伊马替尼体外对c-kit阳性急性髓系白血病患者骨髓细胞增殖和凋亡的影响

伊马替尼是一种2-苯胺嘧啶衍生物，除对bcr／abl融合基因阳性的慢性粒细胞白血病（CML）和急性淋巴细胞白血病（ALL）细胞有明显的作用外，还可以抑制c—kit酪氨酸激酶。在急性髓系白血病（AML）中c-kit被异常磷酸化。我们用不同浓度的伊马替尼对c—kit^＋AML患者骨髓细胞进行体外处理，采用MTT法、RT—PCR法及流式细胞术探讨其对骨髓细胞凋亡的影响，旨在为临床应用伊马替尼治疗AML提供理论依据。     

保留皮肤全乳切除术后乳房重建的回顾性研究

【目的】探讨乳腺癌患者行保留皮肤全乳切除术联合一期乳房重建手术（SsM＋IBR）的疗效、安全性和美容效果。【方法】对本院肿瘤科收治的82例行SSM＋IBR的乳腺癌患者进行回顾性研究,观察患者术后局部复发／转移发生情况,进行乳房重建满意度调查问卷,比较放疗组和未放疗组满意度情况。【结果】患者住院平均时间为18．5d,随访9～42个月。在全程辅助治疗下,局部复发患者5例,7例发生远处转移。82例中61例采用扩大背阔肌肌皮瓣进行一期乳房重建,其中18例患者发生背部血肿;5例患者采用单纯假体进行一期乳房重建,1例发生假体包囊挛缩;8例采用背阔肌肌皮瓣联合假体、4例采用带蒂横行腹直肌肌皮瓣、4例采用游离腹壁下动脉穿支皮瓣,5例发生局部皮瓣脂肪坏死。【结论】乳腺癌0～Ⅱa期患者的治疗和重建效果较好,对于局部复发和远处转移的患者可及时发现、早期干预。SSM＋IBR手术对于乳腺癌的复发和转移未有明显影响,且重建后美观度较好,患者较为满意。     

吕梁地区遗传性耳聋GJB2基因和mtDNA1555位点的突变筛查

目的通过对吕梁地区96例耳聋患者的GJB2基因和mtDNA1555位点突变筛查,了解该地区的基因突变情况及热点突变位点。方法采用聚合酶链式反应（PCR）扩增96例标本的GJB2基因和mtDNA1555位点所在区段,产物酶切、测序分析。结果96例标本共计检出10个GJB2基因突变位点,与编码连接蛋白的非综合征耳聋突变数据库（http：／／davinci．crg．es／deafness／index．php？seccion=mut_db＆db=nonsynd）比对,8个位点已见报道,其中包括4个多肽位点c．79G〉A、C．341A〉G、c．608T〉C、C．457G〉A和4个致病位点C．235delC、e．109G〉A、c．176-C．191dell6和C．299-c．300delAT,其中,c．235delC是主要突变方式,携带率为6．25％（12／192）;2个位点（c．IVS1—35G〉T和c．88A〉G）属首次报道。酶切发现1例患者携带mt．1555纯合突变,后经测序发现还携带有mt．1438A〉G突变位点。结论吕梁地区耳聋患者以GJB2C．235delC为主要致病位点,本次研究结果为吕梁地区的耳聋预防奠定了基础,同时为今后临床医师诊断、治疗及遗传咨询提供了参考。     

运城地区耳聋患者常见耳聋基因突变分析

目的通过筛查运城地区耳聋患者常见耳聋基因GJB2、PDS和线粒体DNAl555位点的突变频率,来研究该地区常见耳聋基因突变的发生情况。方法采集运城市特殊教育学校75例耳聋患者外周血,对目的基因扩增并测序。结果75例患者中,45例患者的GJB2基因发生突变,其中,c．235delc、e．79G〉A和c.341A〉G的突变频率较高,分别为12％、22％和18．7％,另外还检测出4个突变频率较低的位点C．608T〉C（2％）、C．109G〉A（0．67％）、c．368C〉A（1．33％）和C．176—191del16（0．67％）;3例患者的PDS基因第19外显子发生突变,C．2168A〉G与IVs7—2G〉A突变频率分别为1．33％和2％;仅有1例患者mtDNA1555发生突变。结论通过对山西运城地区常见耳聋基因突变的研究,对建立山西省耳聋基因突变数据库提供素材,同时也为耳聋的预防,基因诊断及治疗提供强有力的依据。     

羊痘一家4例报告

报告一家 4例先后患羊痘及治疗情况。     

影响外源DNA导入哺乳动物细胞的相关因素研究

目的：建立适合本实验室的标准化转染方法。方法：采用磷酸钙－DNA共沉淀转化法将多组重组质粒导入HeLa细胞，观察其转化效率的相关影响因素。结果：待转化的细胞应为单层略稀疏的对数生长期细胞，重组质粒DNA的浓度为8μg/100mL-10μg/100mL培养瓶，转化时间为10h,G418是在转化后24h加入，浓度为200μg/mL，结论：重组质粒DNA导入哺乳动物细胞方法的标准经为外源基因在哺乳动物细胞中的高效表达创造有利条件。     

DNA去甲基化对急性B淋巴细胞白血病细胞株中DNA甲基转移酶基因及微RNA作用的研究

目的：探索甲基化转移酶抑制剂5-杂氮-2'-脱氧胞苷（5-Aza-CdR）对急性B淋巴细胞白血病（B-ALL）细胞株NALM-6的作用以及对细胞中微RNA（miRNA）表达水平的影响。方法用不同浓度5-Aza-CdR处理NALM-6细胞,采用四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测细胞增殖情况,采用荧光定量反转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测5-Aza-CdR处理后细胞DNA甲基转移酶（DNMT）基因mRNA表达水平的变化,采用miScript miRNA PCR Array芯片检测去甲基化后细胞中表达量发生改变的miRNA。结果 NALM-6细胞经不同浓度5-Aza-CdR处理不同时间后,细胞生长受抑,最高抑制率达（74.163±0.381）%。5-Aza-CdR作用浓度与DNMT基因mRNA表达水平呈反比,浓度为1000μmol／L的5-Aza-CdR作用细胞72 h后,DNMT-1的相对表达量降至0.453±0.021,DNMT-3L的相对表达量为0.003±0.001, DNMT-3B的相对表达量为0.395±0.019。miScript miRNA PCR Array筛选出3个miRNA（miR-184、miR-23a-3p、miR-34a-5p）与DNA甲基化相关。结论5-Aza-CdR可下调NALM-6细胞中DNMT基因的表达,并对细胞增殖有抑制作用。miR-184、miR-23a-3p和miR-34a-5p在B-ALL的发生、发展中与DNA甲基化相关。     

HLA-Ⅰ、Ⅱ类PCR-SSP基因分型在移植配型及亲子鉴定中的应用

目的：建立快速、准确的ＨＬＡ基因分型方法，满足临床移植配型的需要。方法：对２５对已进行ＨＬＡ抗原血清学分型的骨髓移植的供、受者，１２例亲子鉴定应用聚合酶链反应－序列特异引物（ＰＣＲ－ＳＳＰ）进行ＨＬＡ－Ⅰ、Ⅱ类基因Ａ、Ｂ、ＤＲＢ１、ＤＱＢ１位点扩增，琼脂糖凝胶电泳分析ＰＣＲ产物并确定其基因型。结果：基因分型结果与血清学分型一致者有２２对，基因分型能明显判断而血清学分型无法判断者有３对；排除亲子关系的有２例。结论：ＰＣＲ－ＳＳＰ方法具有操作简单、快速、结果可靠的特点，不仅适用于移植配型、法医学亲子鉴定和个人识别，也可用于相关疾病及人类遗传学的研究。     

SAG3基因在肾移植患者弓形虫感染诊断中的应用

目的:建立快速、特异、敏感诊断肾移植患者弓形虫感染情况的DNA检测方法,并讨论其临床意义.方法:利用ELISA和PCR方法对68例肾移植受者及20例正常供者同时进行检测.结果:检测肾移植受者68例,PCR和ELISA方法检测弓形虫SAG3基因片段和其抗原,阳性各为5例及4例;其阳性率分别为7.35%和5.91%.作为阴性对照的20名正常者同时进行弓形虫的检测,其结果均为阴性.结论:体外扩增弓形虫SAG3基因的方法具有准确、快速、特异和敏感的优点,可以作为肾移植患者弓形虫感染诊断的有价值的方法之一.     

弓形体SAG1基因DNA诱导小鼠体液免疫应答及保护性研究

目的：用重线真核表达质粒pcDNA3-SAG1直接免疫BALB／c小鼠，观察其DNA免疫所诱导的小鼠体液免疫反应和保护性作用。方法：大量制备重组质粒pcDNA3-SAG1，然后1半其导入BALB／c小鼠体内，抗体滴度用ELISA法进行测定：采用PCR方法对小鼠的血液组织外源基因进行检测；对试验组及对照组进行RH株攻击感染，并对其进行分析。结果：用ELISA法检测的抗体IgG滴度为1：2560；免疫后三周、六个月从免疫鼠的血液组织中用PCR仍可检测到特异的SAG1基因的存在：体外弓形虫攻击感染实验组和对照组，可见实验组的存活时间较对照组时间延长（P＜0.05）。结论：重组质粒pcDNA3-SAG1免疫BALB／c小鼠可诱导一定的体液免疫应答和一定的保护性作用。