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沙眼衣原体pORF5质粒蛋白抑制肿瘤坏死因子α诱导HeLa细胞凋亡北大核心CSCD 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 探讨沙眼衣原体质粒蛋白pORF5对肿瘤坏死因子α(TNF?α)诱导HeLa细胞凋亡的影响。方法 将含pORF5基因的慢病毒重组表达载体与辅助质粒共转染293T细胞制备慢病毒,慢病毒收集浓缩后再感染HeLa细胞,流式细胞仪分选获得pORF5基因稳定转染细胞株(pORF5?HeLa),同时建立空载体转染对照细胞株(对照HeLa)。将两种细胞株分别分为两组,一组用20 μg/L TNF?α处理(处理组),一组仅用新鲜培养基培养(未处理组),作用6 h,Hoechst33258染色观察凋亡细胞形态,流式细胞仪检测细胞凋亡率,实时 PCR检测凋亡相关蛋白Caspase3、Bcl?2和Bax mRNA表达水平,Western印迹检测Bax、Bcl?2蛋白表达水平。结果 TNF?α处理细胞6 h后,Hoechst33258染色发现pORF5?HeLa和对照HeLa细胞中均可见不同程度的核固缩、碎裂,高亮蓝色凋亡小体;pORF5?HeLa细胞的凋亡率为(35.5 ± 4.5)%,对照HeLa细胞凋亡率为(63.6 ± 5.8)%,均显著高于相应未处理组[(9.5 ± 1.5)%和(7.9 ± 0.9)%,t值分别为13.53、32.36,均P 〈 0.01]。处理组pORF5?HeLa细胞中Bax和Caspase3 mRNA表达水平较处理组对照HeLa细胞分别降低72.8%和84.5%(t值分别为35.29,42.25,均P 〈 0.01),但Bcl?2 mRNA的表达水平显著高于处理组对照HeLa细胞(t = 87.12,P 〈 0.01)。处理组pORF5?HeLa细胞中Bax蛋白表达水平亦显著低于处理组对照HeLa细胞(t = 17.58,P 〈 0.01),而Bcl?2蛋白表达水平较对照HeLa细胞增加6.8倍,差异有统计学意义(t = 18.93,P 〈 0.01)。结论 pORF5可能通过增强抗凋亡蛋白Bcl?2降低促凋亡蛋白Caspase3和Bax的表达,抑制TNF?α诱导的HeLa细胞凋亡。 相似文献
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基于静息态功能磁共振成像的脑功能连接分析方法被广泛应用于神经精神疾病脑成像研究,其主要包括静态功能连接和动态功能连接(dynamic functional connectivity,DFC).功能连接具有随时间动态变化的性质,静态功能连接无法揭示脑连接时变特征中包含的丰富信息.利用DFC方法,揭示大脑复杂神经活动的动态... 相似文献
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目的 研究肺炎嗜衣原体3种重组抗原Cpn0146、Cpn0147及Cpn0308应用于肺炎嗜衣原体感染血清学诊断中的价值.方法 构建pGEX6p-2/Cpn0146、Cpn0147、Cpn0308重组质粒,并诱导表达重组蛋白,采用间接ELISA法和免疫印迹法(Western-blot)分析其免疫原性及其免疫反应性.建立分别以3种重组蛋白为包被抗原的间接ELISA法,与肺炎嗜衣原体IgG商品诊断试剂盒平行检测183份呼吸道感染患者的血清标本及32份沙眼衣原阳性患者血清标本,比较各方法检出准确性及阳性率.结果 GST-Cpn0146、Cpn0147、Cpn0308免疫兔血清中特异性IgG抗体效价滴度分别达1:6 400、1:12 800和1:12 800以上;以3种重组蛋白为包被抗原的ELISA法准确性分别为92.3%、94.5%、96.7%.各方法检测出阳性率结果显示,Cpn0146组的阳性率为38.8%(71/183)、与肺炎嗜衣原体IgG试剂盒的阳性率比较差异有统计学意义(x~2=12.07,P<0.05);Cpn0147阳性率40.9%(75/183),与肺炎嗜衣原体IgG试剂盒的阳性率比较差异有统计学意义(x~2=8.10,P<0.05);Cpn0308阳性率44.8%(75/183),与肺炎嗜衣原体IgG试剂盒的阳性率比较差异无统计学意义(x~2=0.57,P>0.05).结论 Cpn0308在肺炎嗜衣原体感染血清学诊断实验中表现出良好的准确性(96.2%)和较高的阳性率(44.8%),可望用于进一步研制肺炎嗜衣原体诊断试剂盒. 相似文献
125.
长骨以溶骨破坏改变的主骨巨细胞瘤文献报道较少,且易误诊为骨肉瘤[1],本文对2例已经手术及病理证实的长骨溶骨型骨巨细胞瘤进行报道如下。例1 女,36岁,干部。因右下肢麻木伴疼痛5个月,加重2天并活动受限就诊。体检:右股骨下段内侧略有肿胀,压痛明显,过伸、过屈时疼痛加剧,局部皮肤温度正常,不红。X线表现:右股骨下段干骺端可见一类球形宽度减低的骨质破坏区,边缘模糊,密度不均匀,其前部骨皮质有中断,局部软组织肿胀,软组织内有少许骨样组织,未见骨膜反应,病变未及关节。X线诊断:右股骨下段恶性骨肿瘤(考虑骨肉瘤可能性大)(图1)。手术所… 相似文献
126.
前牙反牙合是一种儿童常见的错牙合畸形 ,并且随患者的生长发育 ,症状逐渐加重 ,易发展成为骨性前牙反牙合 ,早期矫治尤为重要 ,以便阻断错牙合畸形的继续发展。本文应用“2× 4”技术(“2”代表两个磨牙带环 ,“4”代表 4个切牙粘结托槽 )配合Ⅲ类颌间牵引矫治替牙期前牙反牙合取得满意的疗效。1 材料和方法1.1 一般资料替牙期前牙反牙合 2 6例 ,男 11例 ,女 15例 ,年龄 7~ 11岁。前牙反覆盖 2~ 3 .5mm ,反覆牙合 2~ 5mm ,磨牙近中关系或偏近中关系。1 2 矫治方法在第一磨牙上粘带环 ,切牙粘方丝弓托槽。可先用0 3 6mm ( 0 .0 14英… 相似文献
127.
目的 了解现阶段我国在医保体系建设中取得的进展及存在问题,为医保制度不断完善与高质量发展提供政策建议与循证基础。方法 采用政策研究分析的方式,对2009年新医改以来的医保相关政策文件、覆盖人数、参保比例、筹资水平、个人支付比例等进行汇总评价。结果 在进展方面,经过不断的改革与探索,参保覆盖率稳定在95%以上,基本构建了覆盖全民的医疗保障网络;医保筹资资金水平不断提高,2018年职工医保的人均年筹资费用为4273元;个人卫生支出由2008年的40.4%降低至2019年的27.7%,个人卫生支出呈现下降趋势,形成动态可持续的筹资增长机制;不断提升与群众就医需求相匹配的住院补偿比例水平、一体化医保体制转型促进多元协同治理体系。在挑战方面,不同医保体系间交叉重叠及重复参保与漏保并存、医保报销比例、精细化管理水平不足、对骗保事件监管力度不足、信息化水平有待提升。结论 我国在医保体系建设方面成效显著,筹资机制及保障水平不断优化,未来工作应持续加强信息化建设,推进精细化管理,助力健康中国建设。 相似文献
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目的 研究表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)5'非编码区rs4444903单核苷酸多态性(SNP)与儿童肾母细胞瘤易感性及病理分期的关系.方法 采用病例对照研究,收集临床病理确诊的儿童肾母细胞瘤外周血96例,及正常同龄儿童外周血200例,应用聚合酶链反应-连接酶特异检测技术(PCR-LDR)分析两组儿童外周血DNA中EGF rs444490位点的多态性,比较不同基因型与前列腺癌易感性及病理分期的关系.结果 Logistic回归分析显示,儿童携带EGF rs4444903 GG和GG+ GA基因型能增加罹患肾母细胞瘤的风险(OR =2.45,95%CI=1.12~4.87,OR=1.25,95% CI=1.08~ 2.34,P<0.05),与患儿病理分期呈正相关(Ⅲ-Ⅴ期vs Ⅰ-Ⅱ期:OR =2.28,95% CI=1.30 ~4.48,P<0.01),并且GG/GA携带者其EGF血清表达亦增高(P<0.05).结论 EGFrs444490位点多态性与肾母细胞瘤易感性及其预后相关,携带GG/GA基因型的肾母细胞瘤患儿预后较差. 相似文献
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130.
目的利用RNAi技术干扰胃癌多药耐药细胞(7901/VCR)多药耐药基因(MDR1)的表达,为临床肿瘤的基因治疗奠定基础。方法根据MDR1的碱基序列设计并合成两对短发夹RNA,构建重组载体,用阳离子脂质体法体外转染7901/VCR;采用MTT法检测转染胃癌细胞的生长抑制率,流式细胞术检测细胞周期变化,RT-PCR和Western blot检测转染前后MDR1 mRNA和蛋白表达的变化。结果成功构建RNAi质粒载体,转染后细胞IC50明显降低(P〈0.05);G1期细胞增加,S期细胞减少(P〈0.05);MDR1 mRNA转录水平下降(P〈0.05),P-糖蛋白(P-gp)的表达水平降低(P〈0.05)。结论RNAi能明显抑制胃癌细胞7901/VCR MDR1mRNA和P-gp蛋白的表达,进而对肿瘤细胞多药耐药性有明显的逆转作用,为基因治疗提供了一种新的手段。 相似文献