激光解吸电离-飞行时间质谱技术和CMIO蛋白质芯片检测术前大肠癌分期的意义

目的筛选新的大肠癌候选肿瘤标志物，建立分期诊断模型，并探讨其临床意义。方法采用表面加强激光解吸电离-飞行时间质谱（SELDI—TOF—MS）技术和CM10蛋白质芯片，检测76例大肠癌患者术前血清蛋白质指纹图谱；运用支持向量机分析判别处理数据、筛选标志物，建立并验证分期模型；应用时间序列分析的方法，将DukesA、B、C、D各期以二维散点图的形式表示。结果诊断模型I由6个蛋白质峰组合构建，其质荷比分别为2759．6、2964．7、2048．0、4795，9、4139，8和37761．6，鉴别局限性大肠癌（DukesA、B期）和区域性（Dukes C期）大肠癌的总准确率为86．7％。诊断模型Ⅱ由3个蛋白质峰组合构建，其质荷比分别为6885，3、2058．3和8567．8，鉴别局限区域性（DukesA、B、C期）和系统性（DukesD期）大肠癌的总准确率为75.0％。诊断模型Ⅲ鉴别DukesA期和B期大肠癌的总准确率为86．2％；诊断模型Ⅳ鉴别DukesA期和C期大肠癌的总准确率为84．6％；诊断模型V鉴别DukesB期和C期大肠癌的总准确率为85．7％；诊断模型Ⅵ鉴别DukesB期和D期大肠癌的总准确率为80.0％；诊断模型Ⅶ鉴别Dukes C期和D期大肠癌的总准确率为78．7％。通过二维散点图，可以明显看出DukesA、B、C、D各期之间的区别。结论通过SELDI—TOF—MS技术和CM10蛋白质芯片所筛选的候选肿瘤标志物可以指导大肠癌的综合治疗，所建立的诊断模型可以辅助临床明确大肠癌的术前分期。     

人胚胎肝细胞的体外培养及其生物学特性

报道人胚胎肝细胞体外培养的方法及所培养肝细胞的生物学特性。用胰蛋白酶消化人胚胎肝组织小块，可获７０％以上具有正常代谢活性的肝细胞。分离的肝细胞在ＤＭＥＭ培养基中生长良好，传代６次，历时５个月。将第２、３代细胞冻在于液氮中，３个月后复苏，６０％的细胞仍具有活性，能贴壁生长。收集培养物上清液作白蛋白和甲胎蛋白（ＡＦＰ）测定。结果显示：此种培养细胞具有分泌白蛋白和ＡＦＰ的功能，随着培养时间的延长和传次代数的增加ＡＦＰ含量逐渐减少。本研究为进一步探讨肝细胞的生物学特性及癌变机制提供了实验模型。     

胆囊切除术中胆管横断伤4例分析

<正> 胆管横断伤是严重的手术并发症。大多数发生在胆囊切除术时。笔者在本院及外院进修学习期间曾遇到医源性胆管横断伤4例。 临床资料 本组4例,男性3例,女性1例。年龄最大58岁,最小37岁。胆管横断伤均发生在单纯胆囊切除术中。损伤部位。肝总管1例,胆总管3例。胆管损伤原因:4例中有2例因术中过度牵拉致肝、胆总管扭曲成角被当作胆囊管结扎切断。1例渗血较多,盲目止血时损伤,1例则因术中大意而被切断。全部病人均在手术中发现胆管损伤,采用了胆管断端对端吻合加T管支架     

Elemene induces apoptosis and regulates expression of bcl 2 protein in human leukemia K562 cells 1

目的：研究榄香烯的抗肿瘤作用机制．方法：抑制细胞增殖采用ＭＴＴ法;用荧光显微镜观察细胞的形态学变化;ＤＮＡ电泳、流式细胞仪技术检测ＤＮＡ断裂;用流式细胞仪检测ｂｃｌ２蛋白的表达．结果：榄香烯６５－５２０μｍｏｌ·Ｌ－１明显抑制Ｋ５６２细胞增殖,ＩＣ５０（９５％可信区间）为２２０（１５２－３１９）μｍｏｌ·Ｌ－１,电泳可见ＤＮＡ断裂形成的阶梯状条带,形态学上表现为染色体聚集,核固缩、断裂,而ｂｃｌ２蛋白的水平明显下降．结论：榄香烯诱导人白血病Ｋ５６２细胞凋亡,这与ｂｃｌ２蛋白表达的下降有关     

ARDS的定义、预后、发病机理和治疗

一、定义、流行病学和预后由于ARDS病因的多样化和病程的多变性以及诊断标准不同,使ARDS发生率和死亡率发生较大差别,因而需要一个完整而标准的定义。定义分三部分。 1.急性肺损伤的评分它是一个急性肺损伤的半定量方法。评分分四部分:(1)氧合损害     

一叶秋碱诱导K562细胞凋亡

目的研究一叶秋碱（ＳＥＣ）能否诱导Ｋ５６２细胞凋亡。方法细胞增殖抑制采用ＭＴＴ法;形态学研究采用电子和荧光显微镜;流式细胞仪和琼脂糖凝胶电泳检测ＤＮＡ断裂。结果ＳＥＣ１０～１６０ｍｇ·Ｌ－１呈剂量依赖性抑制Ｋ５６２细胞增殖（ｒ＝０９６１３,Ｐ＜００５）;ＳＥＣ作用４８ｈ后,电镜下可见细胞膜完整,核染色质边聚和凋亡小体;荧光显微镜下核染色质凝聚成点状结构;流式细胞仪出现凋亡峰;ＤＮＡ琼脂糖凝胶电泳可见“梯状”图谱。结论ＳＥＣ可诱导Ｋ５６２细胞调亡。     

磷烯菌素诱导HL-60细胞凋亡及其与增殖周期的关系

目的　探讨一种新型的DNA拓扑酶 Ⅱ抑制剂磷烯菌素 (FST)对人急性粒细胞白血病细胞株HL 60的杀伤机理。方法　采用流式细胞术 (FCM )、TdT联合FCM及LadderDNA三种方法研究FST对HL 60细胞凋亡的诱导作用及其与增殖周期的关系。结果 :FCM (乙醇抽提法 )显示 :1 0 μmolFST作用 6h未引起HL 60凋亡 ,1 0 0 μmol/L时出现明显“亚G1 峰” ,但1 0 0 0 μmol/L诱导时 ,却不出现凋亡而呈“冰冻”现象。TdT联合FCM表明 :1 0 μmol/LFST作用 6h ,即有明显细胞凋亡 ,且凋亡发生在整个细胞周期。LadderDNA测定提示 :1 0 0 μmol/LFST作用HL 60细胞 6h ,其DNA凝胶电泳出现典型梯状图谱。结论　 1 FST诱导HL 60细胞死亡具有异质性 :低剂量触发凋亡 ,高剂量诱导坏死。 2 TdT联合FCM是一种灵敏的凋亡检测手段 ,它能同时测定细胞DNA含量及断裂 ,故能用以研究细胞凋亡及其与增殖周期的关系 ;3 FST诱导的凋亡似乎没有细胞周期特异性     

IL-2/同种异体LAK细胞疗法用于自体骨髓移植后治疗急性白血病5例

５例急性白血病患者，行自体骨髓移植获得造血重建后，以白细胞介素Ⅱ（ＩＬ－２）合并应用同种异体ＬＡＫ细胞做为免疫疗法，以清除体内微小残留疾病，采用ＩＬ－２剂量为４×１０４ｕ／ｄ～２×１０５ｕ／ｄ。同种异体ＬＡＫ细胞来源于脐带血及胎儿胸腺、脾脏，初步结果表明，该方法安全，有效，毒副作用小，未见ＧＶＨＤ发生。     

MS-302三道测量分析系统的应用及HI-6在离体膈神经-膈肌上抗梭曼的作用机制

目的 呼吸肌麻痹是有机磷酸酯类化合物严重中毒致死的主要原因之一,由于膈肌是最主要的呼吸肌,因此,建立一种精确灵敏的实验方法评价药物对离体膈神经 膈肌的影响, 探讨相应的抗呼吸肌麻痹药物的实验显得尤为重要。本文在MS-302三道测量分析系统上探讨了抗神经毒有效化合物HI-6在离体膈神经-膈肌上抗梭曼的作用机制。方法 采用MS-302三道测量分析系统,观察大鼠离体膈神经-膈肌的收缩功能,此方法较既往测量方法实时、高效而灵敏。观察膈肌收缩功能的同时,待标本稳定30 min后取膈肌置-20℃冰箱,留待测定正常乙酰胆碱酯酶(AChE)活性,然后向麦氏槽中加入以台式液配置的药物,加入药液量一般不超过0.5 ml,使药物浓度为10 μmol·L^-1～1 mmol·L^-1, 对照组加入等量的生理盐水, 于加药后不同时间点留取膈肌样品测定AChE活性,观察药物对膈肌AChE活性的直接影响。结果 ① MS-302三道测量分析系统上,对膈神经-膈肌标本强直收缩曲线下的面积进行测量,能较为直接的反映膈神经-膈肌标本的生理功能,且结果精确。② HI-6 10和100 μmol·L^-1对正常膈神经-膈肌收缩功能影响不明显,当药物浓度为1 mmol·L^-1时, HI-6对正常膈神经-膈肌收缩功能有抑制作用;HI-6 10 μmol·L^-1对梭曼抑制的标本收缩功能既没有保护作用也没有拮抗作用; HI-6 100 μmol·L^-1有一定的保护和拮抗作用;当剂量增加到1 mmol·L^-1时,HI-6的保护作用和拮抗作用都明显增强,且保护作用在30 min内最佳。③ 预先给予HI-6不能减弱梭曼对大鼠离体膈肌AChE的抑制,提示HI-6对梭曼抑制的大鼠离体膈肌AChE无明显保护作用;梭曼中毒后给予HI-6对梭曼抑制的膈肌AChE活性无显著影响,提示HI-6对梭曼抑制的膈肌AchE无明显重活化作用。结论 HI-6对梭曼抑制的离体膈神经-膈肌收缩功能的恢复可能是直接生理对抗作用,在本实验条件下未见膈肌AChE活力有明显的恢复。     

离子通道电流的计算机分析处理─—Pclamp5.5.1版本软件系统的应用

Pclam5．5．1版本软件系统，是国际上用于膜片钳制实验的先进软件系统。我们应用的结果表明：在实验中应用软件采集和分析数据是非常方便、节省时间，且自动化程度高、功能全、应用范围广，它为电生理实验，尤其是离子通道电流研究提供了先进的方法和手段。