左旋千金藤啶碱对沙土鼠脑缺血纹状体及海马CaMKⅡ活性的影响

目的 研究左旋千金藤啶碱(SPD)对缺血/再灌注纹状体、海马神经元CaM KⅡ活性的影响。方法采用沙土鼠双侧颈总动脉阻断造成的前脑缺血模型,用放射性32P掺入法测定CaM KⅡ活性。结果 纹状体、海马神经元缺血/再灌注后CaM KⅡ活性明显下降,在缺血前、后腹腔注射SPD可分别使其CaM KⅡ活性明显升高。结论 SPD对缺血/再灌注纹状体、海马神经元CaM KⅡ活性有一定的保护作用。     

脑缺血生化机制的研究——脑缺血CaM含量和分布及亚细胞结构的变化

用ELISA和免疫胶体金标记电镜技术,研究了蒙古沙土鼠急性脑缺血CaM的含量、分布和亚细胞形态结构变化。ELISA测定结果;缺血10分钟,CaM下降25％;缺血30分钟,CaM下降45％。免疫胶体金检查:正常组每个视野胶体金颗粒数为9.95±3.76,缺血组为5.32±2.44,两组相比,P值<0.001。电镜下可见缺血神经元粗面内质网脱颗粒,线粒体基质密度增加等改变。     

尾壳核在形态学定量分析时的定位取点

尾壳核 (ｃａｕｄａｔｅｐｕｔａｍｅｎＣＰｕ)是鼠脑内最大的核团 ,但并非一均质结构 ,在许多实验研究中表现出明显的区域差别 ,这可能与ＣＰｕ的细胞、受体、神经递质以及纤维联系等诸多分布差异有密切关系[1～ 4 ] ,所以在进行实验分析时必须全面考虑、区别对待才能正确客观     

脑缺血和再灌注时Ca^2＋／CaM PKⅡ活性的变化及苄丙咯的影响

本文以蒙古沙土鼠双侧颈总动脉结扎造成脑缺血模型，研究了脑缺血和再灌注时大脑Ｃａ＾２＋／ＣａＭ ＰＫⅡ活性变化及苄丙咯对其活性的影响，实验结果：（１）Ｃａ＾２＋／ＣａＭ ＰＫⅡ活性随脑缺血时间的延长而逐渐降低，脑缺血１０分钟，酶活性显著低于正常组（Ｐ＜０．０１）；（２）脑缺血１０分钟再灌注２０分钟，酶活性部分恢复，与缺血１０分钟组相比，酶活性有明显上升（Ｐ＜０．０１），但缺血２０分钟再灌注，其活性不     

脑缺血和再灌注时Ca~（2＋）／CaMPKII活性的变化及苄丙咯的影响

本文以蒙古沙土鼠双侧颈总动脉结扎造成脑缺血模型，研究了脑缺血和再灌注时大脑Ｃａ￣２＋／ＣａＭＰＫⅡ活性变化及苄丙咯对其活性的影响，实验结果：（１）Ｃａ￣２＋／ＣａＭＰＫⅡ活性随脑缺血时间的延长而逐渐降低，脑缺血１０分钟，酶活性显著低于正常组（Ｐ＜０．０１）；（２）脑缺血１０分钟再灌注２０分钟，酶活性部分恢复，与缺血１０分钟组相比，酶活性有明显上升（Ｐ＜０．０１），但缺血２０分钟再灌注，其活性不再恢复；（３）缺血前２０分钟腹腔注射苄丙咯，在缺血１０分钟时酶活性明显高于对照组（Ｐ＜０．０ｌ）。结果提示Ｃａ￣２＋／ＣａＭＰＫⅡ活性对缺血非常敏感；苄丙咯对该酶活性有一定保护作用。     

脑中风病人血小板肌球蛋白轻链激酶和Ca~(2 ),Mg~(2 )-ATP酶活性变化的研究

目的探讨急性缺血性脑血管病血小板肌球蛋白轻链激酶（ＭＬＣＫ）和Ｃａ２＋，Ｍｇ２＋－ＡＴＰ酶活性的变化及钙拮抗剂对Ｃａ２＋，Ｍｇ２＋－ＡＴＰ酶活性的影响。方法用３２Ｐ同位素掺入法和比色法分别测定５８例脑中风病人，包括２２例短暂性脑缺血发作（ＴＩＡ）患者和３６例脑梗塞患者以及３５名健康对照者血小板ＭＬＣＫ和Ｃａ２＋，Ｍｇ２＋－ＡＴＰ酶活性。结果ＴＩＡ组和脑梗塞组ＭＬＣＫ活性与对照组相比均有明显增加（Ｐ＜０．０１），而Ｃａ２＋，Ｍｇ２＋－ＡＴＰ酶活性均低于对照组（Ｐ＜０．０５，Ｐ＜０．０１）。在ＴＩＡ组和脑梗塞组之间，这两种酶活性无明显差异（Ｐ＞０．０５）。用钙拮抗剂ｎｉｍｏｄｉｐｉｎｅ治疗后，ＴＩＡ组和脑梗塞组患者Ｃａ２＋，Ｍｇ２＋－ＡＴＰ酶活性均有部分恢复（Ｐ＜０．０５）。结论血小板ＭＬＣＫ和Ｃａ２＋，Ｍｇ２＋－ＡＴＰ酶活性与急性缺血性脑血管病的发生有密切关系，钙拮抗剂可部分改善血小板Ｃａ＋２，Ｍｇ２＋－ＡＴＰ酶活性状态。     

左旋千金藤立定对大鼠纹状体缺血性损伤的拮抗作用

AIM: To elucidate the protection of l-stepholidine (SPD) on neuronal morphology and function against the striatal ischemic injury in rat. METHODS: The forebrain ishemia to Sprague Dawley rats was induced with four-vessel occlusion. Histological examination was performed on the dorsolateral striatum with cresylviolet stain. In striatal slices of rat as an in vitro ischemic model, the activity of calcium/calmodulin-dependent protein kinase II (CCDPK) and lactate dehydrogenase (LDH) was examined by the method of 32P-incorporation and colorimetry, respectively. RESULTS: In the SPD-treated groups, most of the neurons in the striatum kept the normal morphological appearance after 30-min ischemia followed by 6-h or 12-h reperfusion. The number of neurons was much more in SPD groups than that in vehicle group. The sparse and abnormal neurons were observed in the vehicle group. SPD attenuated the ischemic effect on the CCDPK activity in striatal slices. In addition, SPD inhibited the leakage of LDH from neurons induced by ischemia in incubated striatal slices. CONCLUSION: SPD protected striatal neurons against ischemic injury and antagonized the inhibitory action on CCDPK activity induced by ischemia. SPD reduced the leakage of LDH from striatal neurons induced by ischemia.     

猪眼晶体钙结合蛋白的分离、纯化及其性质的研究

用疏水性苯基琼脂糖、Sephacryl S—200和DEAE纤维素柱层析从猪眼晶体中提纯了五种钙结合蛋白(CaBP)。DEAE纤维素柱采用了两种不同梯度的洗脱体系。纯化的CaBP的分子量子别为11,000、12,000、18,000、72,000和87,000,故分别称之为CaBP_(11)、CaBP_(12)、CaM、CaBP_(72)和CaBP_(87)。在SDS—PAGE中,除CaBP_(72)显示出三条不同区带外,其他均为单一区带。晶体CaM对环核苷酸磷酸二酯酶(PDE)的刺激作用与牛脑和猪脑CaM相同。CaBP_(11);CaBP_(12)对CaBP_(72)抗体的交叉反应率小于0.1％,但CaBP_(11)和CaBP_(12)的混合物与CaBP_(72)抗体的交叉反应率明显增加。晶体CaM可与兔抗猪脑CaM抗体1:1结合。     

激动多巴胺受体抑制大鼠纹状体脑片Ca^2＋—钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ活性

目的：研究缺氧时纹状体多巴胺能神经毒性的机制。方法：采用大鼠纹状体脑片体外培养模型。以底物磷酸化^32P-掺入法测定Ca^2 -钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ（CCDPKⅡ）的活性。结果：缺氧30min,纹状体脑片CCDPKⅡ活性降低75％,慢性利血平化使得缺氧诱导的酶活性降低程度减轻,与对照组相比大约降低40％。外源性多巴胺显著降低纹状体脑片CCDPKⅡ活性。去除胞外Ca^2 后,多巴胺诱导的酶活性降低作用被削弱。阿扑吗啡（非特异性多巴胺受体激动剂）、SKF38393（特异性D1样受体激动剂）和喹吡罗（特异性D2样受体动剂）均可显著降低CCDPKⅡ的活性。Sch-23390(特异性D1样受体拮抗剂）和吗丁啉（特异性D2样受体拮抗剂）均可拮抗多巴胺所诱导的酶活性的抑制作用。结论：多巴胺参与缺氧诱导的纹状体CCDPKⅡ活性抑制,其作用机制与D1样和D2样受体的激活以及胞外Ca^2 的内流有关,从而导致多巴胺介导的纹状体神经损伤。