Paris saponin I induces G<Subscript>2</Subscript>/M cell cycle arrest and apoptosis in human gastric carcinoma SGC7901 cells

The aim of this study was to investigate the effect of Paris saponinⅠ(PSⅠ)on human gas-tric carcinoma cell growth and apoptosis and to explore the potential mechanisms.The proliferation of SGC7901 cells was monitored by the MTT cell viability assay,while the nuclear morphology of apoptotic cells was assessed by Hoechst 33258 staining.Flow cytometry was performed to analyze the cell cycle progression of propidium iodide(PI)-stained SGC7901 cells and the apoptotic rate of annex-inⅤ/PI-stained cells.Western blotting was used to examine the expression of several cell cycle proteins,including cyclin B1 and Cdk1,and the apoptosis-regulated proteins Bcl-2,Bax,cytochrome c,procas-pase-9,and procaspase-3.The MTT assay demonstrated that PSⅠ could induce significant dose-and time-dependent inhibition of SGC7901 cell proliferation.Marked morphological changes,including condensation of chromatin,nuclear fragmentation and apoptotic bodies were clearly shown on Hoechst 33258 staining.PSⅠ treatment also resulted in the disruption of the cell cycle at G2/M and the induction of apoptosis.Following PSⅠ treatment,the cell cycle-related proteins cyclin B1 and Cdk1 were down-regulated.Expression of the pro-apoptotic protein Bax was increased,while anti-apoptotic protein Bcl-2 decreased.PSⅠ treatment resulted in elevated cytoplasmic cytochrome c and activation of the apoptotic proteases caspase-9 and caspase-3.These data indicate that PSⅠ acts as an inhibitor of proliferation in SGC7901 cells by inducing cell cycle arrest and mitochondria-dependent apoptosis.PSⅠ is a potential therapeutic agent against human gastric carcinoma.     

产NDM-1肺炎克雷伯菌中国分离株的初步研究

目的：探讨湖南地区出现的肺炎克雷伯菌新德里金属β-内酰胺酶1型（NDM-1）基因特征及其与耐药性的关系。方法：临床菌株分离自湖南某综合医院一例重症肺炎并中毒性心肌炎患儿的痰液标本。采用全自动微生物分析系统VITEK-2 compact对菌株进行鉴定及药敏检测;改良Hodge试验筛查碳青霉烯酶;双纸片协同试验及双纸片增效试验检测金属β-内酰胺酶;聚合酶链反应(PCR)特异性扩增NDM-1基因,并对扩增产物进行测序和BLAST分析;质粒接合转移试验分析其耐药机制,并对接合前后的药敏结果进行比较。结果：该菌株经鉴定为肺炎克雷伯菌。改良Hodge试验、双纸片协同试验及双纸片增效试验均为阳性。PCR扩增产物基因序列与GenBank中NDM-1基因FN396876.1同源性为100%。以筛选的接合子DNA为模板扩增NDM-1基因全长并测序,结果与供体菌NDM-1基因扩增产物完全一致。接合子E.coli J53（NDM-1）对所有β-内酰胺类药物的MIC值较受体菌E.coli J53均有很大提高,其中对厄他培南和亚胺培南MIC均提高了8倍以上,头孢他啶及头孢曲松则提高了64倍以上。结论：中国大陆出现了产NDM-1肺炎克雷伯菌;NDM-1基因可在不同菌株之间传递,导致细菌对β-内酰胺类药物广泛耐药。     

Mucin-3和MDR3在胆固醇结石形成中的作用

目的探讨黏蛋白Mucin-3基因和多重耐药因子3(MDR3)在胆固醇结石形成中的作用及其相互关系。方法应用免疫组织化学法和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术,检测Mucin-3和MDR3在36例胆囊结石(结石组)、20例胆囊炎(炎症组)和12例正常胆囊(对照组)的胆囊黏膜和肝组织中的表达。结果结石组和炎症组胆囊黏膜Mucin-3表达阳性率分别为30.1%(11/36)和35.0%(7/20),显著低于对照组75.0%(9/12)(2χ=12.74、13.46,P<0.01);结石组与炎症组之间比较,差异无显著性(χ2=0.21,P>0.05)。结石组的肝组织中MDR3 mRNA的表达量低于炎症组和对照组,差异有显著性(F=19.785,q=8.432~10.037,P<0.01);炎症组肝组织MDR3 mRNA的表达量与对照组比较差异无显著性(P>0.05)。结石组胆囊黏膜中Mucin-3蛋白阳性表达者肝组织中的MDR3 mRNA的表达量与Mucin-3蛋白阴性表达者比较,差异有显著意义(t=3.142,P<0.05)。结论 Mucin-3基因参与了胆囊结石形成的全过程。在胆囊结石形成的后期阶段,MDR3与Mucin-3基因相互作用,共同影响胆囊结石的形成。     

E1A基因对人鼻咽癌动物模型放射增敏的实验研究

目的：探讨腺病毒E1A基因对人鼻咽癌动物模型放射增敏的实验研究。 方法：取对数生长期的CNE-2Z细胞5×105 /0.2 mL,接种于4周龄左右裸鼠右前肢腋部皮下致瘤,第7天裸鼠皮下肿瘤长至直径0.6～0.8 cm时,随机分为6组(n=10): PBS组, Ad-β-gal组,放射组,Ad-β-gal+放射组,Ad-E1A组,Ad-E1A+放射组。Ad-β-gal组/Ad-E1A组在第2周开始给予荷瘤裸鼠皮下肿瘤内滴度为5×109 PFU/ 50μL 的Ad-E1A/ Ad-β-gal注射,每周2次,连续2周,放射组在第3周给予6MV-X照射,每天2 Gy,连续5 d。Ad-β-gal+放射组/Ad-E1A＋放射组在第2周开始,给予荷瘤裸鼠皮下肿瘤内滴度为5×109 PFU/ 50μL 的Ad-E1A/ Ad-β-gal注射,每周2次,连续2周,在第3周给予6MV-X照射,每天2 Gy,连续5 d。第1次治疗后,每隔4天用卡尺测量1次肿瘤的体积,记录其直径,裸鼠的生存时间。当肿瘤的直径超过2 cm时,处死裸鼠,分离肿瘤组织,采用免疫组织化学方法分析血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)和CD34表达,TUNEL分析细胞凋亡。 结果：Ad-E1A+放射组较其他组能明显延缓移植瘤生长时间, Ad-E1A+放射组裸鼠的肿瘤平均体积比单独放射组小4.7倍,比单独用Ad-E1A组的小5.3倍。Ad-E1A+放射组的裸鼠生存率显著高于其他治疗组。Ad-E1A+放射组的VEGF蛋白表达和微血管密度较其他各组明显下降（P＜0.01)。TUNEL分析结果显示Ad-E1A组和Ad-E1A+放射组及放射组的肿瘤组织内均可明显观察到凋亡细胞。并且Ad-E1A+放射组肿瘤细胞凋亡数目明显高于Ad-E1A组或者放射组。结论：E1A基因通过抑制肿瘤血管的形成和诱导肿瘤细胞的凋亡来提高人鼻咽癌细胞对放射的敏感性。     

奥希替尼一线治疗EGFR突变型非小细胞肺癌脑转移患者的临床疗效

目的 探讨奥希替尼一线治疗表皮生长因子受体（EGFR）突变敏感的非小细胞肺癌（NSCLC）脑转移患者的临床疗效。方法 选取2018年1月至2021年8月在中南大学湘雅医院就诊的EGFR突变并接受奥希替尼一线治疗的NSCLC脑转移患者为研究对象。观察治疗3个月后所有患者的颅内客观缓解率（iORR）、颅内疾病控制率（iDCR），比较不同临床特征患者iORR和iDCR的差异；记录治疗期间不良反应发生率；随访所有患者治疗后疾病进展和死亡情况，并采用COX回归模型分析奥希替尼一线治疗的预后影响因素。结果 本研究共纳入82例NSCLC脑转移患者，接受奥希替尼一线治疗3个月后iORR为69.5%，iDCR为96.3%；不同年龄、性别、是否吸烟、PS评分、EGFR突变类型、脑转移部位、是否有其他部位转移、是否有中枢神经症状的NSCLC脑转移患者iORR和iDCR比较，差异均无统计学意义（P>0.05）；治疗期间不良反应总发生率为50.0%；总生存率为73.2%，无进展生存率为78.0%；COX回归分析结果显示，EFGR突变类型为L858R的NSCLC脑转移患者发生死亡的风险是19del突变患者的2.793倍（95% CI： 0.134~0.956， P=0.040），年龄>60岁的NSCLC脑转移患者发生死亡的风险是年龄≤60岁患者的4.385倍（95% CI： 1.267~15.175， P=0.020）。结论 奥希替尼一线治疗EGFR突变型NSCLC脑转移患者可获得良好的iORR和iDCR，且安全性较好。EGFR突变类型为L858R和年龄>60岁是NSCLC脑转移患者奥希替尼一线治疗的预后危险因素。