染色体单体型分析及突变检测在Wilson病临床诊断中的应用

目的建立染色体单体型分析法与突变检测相结合的Ｗｉｌｓｏｎ病（Ｗｉｌｓｏｎ＇ｓｄｉｓｅａｓｅ,ＷＤ）的基因诊断方法。方法以８个汉族ＷＤ家系为对象,用Ｄ１３Ｓ３１６、Ｄ１３Ｓ１３３和Ｄ１３Ｓ３１４３个［ＣＡ］ｎ重复遗传标记构建染色体单体型,进行ＷＤ家系内的诊断研究;对先证者的致病突变已明确的５个家系,同时用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ检测法检测突变以完善诊断。结果找到了１例无症状期ＷＤ患者,５例杂合子。结论通过分析Ｄ１３Ｓ３１６、Ｄ１３Ｓ１３３、Ｄ１３Ｓ３１４构成的染色体单体型,基本可为先证者同胞兄妹明确诊断;对致病突变已确定的家系,突变检测能为诊断提供直接而肯定的依据。两种方法的联合使用可为诊断提供更多的依据     

遗传性脊髓小脑型共济失调的CAG三核苷酸突变检测

目的 评价ＳＣＡ１、ＳＣＡ２、ＳＣＡ３／ＭｊＤ、ＳＣＡ６、ＳＣＡ７和ＤＲＰＬＡ的ＣＡＧ三核苷酸异常扩增突变「（ＣＡＧ）ｎ」,在中国人遗传性脊髓小脑型共济失调（ｓｐｉｎｏｃｅｒｅｂｅｌｌａｒ ａｔａｘｉａ,ＳＣＡ）患者的分布频率。方法 经聚合酶链反应、变性聚丙烯酰按凝胶电泳和银染显带技术,检测分析了８５个中国人常染色体显性遗传ＳＣＡ家系（其中患者１６７例）和３７例散发ＳＣＡ患者的ＳＣＡ１、ＳＣＡ２、     

介绍一种同时显示G-11染色和SCD的新方法

为了对人类第9号染色体进行 SCE 分析,我们参照 Bobrow 等、Gagne 等的 Giemsa-11染色方法和 Alvec(3)的碱性溶液直接姊妹染色单体差别染色 Sister Chromatid Differentiation,SCD),摸索建立了同时显示 G—11染色和 SCD 的新方法,现介绍于下。一、细胞培养和染色体标本制备 经肝素抗凝的外周血0.3ml 接种于5ml 培养基内(含 RPMI16404ml、小牛血清1ml、广州产 PHA 400μg、青霉素、链霉素各500国际单位),置37℃培养24～26小时,加入BrdU(最终浓度10μg/ml)避光继续培养44～46小时,培养终止前2小时加入秋水仙素(最终浓度0.8     

基于人类遗传资源收集、保藏及生物信息学技术的遗传病致病基因定位与克隆

Mappingandidentificationofdiseaseassociatedgeneswilldemonstratethegeneticbasisforthehumangeneticdisorders,andprovidethefundamentaldataforelucidationofpathogenesismechanismofthedisorders.Geneticre sources,includingpedigreeinformation,bloodsample,andtissues,etc.,areessentialmaterialsforfindingofthelinkedlocusandgeneforcertaingeneticdisease.Genomewidescanning,positionalcloningandcandidateap proacharemostwidelyusedmethodsorstrategy,bywhich,thousandsofdiseasesresponsiblegeneshavebeeni dentified.Nat…     

弥漫性掌跖角化病家系角蛋白9基因突变热点区的检测

目的：确定一个弥漫性掌跖角化病家系的致病基因。方法：收集一个弥漫性掌跖角化病家系7人（3名患者,4名正常人）和家系外10位正常人的血样,抽提基因组DNA,然后对角蛋白9基因的突变热点区进行PCR扩增,测序分析PCR产物。结果：该家系中3例患者的角蛋白9基因编码区第485位碱基发生G→A的突变,导致第162位的精氨酸被谷氨酰胺取代（R162Q）,而4位家系内正常人和家系外10位正常人未发现此突变。结论：角蛋白9基因的G485A突变是导致该家系发生弥漫性掌跖角化病的原因。     

皮肤成纤维细胞体外培养的安全性实验研究

目的：对所建立的人皮肤成纤维细胞系进行安全性检测。方法：对人皮肤成纤维细胞进行形态学观察、染色体核型分析、软琼脂试验、裸鼠致瘤试验、内毒素试验、支原体检测、病毒因子检测、细菌、真菌检测、异常毒性试验。结果：结果均为阴性。结论：所获取的皮肤成纤维细胞可作为一种安全、可靠的靶细胞用于基因治疗研究。     

Identification of mutation in a candidate gene for hereditary multiple exostoses type Ⅱ

Ｈｅｒｅｄｉｔａｒｙｍｕｌｔｉｐｌｅｅｘｏｓｔｏｓｅｓｉｓａｎａｕｔｏｓｏｍａｌｄｏｍｉｎａｎｔｄｉｓｏｒｄｅｒｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚｅｄｂｙｍｕｌｔｉｐｌｅｂｏｎｙｏｕｔｇｒｏｗｔｈｔｈｒｏｕｇｈｔｈｅｓｋｅｌｅｔａｌｓｙｓｔｅｍ,ｐｒｉｍａｒｉｌ...     

脑胶质瘤及其颅内病变P16基因失活方式的研究

脑胶质瘤及其颅内病变Ｐ１６基因失活方式的研究何正文夏家辉曹亚刘运生袁贤瑞方加胜曹美鸿已有的研究认为，Ｐ１６基因失活方式主要是纯合缺失，而点突变比较罕见［１］。这与原有的抑癌基因Ｐ５３、Ｒｂ等的失活方式主要是点突变明显不同。这种不同究竟是Ｐ１６基因的一...