GH/tPA双转基因小鼠的制备及其表达分析

目的 旨在获得GH/tPA双转基因小鼠,并比较分析小鼠乳腺中人组织纤溶酶原激活剂（tPA）的表达水平和个体生长发育状况。方法 利用2只tPA单转基因雄性小鼠（P03、P05）与经超数排卵处理的正常非转基因雌性小鼠交配,受精卵显微注射线性化的GH质粒、胚胎移植而获得后代小鼠,PCR检测基因整合情况,ELISA和Western blotting检测比较单、双基因表达tPA水平,监测转基因小鼠不同生长阶段的体质量来分析GH基因对小鼠生长发育的影响。结果 P03系小鼠共获得286枚受精卵,移植受体母鼠后,顺利产仔77只,经PCR检测获得16只tPA单转基因小鼠（7♂,9♀）,13只GH/tPA双转基因小鼠（8♂,5♀）,双基因整合率为16.9%;P05系小鼠共获得175枚受精卵,移植受体母鼠后,顺利产仔34只,经PCR检测获得12只tPA单转基因小鼠（5♂, 7♀）,7只GH/tPA双转基因小鼠（3♂,4♀）,双基因整合率为20.6%。单、双转基因小鼠乳腺中表达tPA的最高量分别为82.5 μg/mL、674 μg/mL,GH/tPA双转基因小鼠乳腺中表达tPA的量明显高于tPA单转基因（P<0.05）。在小鼠的整个生长周期内,单、双转基因与正常非转基因小鼠的体质量增长均没有显著的差异（P>0.05）。结论 本实验成功地制备了GH/tPA双转基因小鼠,结果表明GH基因导入小鼠体内能够显著地提高目的基因tPA的表达水平,且不会对转基因小鼠的生长发育造成任何明显的影响,这为将来制备高表达转基因动物生产医药蛋白及其育种奠定了基础。     

神经生长液对衰老模型小鼠学习记忆能力的影响

目的:探讨神经生长液对D-半乳糖衰老模型小鼠学习记忆能力及海马神经丝蛋白表达的影响,为应用神经生长液防治神经退行性变疾病提供实验依据。方法:D-半乳糖致小鼠衰老模型,以Y型电迷宫检测其学习记忆能力;以抗低分子量神经丝蛋白(NF-L)抗体,采用WesternBlot法观察海马NF-L的表达。结果:与正常对照组相比(65.8±5.8),D-半乳糖衰老模型小鼠达到学会标准所用的次数明显增加(97.8±13.9,t=7.355,P<0.01),低、高剂量神经生长液可明显减少衰老模型小鼠的次数(80.1±9.3,67.7±8.2,t=3.6662,6.4609,P均<0.01)。衰老小鼠海马NF-L表达量明显下降;神经生长液防止衰老所致NF-L表达量减少。结论:神经生长液可改善D-半乳糖模型小鼠的学习记忆能力,防止衰老小鼠海马NF-L表达的减少。     

中药合剂神经生长液的促神经生长作用

目的观察中药合剂神经生长液对神经元生长的促进作用,为神经生长液用于治疗神经损伤、促进损伤神经修复提供实验依据。方法新生大鼠背根神经节无血清培养,在基础培养液中加入神经生长液,观察实验组与空白对照组背根神经节细胞生长状况和突起生长的长度。胎鼠大脑皮质神经元无血清培养,在基础培养液中加入神经生长液,采用3-(4,5-dimethylthiaz-2-y1)-2,5-dijohenyltetrazoliumbromide(MTT)法,观察实验组、神经生长因子(阳性对照)、空白对照组大脑皮质神经元的生长状态。结果与对照组相比,实验组背根神经节细胞突起生长明显,突起长度(314±43)μm显著大于对照组(76±26)μm(F=313.69,P<0.01);与对照组相比,神经生长因子、神经生长液均可显著提高无血清培养条件下大脑皮质神经元对MTT的代谢率(F=82.54,P均<0.01),且存在明显的剂量效应关系。结论神经生长液在体外可促进背根神经节和大脑皮质神经元生长。     

基因熔解曲线谱型图技术分析肺结核患者CD4+ T细胞受体β链可变区基因多态性

目的 利用荧光定量PCR结合基因熔解曲线谱型图(gene melting curve spectratyping, GMCS)技术分析肺结核病患者外周血CD4⁺ T细胞中T细胞受体(TCR)β链可变区(BV)基因多态性。方法 提取15例健康人和30例肺结核患者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC) 中的总RNA,反转录成cDNA,以26个人TCR BV 基因家族设计上游引物, 共同的TCR β链恒定区(BC) 基因设计下游引物, 荧光定量PCR扩增26个TCR BV基因家族谱系,样品谱系用荧光定量PCR 中的DNA熔解曲线进行分析。结果 在15例健康人外周血T细胞TCR β链中,同一BV位点PCR产物的熔解曲线谱型相同。但是与健康人相比,30例肺结核患者的外周血TCR β链26个BV位点熔解曲线谱型存在差异,差异比率为6.7%～33.3%,差异具有显著性(P<0.05,P<0.01)。此外,26个位点中有13个位点熔解曲线谱型差异比率≥20%。结论 荧光定量PCR结合GMCS 技术分析TCR BV基因家族谱系情况,方法稳定、简便,能较好地监测肺结核患者外周血T细胞TCR的β链谱型。     

南通军山卷丹水提物镇痛消炎作用的研究

目的:研究南通军山卷丹水提物镇痛消炎作用.方法:以小白鼠为实验对象,灌胃法给药.阿司匹林为阳性对照药,以醋酸所致扭体反应为镇痛指标.以二甲苯所致小鼠耳廓肿胀为消炎指标.结果:卷丹水提物高低剂量组均有镇痛作用,高剂量组与阿司匹林组相当.各剂量组均有明显的消炎作用,高剂量优于阿司匹林.结论:南通军山卷丹水提物具有镇痛消炎作用.     

芹菜素改善D-半乳糖衰老模型小鼠衰老指征的研究

目的:观察芹菜素对D-半乳糖诱导的衰老模型小鼠的影响.方法:建立D-半乳糖致小鼠衰老模型,以Y型电迷宫检测其学习记忆能力,分别采用黄嘌呤氧化酶法、TBA比色法测定大脑超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量,观察小鼠服用不同剂量芹菜素后上述指标的变化.结果:芹菜素低、中、高剂量均可显著提高衰老模型小鼠的学习记忆能力(P＜0.05或P＜0.01),显著增加D-半乳糖所致衰老模型小鼠大脑SOD活性、降低MDA含量(P＜0.05或P＜0.01).结论:芹菜素能改善D-半乳糖所致衰老小鼠的多项体征.     

整形与美容专科医师培训中的审美教育

审美教育（aesthetic education）亦称美育,是在美学理论的基础上培养正确的审美观和感受美、鉴赏美、创造美的能力的教育,是培养人们正确理解、评价和欣赏现实生活中美的事物的能力。整形与美容外科是一门知识性和艺术性相结合创造美的学科,审美是指导美容外科手术不可缺少的前提条件。整形与美容外科医师不仅需要有牢固的外科理论知识与操作技能,更要具备良好的审美观和艺术素养,这也是医疗美容学行业适应现代社会发展的基本要求。     

卷丹水提物活血化瘀药理作用及对小鼠耐力的影响

目的：研究卷丹水提物的活血化瘀药理作用，以及对小鼠耐力的影响。方法：大鼠随机分成5组：卷丹水提物高、低剂量组，华佗再造丸组（阳性对照），空白对照组。灌胃法给药15天。心脏取血．采用凝固比浊法对APTT、PT进行测定，用Derive法测定FIB；全自动血细胞计数仪测定血小板数。小鼠随机分成4组：卷丹水提物高、低剂量组，刺五加组（阳性对照），空白对照组。灌胃法给药15天。测定各组小鼠负重100,4体重游泳时间。结果：卷丹水提物高剂量组能显著延长AP订（P〈0．05），但对PT、FIB和血小板数无明显影响。卷丹水提物高、中剂量组能显著延长小鼠负荷游泳时间（P〈0．05）。结论：卷丹水提物具有活血化瘀的药理作用，表现为延长内源性凝血时间。卷丹水提物可增强小鼠的耐力。     

β-1,4-半乳糖苷键在周围神经损伤后的表达变化

为了探讨正常和损伤的周围神经中β-1,4-半乳糖苷键的表达定位和表达变化 ,本研究用特异识别β-1,4-半乳糖苷键的蓖麻凝集素 -I免疫组织化学方法结合 S-10 0和 neurofilam ent免疫双标记 ,研究了大鼠坐骨神经损伤对 β-1,4-半乳糖苷键的合成影响。结果表明 ,β-1,4-半乳糖苷键主要分布在正常和损伤坐骨神经的 Schwann细胞中 ,图像分析表明β-1,4-半乳糖苷键的表达在周围神经损伤后 1～ 2 d内有所增高 ,以后随时间延长表达量逐步下降。本研究结果提示 ,周围神经损伤对 β-1,4-半乳糖苷键的表达有影响 ,Schwann细胞表达的β-1,4-半乳糖苷键可能参与周围神经损伤修复相关因子的修饰调控     

大鼠胃经及任脉沿线脂肪条带结构近心端、远心端切断对针刺痛阈的影响

目的:观察在大鼠胃经及任脉沿线脂肪条带结构上分别进行近心端、远心端切断后对针刺痛阈的影响。方法:分别在大鼠胃经及任脉沿线脂肪条带结构的近心端、远心端手术切除6mm脂肪条带结构,并在术前术后分别进行针刺镇痛痛阈测定对比。结果:手术切断大鼠胃经及任脉沿线脂肪条带结构的前后,其针刺痛阈出现有意义的改变。结论:大鼠胃经及任脉沿线脂肪条带结构与针刺镇痛效应具有重要的相关性。