EXT2基因IVS2+1G>A突变致遗传性多发性外生性骨疣

目的　确定一个遗传性外生性骨疣家系的致病基因。方法　应用基因组扫描方法 ,利用 8、11和 19号染色体上的微卫星标记对该家系进行连锁分析 ,确定候选基因 ,然后对候选基因的编码区及外显子与内含子交界处进行测序分析寻找突变 ,并行逆转录 - PCR扩增 m RNA加以证实。结果　该家系致病基因被定位在 11号染色体的 EXT2基因区 ,在 EXT2基因中检测到 1个 IVS2 1G>A(5 36 1G>A)突变 ,该突变与疾病共分离。逆转录 - PCR证实 ,该突变导致编码区的第 316～ 5 36位共 2 2 1个碱基的缺失 ,使 10 6位密码子至 178位密码子及紧随的两个核苷酸的缺失 ,造成移码 ,形成 12 5个氨基酸的截短蛋白。结论　EXT2基因的 IVS2 1G>A突变是导致这个家系发生外生性骨疣的原因。     

伴有脑干听觉诱发电位异常的腓骨肌萎缩症发现连接蛋白32基因新突变

目的：报告一个脑干听觉诱发电位有异常改变的腓骨肌萎缩症（Charcot-Marie-Tooth disease,CMT）家系，并探讨与连接蛋白32(connexin32，Cx32)基因突变的关系。方法：对整个家系进行临床检查，对先证者进行肌电图及脑干听觉诱发电位检查，并应用聚合酶链式反应-单链构象多态（polymerase chain reaction -single strand conformation polymouphism，PCR-SSCP）技术结合DNA序列分析方法检测了先证者、家系内8人及家系外50名无血缘关系的正常人。结果：先证者肌电图检查示神经传导速度明显减慢，脑干听觉诱发电位示中枢传导延长，该家系中先证者及另3人均出现异常SSCP条带，经测序证实为392T→C(Leu131Pro)突变。结论：Leu131Pro是未报道过的突变，腓骨肌萎缩症患者可以出现脑干听觉诿发电位异常。     

1168例遗传咨询门诊病人的染色体分析

我室从1973年4月25日至1982年5月27日在遗传咨询病人中选择1200人作了染色体检查,有1168人获得了成功,占受检病人的97.3%。所用的标本有外周血、胎儿羊水、皮肤、条索状性腺、睾丸、精索等活检组织块。按我室常规进行细胞培养及 G 显带处理,必要时采用 C 带、Q 带、N 带、姊妹染色单体互换(SCE)技术、X 染色体迟复制(Lx)技术、G_(11)技术、高分辨 G 显带染色体技术以及 X、Y 小体检查技术等。     

转化生长因子β2真核表达载体pcDNA3.1(+)/TGF-β2的构建及其在骨髓基质细胞的表达

目的：构建人转化生长因子β2的真核表达载体pcDNA3.1( )/TGF-β2,检测其转染骨髓基质细胞后的表达。方法：用PCR方法从人胎盘cDNA文库DNA中扩增TGF-β2全长cDNA,该基因片段两端设计了Nhe I和Xho I限制性酶切位点。将所得片段连接到T载体上测序证实。利用重组DNA技术将TGF-β2的cDNA构建到真核表达载体pcDNA3.1( )上,酶切鉴定。通过脂质体介导的转染技术,将所构建的载体导入从骨髓中分离培养的基质细胞中,体外单层培养。分别于转染后24h和4周利用RT-PCR和Western-Blotting方法检测目的基因的表达情况。结果：经琼脂糖凝胶电泳及测序证实,PCR获得的片段与GenBank中登记的TGF-β2 cDNA序列完全相同。pcDNA3.1( )/TGF-β2酶切片段的长度与理论大小相符。转染后不同时期的骨髓基质细胞在mRNA和蛋白质水平均可检测到TGF-β2的表达。结论：pcDNA3.1( )/TGF-β2真核表达载体构建成功,在骨髓基质细胞内可获得短暂和长期表达。     

早老素在Alzheimer病中的致病机制

早老素基因是家族性Alzheimer病的致病基因 ,但其致病机制并不清楚。最近的研究显示 ,早老素是通过调节APP和Notch受体的裂解 ,增加细胞对凋亡的易感性而致病的。这些研究进展对于揭示Alzheimer病的发病机制提供了有价值的新观点。以下就这方面的研究进展加以综述