异无统计学意义(P>0.05);CD8+T细胞凋亡率为55.16%,与对照凋亡率22.86%比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论 PvAg可诱导间日疟现症感染者CD8+T细胞凋亡,从而可能参与介导间日疟原虫发生免疫逃逸。     

结核分枝杆菌H37 Ra菌株ESAT6基因的克隆及序列分析

目的:从结核分枝杆菌H37Ra菌株克隆早期分泌性抗原靶6(ESAT6)基因并进行序列分析。方法:以结核分枝杆菌H37Ra菌株基因组DNA为模版,用PCR方法扩增ESAT6基因,将扩增产物连接到克隆载体pTG19-T中,并用PCR、单双酶切和测序进行鉴定,以BLAST软件进行序列比对分析。结果:从结核分枝杆菌H37Ra株成功克隆了ESAT6基因,测序表明该片段由288 bp组成,与GenBank所报告的H37Rv基因相比同源性为100%。结论:成功克隆了H37Ra株ESAT6编码基因,其序列与H37Rv标准株ESAT6编码基因完全一致。     

猪带绦虫孕节内虫卵数量的观察

目的：了解猪带绦虫成虫成熟孕节内虫卵数量。方法：对10条猪带绦虫的50片成熟孕节以胃蛋白酶法消化，收集虫卵，以细胞计数板进行计数。结果：猪带绦虫每节成熟孕节内虫卵数量不等，最少为550个，最多为172500个，平均为26891个。不同虫体间孕节内虫卵数的差异较同一虫体间的差异显著。结论：猪带绦虫成虫成熟孕节内虫卵数量不等，可有悬殊的差别。     

γ-干扰素(IFN-γ)在弓形虫感染中的作用

迄今的研究表明,IFN-γ是抗弓形虫保护力中起主导作用的细胞因子,其抗虫机理可能是影响了巨噬细胞利用氧依赖机制和氧非依赖机制。本文就目前IFN-γ抗虫的保护作用及其机理等研究作一综述。     

高浓度葡萄糖对人树突状细胞CD83、CD86、CD36、CCR7和μ-阿片受体的影响

目的:观察高浓度葡萄糖对人树突状细胞(DC)受体CD83、CD86、CD36、CCR7和μ-阿片受体(MOR)表达的影响,探讨高血糖在动脉粥样硬化免疫炎症反应中的作用。方法:从人外周血中提取和分离单个核细胞,在含重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子和重组人白介素-4的RPMI 1640完全培养基中培养。7 d后未成熟DC分3组,分别在含有D-葡萄糖5 mmol/L(NG组)、10 mmol/L(TG组)和25 mmol/L(HG组)的RPMI 1640完全培养基中继续培养48 h后,采用流式细胞术检测DC表面CD83、CD86、CD36、MOR和CCR7的变化。结果:TG组和HG组DC表面分子CD36、CCR7、CD83和CD86的阳性率均高于NG组(P0.05~P0.01),HG组DC表面分子MOR的阳性率高于NG组(P0.05),而HG组CD36、CD83和CD86的阳性率亦均明显高于TG组(P0.01)。结论:高浓度葡萄糖能促进DC表面分子CD36、CD86、CD83和CCR7的表达。     

猪带绦虫六钩蚴TSO45-4B抗原FnⅢ结构域相应的线性B细胞表位肽免疫原性研究

目的:观察载体蛋白偶联的TSO45-4B抗原FnⅢ结构域相应的线性B细胞表位肽诱导的体液免疫反应。方法:人工合成TSO45-4B抗原FnⅢ结构域2条预测表位肽,偶联钥孔血蓝蛋白免疫小鼠,采用ELISA法检测小鼠血清中预测表位肽特异性抗体滴度。结果:免疫小鼠血清中检测到1条预测表位肽特异性抗体,其效价达到1∶1 280。结论:设计的1条TSO45-4B抗原FnⅢ结构域线性B细胞表位肽可诱导小鼠产生体液免疫反应。     

结核分枝杆菌H37Ra株CFP10基因的克隆与序列分析

目的：克隆结核分枝杆菌减毒株H37Ra培养滤液蛋白10（CFP10）基因,并对其进行序列分析。方法：自结核菌H37Ra株抽提基因组DNA为模板,以已知结核菌H37Ra株CFPIO基因设计引物。通过聚合酶链反应（PCR）技术扩增出结核分枝杆菌H37Ra株CFP10基因,将其克隆至pTG19-T载体后,经PCR和双酶切鉴定后进行DNA序列测定,并以BLAST在线软件进行序列比对分析。结果：PCR产物电泳显示扩增片段约为300bp,测序获得的片段开放编码框由303bp组成,与H37Rv株CFP10基因同源性为100％,推导出编码氨基酸序列同源性为100％。结论：成功克隆结核分枝杆菌H37Ra株CFP10基因,其基因序列与H37Rv株CFPIO基因序列无差异。