前白蛋白对重症坏死性小肠结肠炎的诊断价值

目的 了解重症新生儿坏死性小肠结肠炎(NEC)的临床特点,探究前白蛋白(PA)对于重症NEC的诊断价值。方法 对40例NEC新生儿(Ⅱ期29例、Ⅱ期11例)的临床资料及血常规、血生化结果进行研究,采用多因素logistic回归分析以及ROC曲线判断PA在重症NEC诊断中的价值。结果 多因素logistic回归分析发现PA对于重症NEC(≥Ⅱ B期)的诊断具有参考价值。ROC曲线分析显示在重症NEC(≥Ⅱ B期)的诊断中,PA拥有较高的灵敏度(0.870)及特异度(0.647)。结论 PA对重症NEC(≥Ⅱ B期)具有较高的诊断价值。     

产前应用地塞米松对早产仔鼠脑发育的影响

目的 探讨产前孕鼠使用地塞米松不同次数对早产仔鼠脑发育的影响. 方法 孕SD大鼠分为产前地塞米松3剂组(3只):于妊娠第16、17、18天给予地塞米松0.8 mg/(kg·d)生理盐水稀释至4 ml腹腔注射;地塞米松1剂组(3只):于妊娠第16,17天腹腔注射4 ml生理盐水,第18天腹腔注射等体积的地塞米松0.8 mg/(kg·d);对照组(3只):于妊娠第16、17、18天各腹腔注射生理盐水4 ml.孕19 d处死大鼠,取仔鼠称体重及脑重,免疫组织化学法检测脑组织特异性烯醇化酶(NSE)表达,电镜观察脑超微结构.组间差异比较采用ANOVA. 结果 (1)地塞米松3剂组体重、脑重、脑重/体重分别为(1.543±0.052)g、(88.80±7.12)mg和(5.75±0.38)0A,1剂组分别为(1.584±0.035)g、(98.21±3.71)mg和(6.20±0.26)%,均低于对照组[(1.696±0.076)g、(111.53±6.29)mg和(6.59±0.48)%](P<0.01或P<0.05);且地塞米松3剂组低于1剂组(P<0.01或P<0.05).(2)地塞米松3剂组脑皮质及海马区NSE表达强度分别为0.223±0.054和0.192±0.054,1剂组分别为0.381±0.041和0.359±0.046,均低于对照组(0.590±0.064和0.529±0.068)(P均<0.01).(3)地塞米松组早产仔鼠脑超微结构可见神经元核膜断裂、线粒体空泡变性、核仁消失、神经纤维丝断裂. 结论 产前使用地塞米松可损伤早产仔鼠脑发育,且多次使用比单次使用对脑组织的损伤更大.     

小鼠非黏附骨髓间充质干细胞分化为神经元样细胞的实验研究

目的 探讨小鼠非黏附骨髓间充质干细胞(non-adherent bone marrow-derived mesen-chymal stem cell,NA-BM-MSC)在体外、体内尤其是缺血损伤的脑内向神经元样细胞分化的能力.方法 传代纯化后的NA-BM-MSC经表皮生长因子和碱性成纤维细胞生长因子诱导后,通过甲苯胺蓝染色和免疫细胞化学染色检测神经元特异性核蛋白和神经中间丝蛋白的表达情况;将来自β-半乳糖苷酶转基因小鼠的NA-BM-MSC在立体定位仪下移植到小鼠缺血损伤的脑内,8周后通过LacZ组织化学染色和免疫组织化学染色检测供体细胞在缺血脑内微环境中存活以及神经元特异性核蛋白的表达情况. 结果 NA-BM-MSC经过诱导能够表达神经元特异性核蛋白和神经中间丝蛋白并有尼氏体形成;移植到损伤脑内后,LacZ组织化学染色发现在缺血侧供体细胞能够存活,免疫组织化学单、双染显示在缺血坏死区及周围都检测到了β-半乳糖苷酶阳性的供体细胞,其中的部分阳性细胞还同时表达神经元特异性核蛋白. 结论 NA-BM-MSC在体外能够分化成神经元样细胞,在小鼠缺血损伤的脑组织内也能够存活、迁移,部分细胞还能分化为神经元样细胞.     

表皮生长因子对外周血间充质干细胞原代克隆形成的影响及其传代后多向分化潜能

背景：目前已有很多实验证明外周血中存在间充质干细胞,但由于所用分离筛选方法、培养条件的不同导致了结果的多样性,且实验可重复性较差。目的：观察表皮生长因子对体外分离培养的原代小鼠外周血间充质干细胞克隆形成的影响,以及外周血间充质干细胞传代后的多向分化潜能。设计、时间及地点：细胞学体外观察,于2007-10/2008-09在南京医科大学骨与干细胞研究中心完成。材料：雄性成年C57BL/6J小鼠16只,购于南京医科大学骨与干细胞研究中心实验动物中心。重组人表皮生长因子为Sigma公司产品。方法：无菌条件下从小鼠心脏采血,裂解红细胞后应用贴壁法分离外周血间充质干细胞,通过传代进行纯化和扩增。将原代细胞分2组进行体外培养,实验组向α-MEM培养液中加入10μg/L表皮生长因子,对照组给予不含表皮生长因子的α-MEM培养液,16d后行亚甲基蓝染色,计算克隆面积。取第3代外周血间充质干细胞,以1&#215;10^4/cm^2密度接种后,分别向成骨和脂肪方向诱导分化。主要观察指标：外周血间充质干细胞的生长特性,外周血间充质干细胞体外诱导成骨、成脂能力。结果：倒置相差显微镜下,外周血间充质干细胞贴壁生长,形态类似于骨髓间充质干细胞,呈成纤维细胞样;但其形成克隆的时间较骨髓间充质干细胞有所推迟,且原代细胞克隆形成率低于骨髓间充质干细胞;亚甲基蓝染色结果示实验组外周血间充质干细胞克隆形成率明显高于对照组（P〈0.05）。外周血间充质干细胞成骨诱导后,碱性磷酸酶染色、总胶原染色及茜素红染色均呈强阳性;成脂诱导后油红染色呈阳性,有一定数量的脂滴形成。结论：外周血中存在少量的间充质干细胞,能自我增殖,表皮生长因子可有效促进原代外周血间充质干细胞克隆的形成;体外分离培养的外周血间充质干细胞具备成骨和成脂分化特性。     

一氧化氮吸入对新生儿缺氧性呼吸衰竭机械呼吸时呼吸力学的影响

目的 探讨肺源性呼吸衰竭患儿机械呼吸时吸入一氧化氮(NO)对呼吸力学的影响.方法 新生儿缺氧性呼吸衰竭患儿给予机械呼吸者,平均气道压＞10 cmH2O,吸入氧浓度＞60%者为入组对象,18例为NO组,22例为对照组,比较两组患儿机械呼吸后6 h呼吸力学监测结果.结果 机械呼吸后6 h,NO组吸入氧浓度、吸气峰压、平均气道压、潮气量均小于对照组(P＜0.01);而肺顺应性、气道阻力与对照组相比无明显差异(P＞0.05).肺过度膨胀系数,NO组发生≤仅1例次,而对照组发生8例次.结论 肺源性呼吸衰竭新生儿机械呼吸时吸入NO除能降低吸入氧浓度外,还能降低机械呼吸时所需的吸气峰压,因而使平均气道压下降,可使用较小的潮气量防止肺泡过度扩伤,减少气压伤和容积伤.     

南京两新生儿重症监护室新生儿呼吸衰竭临床流行病学调查

目的:对2004~2005年南京地区两新生儿重症监护室(NICU)中新生儿呼吸衰竭的临床发病特点和疾病分布状况?辅助通气方法?预后进行资料搜集及分析,反映南京地区新生儿呼吸危重病的救治状况?方法:对2004~2005年间收入NICU的101例新生儿呼吸衰竭(NRF)患儿进行前瞻性资料收集及统计分析?结果:在连续12个月间,101例NRF患儿占同期NICU收治危重患儿的12.6%;新生儿呼吸窘迫综合征(45.5%)?感染性肺炎(27.7%)?羊水吸入性肺炎(16.8%)? 呼吸暂停(16.8%)等是新生儿NRF的主要构成疾病;平均胎龄为(34.3±3.7)周,平均出生体重(2.3±0.8)kg,75.8%为早产儿;NRF患儿中有7例(6.9%)死亡,20例(19.8%)放弃后死亡;NICU入住天数为(16.5±12.6)天,NICU费用为(18 169±16 713)元?结论:新生儿NRF在南京地区NICU以早产儿为主,提示早产儿管理是目前NICU的新课题,针对早产儿的新技术的开展,可能有利于提高新生儿危重呼吸疾病的救治成功率;南京NICU救治水平处于全国中等以上,受益于长三角地区围产水平的整体提高?     

孕鼠腹腔注射脂多糖致新生鼠肺损伤模型的构建

目的:探讨孕鼠腹腔注射脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)致新生鼠肺损伤模型的构建方法?方法: 孕18 d SD大鼠随机分为生理盐水对照组(control组)和LPS组,观察腹腔注射不同剂量LPS(2.5?2.0?1.5?1.0?0.5 mg/kg)与等量灭菌生理盐水后的孕鼠反应并统计孕鼠死亡率及流产率,依上述实验结果选定较低死亡率的LPS剂量?分别予孕鼠腹腔注射LPS(0.9?0.8?0.7?0.6?0.5 mg/kg)及等量灭菌生理盐水后记录各组新生鼠肺的病理评分?湿/干重比值(W/D)及肺组织中肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α mRNA?白细胞介素(interleukin,IL)-1β mRNA和TNF-α蛋白的表达量?进一步研究LPS 0.7 mg/kg组中孕19 d胎盘?胎肺及新生鼠生后第1?4?7 d肺组织中炎症因子(TNF-α?IL-1β)mRNA表达量变化与组织病理改变?结果:①LPS组中随着药物剂量递减,孕鼠死亡率及流产率逐渐降低,当LPS剂量小于1.0 mg/kg时孕鼠死亡率及流产率降低至25%以下;②LPS 0.5~1.0 mg/kg时,与对照组比较,LPS< 0.7 mg/kg时新生鼠肺病理评分?W/D?组织TNF-α及IL-1β mRNA表达差异无统计学意义(P均> 0.05),LPS≥0.7 mg/kg时上述指标均显著升高,且差异有统计学意义(P均< 0.05);③孕鼠腹腔注射LPS 0.7 mg/kg时,胎盘?胎肺炎症因子较对照组显著升高,且LPS组新生鼠生后第1?4?7天肺组织中TNF-α?IL-1β mRNA表达水平均显著高于对照组(P均< 0.05)?结论: SD大鼠孕18 d腹腔注射0.7 mg/kg LPS可导致新生鼠肺病理损害?肺水肿,炎症因子TNF-α?IL-1β增高,并延续到生后7 d,是制备宫内感染新生鼠肺损伤模型稳定?可靠的方法?     

LYRM1基因绿色荧光蛋白融合载体的构建及表达

[目的]构建LYRM1基因绿色荧光蛋白融合载体,进而观察LYRM1基因编码蛋白在细胞内的定位情况.[方法]运用RT-PCR技术从人网膜脂肪组织中分离LYRM1基因的完整编码框,将其亚克隆到绿色荧光蛋白表达载体pEGFP-N2,脂质体转染3T3-L1前体脂肪细胞,激光共聚焦显微镜下观察融合蛋白的表达情况.[结果]PCR、酶切鉴定及测序结果表明重组质粒构建正确.激光共聚焦显微镜下观察到pEGFP-N2转染的细胞中绿色荧光均匀分布于整个细胞,而pEGFP-LYRM1转染的细胞中绿色荧光主要集中在细胞核区域.[结论]成功构建了LYRM1绿色荧光蛋白融合载体,LYRM1编码蛋白在细胞中定位于胞核中.     

先天性TORCH感染的治疗预后探讨

目的 探讨先天性TORCH感染的预后，提出防治措施。方法 对51例确诊HCMV、HSV、EBV、TOXO感染-甲组(各31、6、1及13例)分别采用α-干扰素(α-IFN)加静脉用人体免疫球蛋白(IVIG)治疗或用螺旋霉素及阿奇霉素治疗。另选30例足月正常新生儿为对照Z组。随访体格、神经系统发育。结果治疗结束后3或6个月复查血清相关TORCH IgM IgG或／和FQ DNA PCR均转阴性。甲组体格发育明显低于正常儿，精神及运动发育各低于乙组22分及21分。小头、智力低下、脑瘫各为9，19，17例。结论 所述疗法对先天性HCMV，HSV，TOXO感染是有效而安全的。血清相关TORCH抗体及FQ DNA PCR治疗后转阴性，但不能完全修复宫内已形成的脑损伤及发育落后。     

新生儿肺出血的早期诊断(附150例临床分析)

本文对我院经确诊的肺出血150例作一分析。原发病中感染及非感染性疾病各占62％及38％，早产儿61．3％，足月儿34．7％，入院体重≤2500g者66．7％，发病于生后1日内者54．7％，～≤7日者34．7％。诱发因素窒息异常分娩、低体温、破肿、感染各占50．7％、34．7％、80％、41．3％、62％。文童根据本组资料从高危因素、临床特点、及早气管插管吸出血性分泌物及胸部X线表现，提供肺出血的早期诊断线索，并对肺出血的预防提出7点意见。