1998～2003年全国血站系统HIV抗体检验室间质评报告

根据卫生部颁布的《献血者健康检查标准》和中华人民共和国标准GB18467-2001(献血者健康检查要求》，对献血者必须进行艾滋病病毒(HIV)抗体筛检，并对采出的血液进行HIV抗体复检。鉴于当前世界及我国HIV感染和艾滋病(AIDS)流行有上升趋势，对献血者和临床用血液进行HIV抗体严格检验就非常重要。     

全国血站1998年至2001年HIV抗体检验室间质评

1998年至2001年，我们对全国100余个血站HIV抗体检测进行了室间质量评价，每次发一套5份质控血清，包括抗-HIV1阳性血清3份，抗-HIV1阴性血清2份，要求各血站在收到质控血清后，将质控血清随同常规检验的献血者血清标本一起检测，并将结果按规定的表格项目填写完整后，及时寄回主持单位，以便进行室间质评，4年的质评结果表明，能获得满意的次数占大多数（938/978，95.9%)，但仍有4.1%(40次/978次）的检测次数中出现差错，因此，我们应认真查找原因和改进工作，以保证输血安全。     

丙型肝炎病毒感染的献血者10年追踪观察

目的　追踪观察发生HCV感染的献血者的疾病进程和健康状况。方法　从 1993年 10月～ 2 0 0 4年 2月 ,对 30名HCV感染的献血者定期抽取血液标本 ,观察所得到的 4 4 2份系列标本的血清ALT、抗 HCV和HCV RNA的动态变化 ,并进行HCV分型测定 ,重点分析了其中 10名自愿者肝组织的病理检查结果和血清ALT、抗 HCV与HCV RNA的动态变化。结果　① 30名HCV感染者系列标本中 ,ALT异常率 37.6 % (16 6 / 4 4 2 ) ;抗 HCV阳性率97.1% (42 9/ 4 4 2 ,ELISA法 ) ;HCV RNA阳性率 74 .9% (331/ 4 4 2 )。② 10名HCV感染的献血者 10年系列血清中抗 HCV大多数持续存在 (94 4 % ,15 1/ 16 0 ) ,其HCV RNA时有间隙性阴性 ,阳性率 6 7 5 % (10 8/ 16 0 )其血清ALT水平异常率 33 6 % (5 0 / 14 9)。③HCV分型测定 :HCVⅡ / 1b型占 85 % (2 2 / 2 6 ) ,Ⅲ / 2a型占 15 % (4/ 2 6 )。④ 10名HCV感染者肝组织检查显示均为轻度慢性肝炎。结论　肝组织的病理变化同血清抗 HCV、HCV RNA和ALT的异常有明显相关性。虽然HCV感染后 10年的疾病进程大多是缓慢的 ,但应采取适当治疗措施以控制慢性肝炎的发展。     

过表达TRAIL转基因人脐带间充质干细胞治疗裸鼠脑胶质瘤的研究

目的 探讨建立转座子载体过表达外源肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)的人脐带来源间充质干细胞(hUC-MSCs)转基因细胞系及其应用于脑胶质瘤裸鼠模型的疗效.方法 自主专门设计的PiggyBac转座子过表达系统,通过嘌呤霉素(puromycin)抗性筛选制备稳定表达TRAIL基因的靶向HER2型和非靶向型的2种...     

隐蔽红细胞RhD抗原遮盖效果研究

[目的]研究马来酰亚胺苯甲胺酯聚乙二醇(MDPEG)对红细胞RhD抗原的遮盖程度.[方法]MDPEG修饰红细胞为RhD抗原隐蔽红细胞,隐蔽红细胞与FITC标记IgG类抗D抗体进行抗人球蛋白试验,用流式细胞仪测定红细胞上抗D抗体的结合.[结果]隐蔽红细胞与抗D抗体的血清学凝集试验阴性,流式细胞仪测定隐蔽红细胞上抗D抗体的荧光强度比阴性对照高,统计学检验差异有统计学意义(t=37.250 9,P＜0.000 1).[结论]实验证明MDPEG-RBC上仍有少量RhD+抗原裸露,可能导致宿主产生RhD免疫.     

HIV抗体ELISA阳性标本蛋白印迹确证试验的研究

用获ＦＤＡ准许的美国ＣａｍｂｒｉｄｇｅＢｉｏｔｅｃｈ公司ＨＩＶ－１蛋白印迹试剂盒（ＷＢ）对ＨＩＶ－１／２抗体诊断试剂盒（ＥＬＩＳＡ）初筛阳性的６２份血清标本做确证试验。一次性确证ＨＩＶ抗体阳性者８名；阴性者１２名；不确定者４２名。对８名ＨＩＶ抗体不确定者做追访采样监测，其中１人１２天后ＷＢ血清ＨＩＶ抗体由不确定性转为阳性，另７人在６～１５个月经２～３次采样检测，ＷＢ区带反应无变化或略有变化。本研究证实ＷＢ不确定者，若有ＨＩＶｅｎｖ（ｇｐ１６０、ｇｐ１２０、ｇｐ４１）区带反应，ＨＩＶ血清抗体可能转阳；若仅ＨＩＶｐｏｌ（ｐ３１、ｐ５１、ｐ６６）和／或ｇａｇ（Ｐ１７、Ｐ２４、Ｐ５５）区带反应，很大可能是非特异性反应。虽ＥＬＩＳＡ阳性，而ＷＢ不确定者血清主要呈ｐ２４抗体反应（４２．９％，１８／４２）与ｐ２４、ｐ１７抗体反应（２８．６％，１２／４２）。     

P21基因参与早期诱导RUNX1b过表达抑制人类造血发生

目的探究细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂1[CDKN1A(P21)]对造血发生过程的影响。方法对RUNX1b诱导过表达hES细胞系(RUNX1b/hESC)与小鼠主动脉-性腺-中肾区(AGM)基质细胞AGM-S3共培养4 d细胞,使用多西环素(DOX)(1μg/mL)与RepSox(0.33μmol/L)或不同浓度DOX(1、0.5、0.2、0.1μg/mL)诱导RUNX1b过表达时,以qRT-PCR技术检测P21与RUNX1b相对表达情况。利用基于转座子载体PiggyBac的PB-tet-on-OE真核诱导过表达系统,建立P21诱导过表达hES细胞系(CDKN1A/hESC)。分别在CDKN1A/hESC与AGM-S3共培养d0、d2、d4、d6添加DOX诱导P21过表达,培养8 d或14 d,通过流式细胞术(FACS)检测血细胞表面分子的变化情况,以判断诱导P21过表达对造血发生产生的影响。结果 qRT-PCR显示:P21表达量随着RUNX1b过表达上调,同时加入RepSox时表达基本处在正常水平,随着DOX浓度降低,RUNX1b与P21表达水平下降。在造血分化的早期,特别是共培养d0开始诱导P21过表达的共培养体系所产生的CD34~-CD43~+、CD34~-CD45~+与CD34~+CD45~+细胞群相较于对照分别降低了85%,94%和78%,当共培养d6后诱导P21过表达上述现象消失。结论 P21可能参与了由RUNX1b诱导过表达所引起的人类早期造血发生的抑制效应;早期诱导P21过表达明显抑制造血细胞产生。     

人诱导性多能干细胞来源的间充质干细胞促进成体造血发生研究

目的探讨人诱导性多能干细胞(hiPSCs)在神经分化因子作用下生成的间充质干细胞(N-MSCs)对成体造血的影响。方法 1)与神经发育相关的MSCs的获得:hiPSCs在向前脑类器官培养过程中分离纯化出1个性质稳定的细胞系,命名为N-MSCs,通过形态学观察、流式检测和脂肪、成骨、软骨细胞分化实验对其进行鉴定。2)N-MSCs对成体造血的影响:人胚胎干细胞(hESCs)与鼠AGM-S3细胞共培养获得的CD34~+细胞分别与AGM-S3、N-MSCs(2×10~4个)共培养,单独悬浮培养为对照组(CD34~+组,1×10~4个),流式检测关于造血干/祖细胞(CD34~+CD45~+)和巨噬细胞(Mφ)表面标记的变化。3)N-MSCs对人脐带血来源的巨噬细胞(CB-Mφ)的影响:Mφ分别与脐带MSCs(UC-MSCs)、N-MSCs(2.5×10~5个)在transwell中共培养,Mφ单独培养为对照组(5×10~5个),再用IL-4对Mφ做刺激试验。用MGG染色、流式检测、qRT-PCR等方法分析Mφ形态学、M2型Mφ相关表面标记CD206和IL-10基因表达情况。结果 CD34~+组及其分别与AGM-S3、N-MSCs 2个共培养组培养10 d时收获的CD34~+CD45~+细胞数量(×10~3个)分别为:0.44±0.045 vs 0.63±0.170 vs 2.93±0.190(P0.01);Mφ数量(×10~4个)分别为1.70±0.046 vs 1.49±0.057 vs 2.46±0.086(P0.05)。Mφ与UC-MSCs共培养组及与N-MSCs共培养组CB-Mφ的CD206占比(%)为56.1±1.15 vs 60.0±1.76(P0.05)、IL-10的相对表达量为6.8±0.748 vs 8.10±0.804(P0.01)。结论 N-MSCs能促进成体造血和CB-Mφ向M2型Mφ的转变。     

丙型肝炎病毒感染的献血者肝组织病理改变及血清学指标变化的分析

本文报道献血者发生丙型肝炎病毒（HCV）感染8年后，肝组织病理改变及某些血清学指标的变化。结果表明，11例HCV感染者肝活检情况均为轻度慢性肝炎；按组织病理学分级（G）和分期（S），均为G1-G2级和S0-S3期。这11例感染者中10例HCV抗体长期阳性和HCV RNA长期阳性，但HCV RNA检测时有间隙性阴转，血清ALT水平波动较大，近两年（感染后7-8年）这11例感染者的22次测定，有7次ALT值轻度至中度升高（32%），以上结果表明，一旦发生HCV感染，大多将向慢性肝炎发展。