MAPK信号通路参与17β-雌二醇对维生素D受体表达的调控

目的探讨17β-雌二醇对成骨细胞中维生素D受体(vitamin D receptor,VDR)表达的调节,以及丝裂原激活的蛋白激酶(motigen-activated protein kinase,MAPK)信号通路是否参与该过程。方法小鼠前成骨细胞MC3T3-E1亚克隆14用添加10%小牛血清的无酚红α-MEM培养液培养,在干预细胞时,换为不含血清的无酚红α-MEM培养液。用实时荧光定量RT-PCR法和蛋白质印迹法检测17β-雌二醇干预前后细胞中VDR基因和蛋白的表达,用蛋白质印迹法检测17β-雌二醇干预前后细胞中MAPK信号通路的激活。然后用MAPK信号通路阻断剂U0126和17β-雌二醇同时处理细胞,观察VDR表达的变化。结果17β-雌二醇作用72 h可以上调MC3T3-E1细胞中VDR基因和蛋白的表达;17β-雌二醇可在15min内激活ERK信号通路,并持续到60 min,但是不能激活JNK和p38信号通路;应用U0126后,17β-雌二醇对成骨细胞中VDR表达水平的上调作用可被部分抑制。结论17β-雌二醇可上调成骨细胞中VDR的表达,并能快速激活成骨细胞中MAPK信号通路;MAPK信号通路参与了雌激素上调VDR表达的过程。     

LDL对小鼠成骨细胞的影响

目的 研究不同浓度及同一浓度不同作用时间的LDL对小鼠成骨细胞增殖分化及LRP5、DKK1表达的影响,探讨Wnt信号通路是否参与了LDL对成骨细胞增殖分化调节。方法在小鼠成骨细胞株MC3T3-E1培养液中加入0.05、0.1、0.2 mg/ml的LDL,分别培养24、48、72 h后应用CCK8检测其对成骨细胞增殖的影响,采用ELISA法检测成骨细胞骨钙素水平,分析LDL对成骨细胞分化的影响;采用荧光定量PCR方法检测LDL对成骨细胞LRP5、DKK1基因表达水平的影响。结果在LDL浓度为0.05 mg/ml 24 h时,明显抑制成骨细胞的增殖,与对照组比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。LDL对成骨细胞增殖的作用呈剂量及时间依赖性。ELISA实验结果显示LDL明显抑制成骨细胞中的骨钙素表达,与对照组比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。LDL对成骨细胞骨钙素表达的作用在一定程度上具有剂量及作用时间依赖性。荧光定量PCR实验结果显示LDL在48 h浓度为0.05 mg/ml时明显下调成骨细胞中的LRP5 mRNA表达水平,显著上调DKK1 mRNA表达水平,与对照组比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 LDL能够显著抑制成骨细胞的增殖和分化,这可能与wnt信号通路中LRP5及其抑制剂DKK1基因表达有关。     

当归四逆汤对小儿开胸术后血浆IL-6的影响及镇痛效果

目的探讨当归四逆汤对小儿开胸术后血浆IL-6水平的影响及镇痛效果。方法回顾分析我院2005年4月-2008年6月收治的普胸开胸手术76例患儿的诊治经过,重点分析术后镇痛效果。按术后镇痛方法分为两组,芬太尼组（A组,n=34）和芬太尼＋当归四逆汤组（B组,n=42）,术后1、6、12、24和48h分别抽血测血浆IL-6水平,计两组芬太尼的用量,观察体温（T）、脉搏（P）、呼吸（R）、平均动脉压（MAP）、经皮血氧饱和度（SpO：）水平,并观察两组患儿镇痛后恶心、呕吐、皮疹等不良反应发生情况。结果两组患者术后1小时和48小时血浆IL-6水平比较差异无统计学意义,而术后6小时、12小时和24小时IL-6水平有明显差异,两组患者静滴芬太尼用量具有显著性差异,在不良反应方面B组明显少于A组。结论当归四逆汤镇痛效果确切,不良反应少,可应用于小儿开胸术后镇痛。