人类卵子体外培养成熟后冻存研究

目的探讨体外培养成熟的人类卵子冻存的可行性。方法中山大学附属第一医院从2003年3月至2003年9月在ICSI治疗周期中共收集到101个GV期卵子和53个MI期卵子,根据卵子发育阶段不同将不成熟卵子分为GV期组和MI期组,体外培养成熟后应用慢速冷冻方法进行卵子冷冻,解冻后用ICSI受精并进行胚胎体外培养,分别比较GV期组和MI期组卵子的复苏率、受精率、优质胚胎率和囊胚发育情况。结果经体外培养后GV期组和MI期组分别有64个和44个卵子成熟,GV期组卵子体外成熟率为634%(64/101),显著低于MI期组的830%(44/53)(P<005),冷冻后复苏率分别为719%(46/64)和818%(36/44),受精率分别为609%(28/46)和639%(23/36),优质胚胎率分别为536%(15/28)和652%(15/23),在统计学上差异均无显著性意义。结论在ICSI治疗周期中的GV期和MI期的卵子经体外成熟后可以成功地进行冷冻保存。     

体外受精-胚胎移植后妊娠产科结局分析

目的　研究体外受精 胚胎移植 (IVF ET)术后妊娠的母儿围生期特点。方法　采用病例对照方法 ,选择行IVF ET术后妊娠并于 1993年 1月至 2 0 0 2年 12月分娩的妇女 2 5 5例 ,与同期分娩的自然受孕的妇女17175例对照 ,研究IVF ET术后妊娠的围生期情况。结果　IVF ET单胎妊娠的早产、前置胎盘、糖耐量试验(OGTT)异常、产后出血、剖宫产率高于自然受孕组 ,P <0 0 5。IVF ET双胎妊娠的分娩孕周、新生儿体重低于单胎妊娠 ,P <0 0 5 ;中度及重度妊娠期高血压疾病 (妊高征 )、胎膜早破发生率高于单胎妊娠 ,P <0 0 5。结论　IVF ET妊娠是高危妊娠 ,多胎妊娠率高是导致早产和低体重儿显著增多的主要原因 ,加强孕期保健 ,及时治疗并发症可获得良好的妊娠结局。     

无动物源性成分人胚胎干细胞培养体系与其它人胚胎干细胞培养体系的比较

【目的】通过比较hESC在各培养体系中未分化表面标记物及以多能性因子的表达,进一步筛选出更优化、安全有效的hESC培养体系。【方法】四种培养体系分别为:新建立的无动物源性的人包皮饲养层(XF-HFF)联合成分确定培养基(CDM)的无动物源性培养体系(XF-HFF/CDM),对照组为XF-HFF联合添加了200 mL/L人血清(HS)的培养基的培养体系(XF-HFF/HS),HS包被的培养皿联合CDM的无饲养层培养体系(HS-Matrix/CDM),以及传统的人包皮饲养层(XC-HFF)联合添加了200 mL/L血清替代物(KSR)的培养基的培养体系。通过观察克隆形态、细胞计数、免疫荧光、流式细胞术、荧光定量PCR,来比较4种hESC培养体系中的细胞增殖率、未分化表面标记物和多能性因子的表达情况,以及hESC在XF-HFF/CDM培养体系中长期培养后,对其未分化状态、多能性和染色体完整性的检测。【结果】在几种培养体系中,同一代次的hESC表达SSEA-4、TRA-1-60、Oct3/4和hTERT的情况在XF-HFF/CDM组和XC-HFF/KSR组中相似(P>0.01),且均高于其它两组培养体系(P<0.01)。hESC在XF-HFF/CDM培养体系中长期培养超过40代次,仍能表达hESC未分化表面标记物SSEA-3,SSEA-4,TRA-1-60,TRA-1-81及多能性因子hTERT、Oct3/4,在SCID小鼠体内能分化成含3个胚层的畸胎瘤,以及保持完整的二倍体核型。【结论】新构建的完全无动物源性的hESC培养体系的培养效率与传统添加KSR的培养体系相似,且优于相同CDM下的无饲养层培养体系以及相同饲养层下的含人血清的干细胞培养条件。     

某市不育男性Y染色体无精子因子微缺失的分析

目的筛查某市男性不育患者Y染色体无精子因子(AZF)区域微缺失情况,探讨AZF基因微缺失与原发无精、严重少精症之间的关系。方法采用多重聚合酶链反应(PCR)技术,对某市118例原发无精子症、84例原发严重少精症患者及66例正常生育男性进行Y染色体AZF基因家族AZFa、AZFb、AZFc三个区域微缺失分析。结果 66例正常生育男性未发现Y染色体AZF区域微缺失,202例生精障碍患者中发现AZF微缺失25例,总缺失率为12.4%。其中12例无精症患者和5例少精症患者的缺失发生在AZFc区域,缺失率为8.4%;1例无精症患者和2例少精症患者发生AZFb、AZFc双重缺失,缺失率为1.5%;1例无精症患者发生AZFa、b、c三个区域同时微缺失,缺失率0.5%。生精障碍组与正常生育男性组比较Y染色体AZF区域微缺失率差异具有显著性(P<0.001)。结论 Y染色体AZF区域微缺失是引起男性无精、少精子症的重要原因之一,对原发无精、少精子症患者在单精子注射(ICSI)之前进行微缺失筛查是必要的。     

卵巢过度刺激综合征发生危险因素的logistic回归分析

卵巢过度刺激综合征 (ＯＨＳＳ)是应用药物诱发多个卵泡发育和成熟后而引起的一种严重的医源性并发症[1] 。近年来 ,国内超排卵药物的应用越来越普遍 ,ＯＨＳＳ的发生也有逐渐增多的趋势。本研究应用ｌｏｇｉｓｔｉｃ回归对ＯＨＳＳ发生的危险因素进行回顾性分析 ,希望对ＯＨＳＳ的临床诊断和治疗有一定指导作用。一、资料与方法1.研究对象 :研究对象为 1999年 2月～ 2 0 0 0年 2月在中山大学附属第一医院妇产科生殖中心接受常规体外受精 胚胎移植 (ＩＶＦ ＥＴ)和单精子卵细胞浆注射 (ＩＣＳＩ)治疗不孕患者共 82 1个控制性超排卵周期 ,其…     

体外受精超排卵周期中合用人类生长激素的观察

低剂量重组人类生长激素（ＨＧＨ）与人类绝经期促性腺激素（ＨＭＧ）合用于体外受精与胚胎移植（ＩＶＦ－ＥＴ）超排卵周期中，反应欠佳的不育患者，发现能促进卵子成熟，提高受精率，增加移植胚胎数。明显改善妊娠率，但未能影响卵泡的增补及减少诱发排卵所需ＨＭＧ的剂量和用药时间。血清ＩＧＦ－１水平在使用外源性生长激素（ＧＨ）期间明显升高，而对照组无类似变化，证实低剂量ＧＨ在本研究中的使用是有效的。     

应用多重巢式及荧光聚合酶链反应技术对β地中海贫血进行植入前遗传学诊断

目前，国外对β地中海贫血的植入前遗传学诊断，主要应用巢式PCR结合突变检测技术”。但由于β地中海贫血基因的高度异质性，我国β地中海贫血突变基因类型与国外报道的不同。本研究根据我国常见的β地中海贫血突变基因类型，应用多重巢式PCR及荧光PCR技术，于2003年对4例β地中海贫血患者进行了临床植入前遗传学诊断，获得1例临床妊娠。现将结果报道如下。     

支原体对输卵管性不孕患者体外受精与胚胎移植结局的影响

目的 :探讨输卵管不孕患者中宫颈解脲支原体 ( UU)感染对体外受精与胚胎移植 ( IVF-ET)结局的影响。方法 :回顾性分析本中心于 1 999年 3月～ 2 0 0 0年 1月因输卵管因素不孕进行常规IVF-ET治疗的患者 ,据宫颈分泌物 UU培养的结果及药物治疗后的结果分为 :2 5 7周期的 UU阴性组 ( A组 )、3 6周期的 UU治疗后转阴组 ( B组 )和 5 0周期 UU治疗后仍阳性组 ( C组 )。比较各组间受精率、卵裂率、优质胚胎率、临床妊娠率、种植率、异位妊娠发生率和流产率 ,行统计学分析。结果 :三组间受精率、卵裂率、优质胚胎率、临床妊娠率、种植率和流产率差异无统计学意义 ( P>0 .0 5 ) ,但 C组异位妊娠发生率较 A和 B组高 ( P<0 .0 5 )。结论 :IVF-ET中 ,输卵管因素不孕患者的宫颈分泌物 UU阳性 ,异位妊娠的发生率有增高趋势 ,但对胚胎发育、临床妊娠率、种植率及流产率无显著影响 ,经药物治疗 UU转阴后则对 IVF的结局无影响。     

卵浆内单精子注射治疗精子尾部发育不良不育一例

患者30岁,婚后3年夫妻同居不育,在当地医院就诊多次精液常规检查无活动精子,几乎全部精子尾粗短畸形。染色体核型G带分析正常,血卵泡刺激素(FSH)、黄体生成激素(LH)、睾酮(T)、泌乳素(PRL)水平正常,家族史:患者父母为姨表兄妹。患者曾有呼吸道感染,咳嗽及大量咳血史,诊断及治疗不详。其妻,30岁,月经规则,末次月经:1998年9月24日,无孕产史,妇科检查无异常。首先对女方进行控制性的促超排卵治疗[1],在前次月经周期的黄体中期用Buserelin300μg喷鼻,每日3次,达到垂体降调节,然后在月经第5天加用高纯度FSH(HP-metrodin,Serono)150IU肌注…