脱氢奎尼酸合成酶和奎尼酸脱氢酶基因在大肠杆菌中的共表达

目的:构建共表达载体pETDuet-aroB-qutB,在大肠杆菌中同时表达奎尼酸合成途径中的关键酶脱氢奎尼酸合成酶(DHQase)和奎尼酸脱氢酶(QDHase)。方法:分别以大肠杆菌(B21)和构巢曲霉(ATCC 24919)基因组为模板,采用PCR法扩增得到脱氢奎尼酸合成酶基因aroB和奎尼酸脱氢酶基因qutB,克隆接入pETDuet-1载体中,转化入大肠杆菌BL21,在宿主菌中共表达脱氢奎尼酸合成酶和奎尼酸脱氢酶。结果:获得了包含pETDuet-aroB-qutB共表达载体的重组大肠杆菌。IPTG(0.5 mmol/L)诱导重组菌4 h后,脱氢奎尼酸合成酶和奎尼酸脱氢酶表达量分别占菌体总蛋白的18.7%和30.5%,酶活力为70.4 U/L、40.2 U/L,分别提高了14.1倍和22.3倍。结论:实现了脱氢奎尼酸合成酶和奎尼酸脱氢酶基因在大肠杆菌中的高效共表达,为基因工程法生物合成奎尼酸奠定了基础。     

发酵法生产辅酶Q10的研究进展

微生物发酵法生产辅酶Q10因其具有生物活性高、没有原材料的限制并实现了产业化等优点而受到国内外学者的关注。该文概述菌株选育及代谢调节工艺优化等方面的研究进展。     

黔南州州级医院消毒质量监测报告

为了解黔南州州级医院消毒卫生质量，加强消毒管理，有效预防和控制医院感染，我们于2005—2006年对辖区内州级以上医院进行消毒效果监测，现将结果报告如下。     

产核苷磷酸化酶大肠杆菌的培养及2′-脱氧-5-氟尿苷的酶法合成

研究了产核苷磷酸化酶大肠杆菌的摇瓶培养和发酵罐培养特征以及乙酸盐和底物诱导对核苷磷酸化酶活力的影响。结果表明：摇瓶培养时，延长菌体培养时间，菌体部分自溶时酶的转化率最高；发酵培养基中加入１０ｇ／Ｌ乙酸钠可使底物转化率提高７．７％，０．００１ｇ／Ｌ的底物ｄＵ诱导可使酶活力提高１１．０％；流加底物ｄＵ对酶反应转化率无显著影响，表明该酶促反应为非２′－脱氧尿苷底物抑制型；反应过程存在扩散控制，酶反应的最佳摇床转速为１６０ｒ／ｍｉｎ。     

主动脉瓣急性感染性心内膜炎巨大赘生物治愈一例

患者男 ,44岁。因间歇性高热 50ｄ就诊。 1 0年前体检时发现有主动脉瓣轻度返流 ,瓣膜形态、位置、活动正常。发病前 2个月曾行腹腔镜胆囊摘除术。发病初期不规则高热39℃ ,发热前有或无寒颤。曾不规则使用抗生素 30ｄ ,停药观察持续 1 0ｄ无发热。血常规化验 :白细胞 1 3 5× 1 0 9 Ｌ ,中性粒细胞 90 2 % ,血细菌培养阴性。心脏彩色多普勒超声检查示主动脉瓣轻度返流。 1 0ｄ后再次寒颤发热 39 5℃入院 ,血沉 2 7ｍｍ ｈ ,尿检红细胞 2 0～ 30 高倍视野 ,心脏彩色多普勒超声示主动脉无冠瓣 1 1× 1 0ｍｍ2 赘生物 ,瓣膜增厚无穿孔 ,左室…     

促肝细胞生长素对人皮肤成纤维细胞及大鼠肝星状细胞产生细胞外基质的影响

细胞外基质（extracellular matrix,ECM）的过量沉积是形成肝纤维化的主要病理基础,ECM成分复杂,主要含胶原蛋白、结构糖蛋白、多糖类物质等。在胶原蛋白中,Ⅰ、Ⅲ型胶原是纤维化肝脏的主要成分,蛋白多糖中透明质酸（hyalu—ronic acid,HA）是肝纤维化中研究较多的大分子物质之一,     

呼吸道合胞病毒SH蛋白免疫原性初步研究

目的研究SH蛋白表达质粒pJW4303/SH/His在小鼠体内的免疫原性,为呼吸道合胞病毒（RSV）疫苗研制提供基础。方法纯化质粒pJW4303/SH/His体外转染293T细胞,Western blot法检测蛋白表达;同时免疫BALB/c小鼠,ELISA法检测体内抗SH蛋白抗体;通过体外法研究小鼠免疫血清对RSV感染的影响。结果所构建质粒pJW4303/SH/His在体外能够正常表达,免疫机体后刺激血清产生相应抗体,该免疫血清对RSV的体外感染有一定抑制作用。结论核酸质粒pJW4303/SH/His通过免疫小鼠,表现出较强的免疫原性,所产生的针对SH蛋白的抗体能够影响RSV对293T细胞的感染。     

超声心动图评价胸腔积液抽液前后的心脏结构和功能

采用多普勒超声仪评价 71例不同量及不同部位胸腔积液患者抽液前后的心脏结构和功能。提示双侧大量胸腔积液对心脏结构和功能可产生明显影响 ;右侧胸腔不仅对右心结构和功能产生明显影响 ,且对左心功能有影响 ;左侧胸腔积液主要对左心结构和功能产生影响 ,抽液后明显改善。     

发酵液中重组人血清白蛋白的纯化

采用摇瓶培养重组毕赤氏酵母（Pichia pastoris）表达并分泌重组人血清白蛋白（recombinant human se-rum alburmin，rHSA）至胞外，发酵液经（NH4）2SO4沉淀、离子交换层析、疏水层析和凝胶过滤分离纯化rHSA，纯化样品经SDS-PAGE检测为单一条带。     

封闭疗法引起感染及局部坏死22例

封闭疗法在临床上应用十分广泛,且具有较好临床疗效,但应用不当可引起一系列的并发症,甚至出现严重后果,如局部化脓性感染、组织坏死等。临床上患者多因肌筋膜炎、关节劳损等疾病而行封闭治疗时,由于操作不当或患者自身存在感染病灶等多种原因而致封闭部位感染及坏死。我院自1990年至2002年以来,门诊与住院病人