应用LAB-ELISA法检测血清HBsAg的评价

生物素-抗生物素系统(BAS)是自然界中存在较广泛的-种生物亲和体系,将其引入酶免疫试验中,能使方法的敏感性及特异性均有所提高。我室自1986年起将其引入血清HBsAg检测,建立标记抗生物素-生物素ELISA(LABELISA),并将这一方法与国内新近推出的几种ELA方法进行了比较,现报道如下。     

HBc-HLA-A*1101-β2m复合物单体及其四聚体的制备和鉴定

目的制备HBc-HLA-A ＊ 1101-β2m复合物单体和四聚体,并对其特异性进行了鉴定。方法原核高效表达的HLA-A ＊ 1101-BSP和β2m蛋白,在抗原肽（乙型肝炎病毒的核心蛋白HBc88-96）的存在下,体外复性折叠成可溶性的HLA-A ＊ 1101抗原肽复合物单体,经BirA酶作用并通过凝胶过滤层析法纯化复合物单体;然后将此复合物单体与藻红蛋白标记的链霉亲和素按一定比例耦合构建成四聚体;最后用流式细胞仪检测分析该四聚体结合特异性CTL的能力。结果Western blot和Dot-ELISA检测显示所制备的HLA-A ＊ 1101抗原肽复合物单体具有天然构象,且可被生物素化;流式细胞仪分析显示所制备的四聚体可与HLA-A11^＋供者的抗原特异性CTL结合。结论成功制备了具有完整构象的生物素化HLA-A ＊ 1101抗原肽复合物单体;此四聚体可以特异检测抗原特异性的细胞毒性T细胞。     

胶固素ELISA检测流行性出血热循环免疫复合物

以牛胶固素建立固相酶联免疫吸咐试验用于检测循环免疫复合物（ＣＩＣ）。对２２８份流行性出血热、４０份慢性肝炎及３０份自身免疫性疾病患者血清标本进行检测，ＣＩＣ检出率分别为８０．２６％、８０．００％及８６．６６％，其相对平均含量分别为２１．４５±５．５６ｍｇ／Ｌ、３８．６６±７．２１ｍｇ／Ｌ及１５．９８±４．３４ｍｇ／Ｌ。胶固素用于检测ＣＩＣ不受ＤＮＡ、内毒素及肝素等影响，试验方法简便、敏感是其优点。     

旋毛虫感染性童虫全抗原制备及三种血清抗体检测方法比较

<正> 有关旋毛虫(Trichinalla Spiralis)抗原组成分析,单克隆抗体制备,不同虫期抗原成份的差异及其在虫体内分布,近年来已有不少研究。但旋毛虫病的血清学诊断国内多采用血凝、对流电泳及环蚴试验等方法。我室根据硝酸纤维素膜(NC)对蛋白质及核酸等具有很强吸附作用的特点建立了旋毛虫抗     

肝癌新标志物人宫颈癌基因的克隆、原核表达及多克隆抗体的制备

目的构建表达截短型人宫颈癌基因(HCCR)-1蛋白的质粒,并进行原核表达、多克隆抗体制备。方法用逆转录聚合酶链反应法从HepG2细胞中扩增HCCR-1_(167-360) cDNA,将其克隆到原核表达载体pRSET-B上,在大肠杆菌BL21(DE3)pLysS内进行诱导表达。用纯化的重组蛋白免疫BALB／c小鼠制备多克隆抗体,并采用酶联免疫吸附试验、Western blot及免疫组织化学检测抗体的灵敏度和特异性。结果成功地构建了表达HCCR-1(167-360)蛋白的质粒,原核表达后纯化得到了分子量约为2.70×10~4的目的蛋白,用之免疫BALB／c小鼠获得了高效价的特异性多克降抗体。结论所获得的重组HCCR-1_(167-360)蛋白纯度高,免疫原性强。获得的抗HCCR-1_(167-360)多克隆抗体有较高的效价和较好的特异性,为HCCR的临床检测和研究奠定了基础。     

INF—a对血清Th细胞发育相关白细胞介素含量影响的动态观察

目的观察慢性丙型肝炎患者在干扰素抗病毒治疗时，对白细胞介素含量的影响。方法对28例以IFN－a作抗病毒治疗的丙肝患者，采用ELISA法进行血清IL－2、IL－4及IL－12检测。结果三者在治疗前的含量分别为14.06±12.63pg／m1、57.89±61.78pg／m1和230.55±420.56pg／m1。治疗结束(第24周)时IL－2测值不变，IL－4测值下降至30.41±40.73pg／m1，IL－12上升至57.89±61.78pg／m1。随访时(第48周)三者恢复至抗病毒治疗前水平。结论采用外源性IFN－a进行抗病毒治疗时，慢性丙型肝炎患者血清IL－4及IL－12等与T淋巴细胞分化发育相关的细胞因子的含量出现一过性改变，这种变化是外源性IFN调节体内T淋巴细胞分化发育的证据之一。     

慢性乙型肝病炎人外周血T细胞亚群及血清因子的初步研究

目前,多数学者认为乙型肝炎的发病与机体的免疫应答及免疫调节功能紊乱有关。免疫自稳状态主要取决于调节性T细胞亚群之间的平衡。近年发展起来的抗人T细胞表面抗原的单克隆抗体为研究乙型肝炎病人的免疫调节状态提供了快速简便的途径。许多学者研究了慢性乙型肝炎病人外周血T细胞亚群,但结果并不一致。本文应用SACI-Ig花环     

近期ALT升高史单采浆供者乙型肝炎和丙型肝炎病毒感染现状的调查

对一组一年内一次以上ALT升高史的单采浆供者血清中多项乙肝与丙肝病毒感染标志进行了检查,并与本地区无ALT升高史供浆者进行比较。两组检测结果分别为抗HCV:14.03%和6.45%;抗HCV-IgM:3/8和2/13;HBsAg:2.82%和0.46%;抗HBs:32.39%和25.35%;抗HBc:45.07%和33.18%;其检出率前者均高于或显著高于后者,并与ALT升高次数有显著的伴随关系。     

丙型肝炎病毒家庭内感染状况的血清学调查

对６０例抗－ＨＣＶ阳性患者的家庭成员１２４人进行血清学检测，并收集４０例乙肝患者的家庭成员８３人为对照．结果丙肝组检出抗－ＨＣＶ阳性的家庭成员９人，检出率７．３％．除去有供血史的抗－ＨＣＶ阳性家庭成员，检出率为１．８５％（２／１０８）．乙肝组未检出抗－ＨＣＶ阳性者．在单一丙肝家庭组中，家庭成员的ＨＢＶ感染率为２５．３３％，而在ＨＢＶ／ＨＣＶ重叠感染和ＨＢＶ感染组的家庭成员中，ＨＢＶ的感染率为４０．９１％，故提示，ＨＣＶ的家庭内聚集性感染的危险性远低于ＨＢＶ，且母于垂直传插的危险性更低于夫妻间水平传播．