弓形体重组质粒pcDNA_3-SAG1免疫小鼠诱导的细胞免疫应答研究

目的 :用 pc DNA3- SAG1真核表达质粒直接免疫小鼠 ,观察 DNA免疫所诱导的小鼠细胞免疫应答 ,为研制弓形虫疫苗奠定基础。方法 :大量制备重组质粒 pc DAN3- SAG1,然后将其导入 BAL B/ c小鼠体内 ,每隔 2 1d接种一次 ,一共免疫三次。用 MTT方法对脾脏的 NK细胞和其淋巴细胞的转化率进行测定 ;采用免疫荧光法对 CD4+、CD8+ 细胞进行测定。结果 :实验组 NK细胞杀伤率为 :70 .0± 3.6 4,而 pc DNA3及空白对照分别为 :48.5± 6 .0 8和 47.0± 5 .93。实验组 NK细胞活性比对照组明显增高 (P<0 .0 5 ) ,而 pc DNA3质粒及空白对照组差异无显著性 (P>0 .0 5 ) ;对 T淋巴细胞亚群 CD4+、CD8+进行动态分析 ,可见随着感染时间的延长 ,CD8+的数量逐渐上升 ,CD4+ / CD8+的比率逐渐下降 ,实验组与 pc DNA3质粒及空白对照有明显差异 (P<0 .0 5 ) ;Con A刺激小鼠淋巴细胞转化实验 ,能刺激免疫鼠及对照鼠淋巴细胞增生 ,实验组与 pc DNA3质粒及空白对照组差异无显著性 (P>0 .0 5 )。结论 :重组质粒pc DNA3- SAG1免疫 BAL B/ c小鼠可诱导一定的细胞免疫。     

胃癌组织PAK1表达及其与临床病理特征和生存的关系

Background and Objective:Recent studies proved that P21-activated kinase 1 (PAK1) is highly expressed in many kinds of tumor and plays an important role in genesis, development, and metastasis of tumor. We aimed to detect the expression of PAK1 in gastric carcinoma and to analyze its relationship with clinicopathological features and prognosis of gastric carcinoma. Methods: Tissue microarray and immunohistochemical staining were performed to detect PAK1 in paraffin specimens of 189 gastric carcinomas, 54 paracancer tissues, 40 lymph nodes and 30 healthy tissues.Clinicopathologic features and follow-up data of the patients were analyzed by the X2 test and the Kaplan-Meier method.Results: Positive rate of PAK1 was 73.0% in gastric carcinoma, 57.4% in paracancer tissues and 23.3% in healthy controls (X2 = 29.364, P<0.05＝. Expression of PAK1 was significantly correlated with tumor size, tumor differentiation, lymph node metastasis, Lauren classification and invasive depth (all P<0.05＝. The positive rate of PAK1 was significantly higher in primary gastric carcinomas than in metastatic lymph nodes (75.0% vs. 52.5%, X2 = 4.381, P<0.05＝. Survival analysis using the Kaplan-Meier method showed that the expression of PAK1 was a predictor for poor prognosis of the patients with gastric carcinoma (X2 = 6.857, P<0.01＝. Conclusions: Expression of PAK1 is an early molecular event in the tumorigenesis of gastric carcinoma. It is also closely correlated the development of gastric carcinoma and the patients' prognosis.     

山西耳聋四家系分子病因学分析

目的应用分子生物学方法对耳聋四家系14例标本就耳聋热点突变基因进行筛查,分析四家系的耳聋病因。方法结合临床症状运用基因芯片、酶切和测序的方法对四家系耳聋的致病原因进行分析。结果芯片检测和测序显示:家系1患者IVA7-2A>G杂合突变来自母亲,c.C1229T突变来自父亲;家系2患者c.G79A(p.V27I)和c.A341G(p.R114G)来自母亲,GJB2 c.T70A(p.W24R)为体细胞突变;家系3患者c.G79A(p.V27I)和c.A341G(p.R114G)双杂合突变均来自父亲;家系4患者GJB2 235delC纯合缺失来自父母双方,c.G79A(p.V27I)和c.G232A(p.A78Y)杂合突变均来自母亲。结论本研究通过分子生物学的手段从基因的角度阐述了四家系的病因,为患者以后的优生优育及完善耳聋基因突变数据库奠定了基础。     

复发甘草酸苷胶囊治疗女性颜面再发性皮炎疗效观察

颜面再发性皮炎为反复发作的颜面轻度红斑、鳞屑性皮肤炎症,女性多发,影响美观。2010年3月～2011年3月,笔者应用复方甘草酸苷联合皿治林治疗颜面再发性皮炎患者,并与皿治林治疗进行疗效比较,现将结果报道如下。     

一株沃氏葡萄球菌耐药基因的研究

目的：研究沃氏葡萄球菌多重耐药情况和相关机制。方法：采用聚合酶链反应（PCR）法对一株多重耐药沃氏葡萄球菌进行β-内酰胺酶基因、氨基糖苷类修饰酶基因、大环内酯-林可酰胺-链阳菌素B类（MLSB）基因、四环素类基因、糖肽类基因、消毒剂基因检测。结果：PCR结果显示该株的mecA,TEM,ermA,ermC,msrA,msrB,aac（6′）/aph（2″）,qacA基因均为阳性,ant（4′,4″）,aph（3′）-,TetM,vanA,vanB基因均为阴性。结论：该株沃氏葡萄球菌存在多重耐药基因,而且对胺类、胍类消毒剂耐受。     

一个非综合征型耳聋家系新致病基因变异分析

目的 对一个非综合征型耳聋(NSHL)家系进行致病基因分析,明确其致病变异.方法 采集先证者及其家系成员的外周血标本,应用全外显子测序(WES)技术对先证者及其父母、二姐共4名成员进行测序分析,并通过Sanger测序对所有家系成员进行一代验证,确定该家系的致病基因,利用细胞学实验检测基因的致病性.结果 测序结果显示,该...     

美能与拉米夫定联合治疗活动性肝硬化30例

1临床资料2002-02/2003-02我院门诊治疗的活动性肝硬化联合用药治疗组及一般用药对照组30例,治疗组男24例,女4例,年龄25～26岁,病程3～26a,代偿期肝硬化16例,失代偿期肝硬化14例,两组有可比性.     

白细胞介素-6基因启动子区域634位点单核苷酸多态性分布及其与儿童营养状况的相关性

目的 研究白细胞介素-6(IL-6)-634C/G基因多态性在中国汉族儿童中的分布及与体重指数(BMI)和血糖、血脂及25-羟维生素D代谢的相关性,探索基因多态性与儿童营养状况、糖尿病及维生素D缺乏所致疾病的关系.方法 测量214名8～12岁山西籍汉族学龄儿童的体重、身高,计算BMI.采集晨起空腹静脉血,采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性基因分析方法,检测214名儿童的IL-6基因634C/G多态性,测定其血糖、血脂、25-羟维生素D水平.比较不同性别基因型和等位基因的分布及不同基因型血糖、血脂、25-羟维生素D的差异.结果 汉族儿童人群中IL-6基因634位点存在CC、CG、GG 3种基因型,其中GG占15％、GC占40％、CC占45％;C和G等位基因频率分别为65％、35％.基因型和等位基因分布性别差异均无统计学意义(P＞0.05).正常儿童与超重及肥胖儿童比较,基因型分布差异有统计学意义,超重及肥胖儿童GG基因型频率(38.3％)高于正常(7.3％)及消瘦儿童(10.9％)基因型(x2=36.596,P=0.000).多因素分析显示,血三酰甘油浓度与儿童超重和单纯肥胖的发生有相关性,GG基因型是儿童超重和单纯肥胖发生的独立危险因素(P＜0.05).25-羟维生素D与BMI(r=0.075,P=0.528)、血糖(r=0.018,P=0.880)、三酰甘油(r=-0.097,P=0.417)、高密度脂蛋白胆固醇(r=0.038,P=0.751)、低密度脂蛋白胆固醇(r=-0.028,P=0.817)均无相关性,25-羟维生素D在正常儿童和超重及肥胖儿童间差异无统计学意义(P＞0.05).25-羟维生素D缺乏者与合适水平者3种基因型分布差异无统计学意义(x2=0.622,P=0.733).结论 IL-6-634C/G位点在山西籍汉族儿童中存在着多态性,且分布性别差异无统计学意义.IL-6-634基因多态性是导致儿童期超重及单纯性肥胖的一个遗传因素,与人体脂代谢相关,与糖代谢无直接关联.IL-6-634C/G位点基因多态性与血25-羟维生素D无关,与维生素D缺乏性疾病无关,可能与骨代谢无关.25-羟维生素D与血糖、血脂均无关,与儿童超重及肥胖无关.     

弓形虫P30基因DNA免疫小鼠诱导小鼠体液应答及保护性研究

目的 用重组质粒ｐｃＤＮＡ３－Ｐ３０免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠,观察其ＤＮＡ免疫所诱导的小鼠体液免疫反应和保护性作用。方法：大量制备闰ＤＮＡ,肌肉注射免疫小鼠。ＥＬＩＳＡ测定ＩｇＧ抗体滴定,免疫鼠血液组织Ｐ３０基因ＰＣＲ扩增,弓形虫攻击感染。结果 用ＥＬＩＡＳ法检测的抗体ＩｇＧ滴度１：２５６０,免疫后３周及６个月从免疫鼠血液组织中检测到Ｐ３０基因;攻击感染实验组的存活时间较对照时间延长（Ｐ〈０．０５）,     

水飞蓟宾磷脂复合物对慢性乙型肝炎患者血清细胞因子及肝纤维化指标的影响

目的观察水飞蓟宾磷脂复合物对慢性乙型肝炎患者肝纤维化指标及细胞因子的影响。方法83例慢性乙型肝炎患者按就诊顺序随机分为对照组（n=42）和观察组（n=41）,对照组采用常规保肝和支持治疗,观察组在对照组基础上加用水飞蓟宾磷脂复合物105mg/次,3次／d,治疗前后检测肝功能,用酶联免疫吸附法检测血清转化生长因子β（TGF-β）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素6（IL-6）,应用放射免疫法检测血清纤维化指标透明质酸（HA）、Ⅲ型前胶原（PCⅢ）、层粘连蛋白（LN）、Ⅳ型胶原（CⅣ）。结果观察组治疗后血清TGF—β（174．4±49．7）μg/L、TNF—α（89．5±25．8）μg/L、IL-6（232．6±61．7）μg/L及HA（180±54）μg/L、PCⅢ（171±49）μg/L、LN（168±39）μg/L、C1V（153±37）μg/L水平较治疗前及对照组治疗后均显著降低（P〈0．05）。结论水飞蓟宾磷脂复合物通过影响慢性乙型肝炎患者血清细胞因子等发挥抗肝纤维化作用。