人类单核苷酸多态性及其应用

单核苷酸多态性 (single nucleotide polymorphisms,SNPs)是基因组变异中最多的一种 ,其最低的等位基因频率需大于或等于 1% ,因而不同于其他罕见变异。遗传学研究的很大范围将受益于 SNPs的研究和使用。近来 ,对 SNPs的兴趣和基于 SNPs的工作有如下方面 :1大规模的基因组分析和相关技术 ;2生物信息学和计算机 ;3简单疾病和复杂疾病的遗传学分析 ;4以及群体遗传学。预计在以后的几年里将产生的成千上万的 SNPs将推动这些领域的迅速前进。本文就单核苷酸多态性的概念、人类基因组中的单核苷酸多态性的搜索方法、定位、基于单核苷酸多态性的基因分型 (genotyping)方法以及单核苷酸多态性的应用进行了综述。     

利用PCR，FISH对异常核型中额外染色体的证实

目的：检测在常规G显带下，45，X［115］/46，X+mar［45］/46，XY［29］异常核型中额外小染色体的来源。方法：利用PCR对SRY基因进行检测；对人的Y染色体进行标记，利用荧光原位杂交技术，在荧光显微镜下观察。结果：用Y染色体杂交，发现在额外小染色体上有荧光信号。结论：额外小染色体来源于Y染色体。     

硅纳米颗粒的生物毒理学研究

目的：研究硅颗粒制成纳米颗粒后的长期毒性及生殖毒性。方法：将硅纳米颗粒经尾静脉注入小白鼠体内，收集尿液离心后，电镜下观察是否有纳米颗粒的存在，并将小白鼠雌雄合笼交配产生后代，观察其产仔率，同时在电镜下观察纳米颗粒在亲代鼠各脏器中的分布。结果：硅纳米颗粒进入小鼠体内后，分布于小鼠各脏器，并能经肾脏排泄，同时注入纳米颗粒的小鼠能正常的繁殖后代。结论：硅纳米颗粒没有毒性并能在体内使用。     

盖膜基因与耳聋

盖膜是耳蜗的 Corti器表面的细胞外基质成分 ,在早期的耳聋研究中它是一个被忽略的因素 ,但是许多的研究发现盖膜的组成成分盖膜蛋白、 型胶原、 型胶原、Otogelin糖蛋白与综合征型耳聋和非综合征型耳聋都有关系。本文就盖膜基因的克隆、结构、功能、表达和致病情况作一综述     

一个表皮松解性掌跖角化病家系的KRT9基因突变分析

目的明确一个伴随有类似关节指垫样病损和指甲病变的表皮松解性掌跖角化病的中国家系中角蛋白9(keratin9,KRT9)基因突变情况。方法用聚合酶链反应技术扩增家系成员及家系外50名正常人KRT9基因的编码区及外显子与内含子交界处,DNA序列分析寻找突变位点,然后经限制性内切酶Dde分析验证。结果患者KRT9基因第1外显子第160位密码子发生AAT→AGT的突变(N160S),而家系正常成员及家系外50个正常人中均不存在此突变。结论KRT9基因的第1外显子第160位密码子发生AAT→AGT突变(N160S)导致该家系患者发生表皮松解性掌跖角化病。     

一个新的蛋白激酶基因DYRK3的克隆及其特征分析

目的分离一个与人的蛋白激酶ＤＹＲＫ２高度同源新的蛋白激酶的全长ｃＤＮＡ，并推测其分类和功能。方法应用与人的蛋白激酶ＤＹＲＫ２高度同源的３′端部分ｃＤＮＡ序列为探针，筛选ｃＤＮＡ文库和ｇＤＮＡ文库，并进行氨基酸序列同源性分析和ＦＩＳＨ定位。结果从人的骨骼肌ｃＤＮＡ文库和睾丸ｃＤ－ＮＡ文库各分离到一个新的蛋白激酶的全长ｃＤＮＡ。骨骼肌来源的ｃＤＮＡ编码５８８个氨基酸的蛋白质，睾丸来源的ｃＤＮＡ编码５６８个氨基酸的蛋白质，前者第２７个氨基酸以后的序列与后者第７个氨基酸以后的序列完全一致。结论推测这两个ｃＤＮＡ是同一基因在骨骼肌组织和睾丸组织中的不同剪接本。由于该基因与人的ＤＹＲＫ２高度同源，故称之为ＤＹＲＫ３基因。ＤＹＲＫ３与丝氨酸／苏氨酸蛋白激酶酵母Ｙａｋ１，人和果蝇的Ｍｎｂ，人的Ｃｌｋ１等有较高的同源性，也与人的Ｃｄｋ２等其它丝氨酸／苏氨酸激酶有同源性。作者认为ＤＹＲＫ３是属于丝氨酸／苏氨酸蛋白激酶ＣＭＧＣ组Ｃｌｋ家族新的一员。该基因定位在１ｑ３２。     

14例非缺失型假性肥大型肌营养不良患者的分子鉴定

目的 对非缺失型假性肥大型肌营养不良(Duchenne/Becker muscular dystrophy,DMD/BMD)患者及其家族成员进行基因诊断,以提供准确的遗传咨询和产前诊断.方法 应用变性高效液相色谱技术(denaturing high performance liquid chromatography,DHPLC)对14例DMD患者的DMD基因79个外显子及5'-非翻译区和3'-非翻译区部分片段(共86个片段)进行检测,对检测到异源双峰的PCR产物进行测序.结果 14例患者中共检出7种致病点突变(其中2种末见报道),14种已报道的多态改变和7种未报道的序列变异;其中5例患者的母亲为致病基因携带者.结论 DHPLC技术可以对非缺失型DMD患者进行有效的基因诊断,并对家族女性成员进行携带者检测.     

人体细胞遗传学技术的推广和应用

细胞遗传学研究的主要对象是染色体,染色体是基因的载体,染色体异常所致的疾病称为染色体病。 1972年,夏家辉就在国内最先引进和改良了瑞典科学家 Caspersson 1970年发现的人类染色体显带技术,并于1974年最先提出了中国人G显带染色体模式图,在国内最先开设了染色体病遗传咨询门诊。     

非综合征型感音神经性聋相关基因研究进展

听力损失是最常见的感觉障碍，国外报道新生儿重度聋发病率大约0．8％0—1％。在我国新生儿耳聋发病率约为1‰～3‰。在发达国家中，超过50％的学语前聋病例都主要与遗传有关旧0。遗传性聋中，约70％为非综合征型聋（nonsyndromie heating loss，NSHL），其余约30％为综合征型。学语前NSHL中，以常染色体隐性遗传方式遗传者占80％（其相关位点命名为DFNB），常染色体显性遗传方式遗传者占15％（命名为DFNA），X连锁遗传的占3～5％（命名为DFN），线粒体遗传的占不到1％。目前仍没有关于学语后聋的流行病学数据，不过，一般看来，常染色体显性遗传的语后性NSHI。比学语前NSHL发病牢要高。     

酵母双杂交技术分析耳聋基因功能的实验研究

目的在耳聋基因功能的蛋白质相互作用研究领域建立酵母双杂交实验技术，探讨第三代酵母双杂交系统在该领域的应用价值。方法利用第三代MATCHMAKER GALA酵母双杂交系统，以最常见的耳聋基因GJB2(Cx26)为诱饵，以人胎脑cDNA文库为猎物，钓取Cx26的相互作用蛋白质的阳性克隆，DNA测序阳性克隆并行生物信息学分析。结果从胎脑文库筛选到Cx26互作蛋白的56个阳性克隆，对其中26个克隆分析认定为11个独立克隆，DNA测序发现3个克隆是已克隆基因，8个克隆是新基因序列。结论第三代MATCHMAKER GALA酵母双杂交系统是筛选Cx26相互作用蛋白质的一个可靠的实验手段，酵母双杂交技术可用于耳聋基因的蛋白质功能研究领域。