EXT1基因1633-26(C→A)突变可能致多发性外生性骨疣

目的研究1例散发多发性外生性骨疣患者的基因突变情况，确定其致病基因。方法采用聚合酶链反应结合DNA直接测序法检测EXT1以及EXT2基因的突变热点区域；并应用错配引物PCR扩增引入酶切位点结合限制性片段长度多态性方法检测和鉴定突变。结果经测序证实在患者EXT1基因的第7内含子3’剪接位点上游26bp处发现一杂合突变，此杂合突变不存在于其表型正常的父母双亲中，是一个新生突变；错配引物扩增与限制性片段长度多态性分析结果表明在150名家系外正常对照者中没有此突变。结论EXT1基因1633-26（C→A）突变可能是导致这个患者发生多发性外生性骨疣的致病突变。     

皮肤成纤维细胞体外培养的安全性实验研究

目的：对所建立的人皮肤成纤维细胞系进行安全性检测。方法：对人皮肤成纤维细胞进行形态学观察、染色体核型分析、软琼脂试验、裸鼠致瘤试验、内毒素试验、支原体检测、病毒因子检测、细菌、真菌检测、异常毒性试验。结果：结果均为阴性。结论：所获取的皮肤成纤维细胞可作为一种安全、可靠的靶细胞用于基因治疗研究。     

脑胶质瘤及其颅内病变P16基因失活方式的研究

脑胶质瘤及其颅内病变Ｐ１６基因失活方式的研究何正文夏家辉曹亚刘运生袁贤瑞方加胜曹美鸿已有的研究认为，Ｐ１６基因失活方式主要是纯合缺失，而点突变比较罕见［１］。这与原有的抑癌基因Ｐ５３、Ｒｂ等的失活方式主要是点突变明显不同。这种不同究竟是Ｐ１６基因的一...     

异种移植供体猪α-1,3GT基因打靶引导序列获得及其染色体定位

目的 :为阻止异种抗原靶分子的生成 ,抑制或减轻HAR发生 ,试图对异种抗原的合成酶α - 1,3GT基因进行打靶灭活 ,以产生α - 1,3GT表型缺乏且具有抗HAR反应能力的异种供体 (猪 )。方法 :以α - 1,3GT基因的cDNA片段为探针 ,采用噬菌斑原位杂交结合PCR技术筛选猪gDNA文库 ,经酶切、Southern杂交、测序鉴定所得片段 ,并采用荧光原位杂交定位。结果 :获 7个片段 ,均在 8kb以上 ,且包含第三内含子 ,其中 3个片段测序证实包括第三、第四外显子 ;荧光原位杂交证实该基因位于猪染色体 1q2 .10～q2 .11。结论 :研究表明所得片段可作为该基因打靶引导序列 ,染色体定位明确了基因打靶位点 ,PCR技术可以用于快速筛选 gDNA文库     

Identification of mutation in a candidate gene for hereditary multiple exostoses type Ⅱ

Ｈｅｒｅｄｉｔａｒｙｍｕｌｔｉｐｌｅｅｘｏｓｔｏｓｅｓｉｓａｎａｕｔｏｓｏｍａｌｄｏｍｉｎａｎｔｄｉｓｏｒｄｅｒｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚｅｄｂｙｍｕｌｔｉｐｌｅｂｏｎｙｏｕｔｇｒｏｗｔｈｔｈｒｏｕｇｈｔｈｅｓｋｅｌｅｔａｌｓｙｓｔｅｍ,ｐｒｉｍａｒｉｌ...     

荧光多重PCR对α地中海贫血的基因诊断

目的：建立一种快速、灵敏的α地中海贫血诊断方法。方法：应用荧光引物对正常人和患者进行多重PCR，同时扩增α1和α2珠蛋白基因和内对照β肌动蛋白(α—actin)，用Perkin E1mer ABI PBISM^TM 377 DNA Sequencer自动分析结果，并对所得救据进行统计。用连锁分析的方法PCR扩增同一批模板α2珠蛋白基因上游的(CA)n，跑变性胶并将结果与前一种方法对照。结果：荧光多重PCR自动分析和扩增(CA)n连锁分析得出的结论与实际情况完全相符，结果判断容易。结论：荧光多重PCR法灵敏、简便，单管内就能完成，适合运用于α地中海贫血的快速诊断，并有可能运用于移植前诊断和母体外周血分离胎儿有核红细胞产前诊断。     

前列腺癌EGF－R表达的临床意义

前列腺癌ＥＧＦ－Ｒ表达的临床意义湖南医科大学附属湘雅医院泌尿外科（４１０００８）谢晋良，张时纯，申鹏飞，齐范湖南医科大学医学遗传学国家重点实验室（４１００７８）夏家辉，潘乾为探讨表皮生长因子受体（ＥＧＦ－Ｒ）与前列腺癌的关系，采用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹...     

家族性染色体断裂易位热点

染色体结构畸变起源于染色体的断裂和变位重接。文献中尚未见到关于结构畸变染色体在上下代的遗传传递中与其他非同源染色体再次发生结构性重排的报道。我室曾发现一例核型为46,XY,-13, der(13),t(4;13),(13pter→13q34∶∶4q25→4q ter)(图1)的4q 部分三体型患儿(血273号),其父亲(血274号)、伯父(血456号)均为1/4染色体平衡易位携带者,核型为46,XY,t(1;4)(1p ter→1q43∶∶4q25→4q ter;4p ter→4q25∶∶1q43→1qt er)