尾加压素II对大鼠损伤血管基质金属蛋白酶的影响

目的 观察外源性尾加压素 II（UII）及其拮抗剂 Urantide 对大鼠胸主动脉球囊拉伤模型损伤动脉基质金属蛋白酶-1（MMP-1）、MMP-2 和组织基质金属蛋白酶抑制剂-2（TIMP-2）的影响。 方法 构建大鼠胸主动脉球囊拉伤模型,分为 4 组：假拉伤组、单纯拉伤组、拉伤术后持续皮下给予 UII （1 nmol&#8226;kg-1&#8226;h-1）的 UII 组、拉伤术后持续皮下给予 Urantide（10 nmol&#8226;kg-1&#8226;h-1）的 Urantide 组。21 d 后,采用 RT-PCR 方法检测各组 UII 受体 G 蛋白偶联受体-14（GPR-14）的表达,免疫组化和明胶酶谱法检测 MMP-1、MMP-2、TIMP-2 的表达水平与活性。 结果 ①单纯拉伤组血管 GPR-14 mRNA 相对表达量（0.66 ± 0.09）明显高于假拉伤组（0.42 ± 0.06）,为其 1.6 倍（P < 0.05）;②与单纯拉伤组相比,UII 组 GPR-14 mRNA 相对表达量增高（0.93 ± 0.06,P < 0.05）,MMP-1 表达降低（8.3 ± 1.8 vs. 3.3 ± 0.8,P < 0.05）,MMP-2 活性高至其 1.25 倍（137 ± 24 vs. 172 ± 8,P < 0.05）,TIMP-2 表达降低（14.8 ± 2.4 vs. 4.0 ± 0.8,P < 0.05）;③与单纯拉伤组相比,Urantide 组 GPR-14 mRNA 相对表达量降低（0.37 ± 0.08,P < 0.05）,MMP-1 表达差异无统计学意义,MMP-2 活性高至其 1.29 倍（177 ± 21,P < 0.05）,TIMP-2 表达降低 （6.6 ± 1.2,P < 0.05）。 结论 大鼠胸主动脉损伤后局部 GPR-14 mRNA 水平上调,外源性应用 UII 后,GPR-14 mRNA 水平进一步上调,MMP-1 表达下降,TIMP-2 表达减少,MMP-2 活性升高。应用 Urantide（10 nmol&#8226;kg-1&#8226;h-1）能抑制 GPR-14 mRNA 的水平上调,但对 MMP-1 的表达无明显影响,未能表现出拮抗胶原沉积的作用,甚至对 MMP-2/TIMP-2 平衡有类 UII 的作用,其意义有待进一步研究。     

尾加压素Ⅱ加重β-甘油磷酸诱导的大鼠血管平滑肌细胞钙化

目的观察尾加压素Ⅱ(urotensinⅡ,UⅡ)对血管钙化形成的影响。方法利用β-甘油磷酸制备钙化血管平滑肌细胞(VSMCs),测定细胞钙含量、碱性磷酸酶活性、45Ca摄入及骨钙素含量。结果β-甘油磷酸诱导的钙化细胞呈明显的形态转变。生长5～7d后,细胞由长梭形转变为骰子状;9～10d后,细胞聚集成多菊花状的多细胞结节,细胞颜色变暗,vonKossa染色阳性。UⅡ组上述形态变化加重。与对照组相比,用含β-甘油磷酸的钙化培养液处理10d的钙化细胞,其钙含量高2.38倍,ALP活性高6.79倍,45Ca沉积高2.13倍,骨钙素含量高49.3%(P<0.01)。UⅡ(10-10、10-9和10-8mol.L-1)与β-甘油磷酸同时孵育时,钙含量比钙化组分别高22.08%(P<0.05)、49.78%和87.56%(P<0.05),ALP活性高27.41%、56.31%和102.53%(P<0.01),45Ca摄入高68.32%、99.45%和115.36%(P<0.01),骨钙素含量高18.23%(P<0.05)、32.68%和44.65%(P<0.01),表明UⅡ呈浓度依赖性地促进钙化形成。结论尾加压素Ⅱ促进β-甘油磷酸诱导的大鼠VSMCs钙化形成。     

新型气体信号分子硫化氢对吸烟大鼠气道炎症和气道反应性的影响

目的 探讨气体信号分子硫化氢(H2S)对被动吸炳大鼠气道炎症和气道反应性的影响.方法 36只SD雄性大鼠随机分为对照组和被动吸烟组,每组18只.被动吸烟组给予被动吸入香烟烟雾(CS)处理,对照组呼吸清洁空气.两组按照处理方式不同[腹腔注射生理盐水、硫氢化钠(NaHS)、炔丙基甘氨酸(PPG)]相应分别下分为Con组、Naris组和PPG组,以及CS组、CS+NaHS组和CS+PPG组.4个月后取大鼠左肺进行病理学观察并予评分,测定各组大鼠气道反应性,采用敏感硫电极测定血浆及肺组织H2S水平,Western blot测定肺组织胱硫醚γ裂解酶(CSE)蛋白表达.结果 CS组肺组织CSE蛋白表达较Con组增加(P<0.05).与Con组比较,NaHS组、CS组、CS+NaHS组血浆H2S含量显著增高,而PPG组明显降低(P均<0.05);与CS组比较,CS+NaHS组血浆中H2S含量显著增高,而CS+PPG组显著降低(P均<0.05).各组大鼠肺组织匀浆中H2S含量差异无统计学意义.与Con组比较,CS组大鼠气道壁炎症病理评分明显升高,气道对乙酰胆碱(ACh)和氯化钾(KCI)的反应性增高;与CS组比较,CS+NaHS组气道壁炎症病理评分降低(P<0.05),气道反应性下降(P<0.05),而CS+PPG组气道壁炎症病理评分明显升高(P<0.05),气道反应性进一步升高(P<0.01).结论 新型气体信号分子H2S能够减轻吸烟导致的气道炎症和气道高反应性,为内源性保护因子之一.     

内源性一氧化碳/血红素氧合酶体系在缺氧性肺动脉高压形成中的作用

目的 研究内源性一氧化碳／血红素氧合酶（CO／HO）体系在慢性低氧环境中的变化规律，探讨CO／HO体系在缺氧性肺动脉高压形成中的作用。方法 将第1批大鼠随机分为对照组、低氧1d组、低氧3d组、低氧7d组、低氧14d组；第2批大鼠随机分为对照组、低氧组、低氧＋锌原卟啉（ZnPP）均。均以右心导管法测定肺动脉压力；称量并计算右心室与左心室加室间隔的比例；应用双波长分光光度法间接测定大鼠血浆及肺组织匀浆中CO含量；应用免疫组织化学技术对第一批大鼠肺内HO－1蛋白表达进行定位及半定量分析。结果 大鼠低氧7－14d开始形成稳定的肺动脉高压，伴右心室肥大；血浆及肺组织心浆中CO含量分别于低氧1d和低氧14d时两次明显增高（P＜0．01）；低氧1－3d肺泡及肺泡间质巨噬细胞和炎性细胞（F＝8．72，P＜0．001）；低氧＋ZnPP组大鼠肺动脉平均压明显高于对照组及低氧组，血浆及肺组织匀浆中CO含量明显 于氏氧组（P均＜0．01）。结论 内源性CO／HO体系在慢性低氧刺激下明显增高，且呈时间依赖性的双峰现象，其中第2次代偿性增高与肺动脉压力的变化密切相关，HO－1抑制剂的干预研究进一步表明，内源性CO／HO体系对缺氧性肺动脉高压形成具有积极的调节作用。     

肾上腺髓质素N端20肽对血管紧张素Ⅱ刺激心肌成纤维细胞增殖、胶原合成的影响

目的:探讨肾上腺髓质素N端20肽(PAMP)对血管紧张素Ⅱ(angotesinⅡ,AngⅡ)刺激心肌成纤维细胞(CFs)增殖及胶原生成的影响。方法:采用胰酶消化、差速贴壁法培养新生SD大鼠CFs,以3H脯氨酸掺入法测定胶原合成、四氮唑盐(MTT)比色法测定细胞数目,分别观察不同浓度的PAMP、AngⅡ、及PAMP对ANGⅡ诱导CFs增生及胶原合成作用的影响。实验分组(1)空白对照组;(2)10-9、10-8、10-7、10-6mol/LAngⅡ组;(3)10-9、10-8、10-7、10-6mol/LPAMP组;(4)10-7mol/LAngⅡ+PAMP(10-9、10-8、10-7、10-6mol/L)组。结果:(1)随着PAMP浓度的增高,MTT比色值差异无显著性(F=10.21,P>0.05)。随着AngⅡ浓度的增高,MTT比色值也明显增高,各组间差异有显著性(P值均<0.01)。PAMP+AngⅡ组,随着PAMP浓度的增高,MTT比色值均显著降低(P<0.01)。(2)PAMP组的3H脯氨酸掺入率与对照组相比(F=16.92,P>0.05),各组之间差异无显著性。随着AngⅡ浓度的增高,CFs的3H脯...     

心肌局部血管紧张素Ⅱ激活MAPK参与运动性心肌肥大

在长期游泳训练的大鼠心肌组织中，观察了ＡＲⅡ（心肌局部血管紧张素Ⅱ）的促细胞肥大效应与ＭＡＰＫ（丝裂素活化蛋白激酶）活性的关系，以探讨ＡＴⅡ促进运动心肌肥大的信息传递机制。结果表明：运动组心系数增加了２３．８％，心肌局部ＡＴⅡ和ＭＡＰＫ活性分别增加了４８．７６％和４４５．４％，二者显著相关，相关系数ｒ＝０．７８７，提示心肌局部ＡＴⅡ通过激活ＭＡＰＫ参与运动性心肌肥大的发生。     

降钙素基因相关肽对尾加压素Ⅱ诱导的血管平滑肌增殖的影响

目的 :观察降钙素基因相关肽 (CGRP)对尾加压素Ⅱ (UrotensionⅡ ,UⅡ )刺激的血管平滑肌细胞 (VSMC)增殖的影响及机制。方法 :贴块法培养大鼠胸主动脉VSMC ;3 H -胸腺嘧啶 (3 H -TdR)掺入测定VSMCDNA合成 ;γ- 3 2 P -ATP标记的同位素法测定丝裂素活化蛋白激酶 (MAPK)活性。结果 :UⅡ (10 -8mol/L)显著促进VSMC3 H -TdR掺入和激活MAPK。与对照组比较 ,分别增加 4 8%和 2 2 6 % (P <0 .0 1)。CGRP有效抑制UⅡ诱导的VSMC3 H -TdR掺入和MAPK激活。与UⅡ组比较 10 -9、10 -8、10 -7mol/LCGRP分别使VSMC3 H -TdR掺入降低 18%、2 5 %和31% (P <0 .0 1) ,使MAPK活性分别降低 2 6 %、5 0 %和 6 4 % (P <0 .0 1)。结论 :CGRP抑制UⅡ诱导的VSMC增殖 ,其机制可能与CGRP拮抗UⅡ刺激的MAPK活性有关     

烯丙洛尔脂质体携载Captopril对实验性高血压的治疗作用

烯丙洛尔脂质体携载Ｃａｐｔｏｐｒｉｌ对实验性高血压的治疗作用北京医科大学心血管基础研究所张灵芝，董淑云，唐朝枢我们以前的工作表明烯丙洛尔脂质体主要分布于肺脏和心脏，烯丙洛尔脂质体携载还原型谷胱苷肽（ＧＳＨ）对实验性心肌坏死有明显的疗效（１）。为了进一...     

同型半胱氨酸和金属硫蛋白对血管内皮细胞的影响

目的 :观察同型半胱氨酸 (Hcy)血症时小鼠肝、心、肾组织金属硫蛋白 (MT)含量的变化 ,以及MT对Hcy损伤内皮细胞的影响。 方法 :①昆明种小鼠 12只 ,分为对照组和高Hcy组 ,高Hcy组小鼠腹腔注射Hcy(16μmol/kg) ,复制高Hcy血症模型 ,对照组同法注入等量生理盐水。以Cd 血红素饱和法测肝、心和肾组织MT水平。②培养人血管内皮细胞 ,分为空白对照组 ,单用Hcy(1mmol/L)组及MT(2× 10 -5mol/L)和Hcy(1mmol/L)同时应用组 ,孵育人血管内皮细胞 6h测定细胞存活率、培养液乳酸脱氢酶 (LDH)活性和蛋白漏出量。结果 :Hcy组小鼠肝、心和肾组织MT水平较对照组分别增加 2 10 %(P <0 .0 1)、133%(P <0 .0 5 )和 6 0 %(P <0 .0 1)。MT +Hcy组培养的内皮细胞存活率较Hcy组培养的内皮细胞升高 13.9%(P <0 .0 1) ,培养液LDH和蛋白漏出量较Hcy组分别降低 2 7.1%(P <0 .0 5 )和 31.4%(P <0 .0 1)。结论 :Hcy诱导小鼠肝、心、肾组织MT生成 ,MT拮抗Hcy的细胞损伤作用。