MiR-3182在鼻咽癌中的表达及其与远处转移和预后关系的研究

目的探讨MiR-3182在鼻咽癌中的表达及与远处转移的关系。方法用实时荧光定量RTPCR方法检测89例鼻咽未分化非角化性癌(鼻咽癌)组织中MiR-3182的表达情况,分析其表达强度与远处转移和预后的关系。结果鼻咽癌组织表达MiR-3182,其表达强度,有远处转移者明显高于无转移者(P0.01),无瘤生存期(DFS)3年者明显高于DFS≥3年者(P0.01)。结论 MiR-3182在鼻咽癌远处转移过程中可能起重要作用,并对预后有一定的影响,其相关分子机制有待进一步研究。     

吉西他滨的肝脏毒性作用观察

目的 观察吉西他滨致小鼠出现肝损害的时间及程度,并探讨其作用机制.方法 将50只小鼠分为观察组40只和对照组10只,分别尾静脉注射吉西他滨224 mg/kg及生理盐水；分别于给药后第3、7、11、14天测定小鼠血清生化指标、肝组织氧化及抗氧化指标,观察肝组织病理学改变.结果 观察组给药第3天即出现肝细胞脂肪变性,弥漫累及整个肝小叶,且多为重度变性；17例出现点状坏死,3例可见桥接坏死,11例出现肝细胞瘀胆；观察组丙氨酸转氨酶无明显变化,天冬氨酸转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、直接胆红素(D-BIL)值明显升高(P均＜0.05)；丙二醛(MDA)明显升高,还原型谷胱甘肽(GSH)和超氧化歧化酶(SOD)值明显降低(P均＜0.05).结论 吉西他滨在给药第3天即可引起肝组织损伤,肝脏损害程度逐渐加重；其机制可能为升高MDA,降低GSH和SOD的表达.     

抑制Skp2基因表达对NK/T细胞淋巴瘤细胞增殖和凋亡的影响

目的:研究抑制Skp2基因表达对NK/T细胞淋巴瘤细胞系HANK1细胞增殖和凋亡的影响,探讨抑制Skp2基因表达治疗NK/T细胞淋巴瘤的潜在应用价值。方法:用RNA干扰(RNA interference,RNAi)方法抑制HANK1细胞Skp2基因表达,实时定量RT-PCR和Western blot检测Skp2基因表达,MTT法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞周期分布和细胞凋亡。结果:Skp2-shRNA表达载体明显抑制HANK1细胞Skp2基因表达,细胞增殖受抑,细胞周期G1期停滞,凋亡细胞增多。结论:抑制Skp2蛋白功能可能是治疗NK/T细胞淋巴瘤的好方法,值得深入研究。     

EB病毒阳性黏膜皮肤溃疡二例

正1病例介绍病例1患者,男,56岁,因"咽痛2个月余,加重1个月"入院。入院查体:一般状况好。双侧扁桃体Ⅱ度肿大,隐窝内见大量黄白色分泌物,口咽黏膜见多个散在分布的浅溃疡,溃疡最大径约0.1~0.3 cm,边界清楚,基底干净,其余体格检查未发现异常。血常规及肝功能检查示各项指标在正常范围内。口咽     

肺炎克雷伯杆菌分泌因子及活菌诱导人肺上皮细胞表达分泌IL-8的研究

目的 :探讨肺炎克雷伯杆菌 (Klebsiellapneumoniae ,Kp)分泌因子及活菌诱导肺上皮细胞株表达和分泌IL 8的状况。方法 :用临床分离株Kp0 3 1 1 6、Kp0 3 1 83的细菌培养上清或活菌刺激肺上皮细胞株A5 49和SPC A 1 ,酶联免疫吸附实验 (ELISA)检测细胞IL 8表达量。结果 :①两株Kp培养上清分别刺激A5 49或SPC A 1后 ,IL 8表达量均有显著增高 (P <0 .0 1 ) ,且随上清刺激浓度增加而上升。②两株Kp及DH5 (活菌分别与SPC A 1共孵育 2h ,用庆大霉素杀死胞外菌 ,继续孵育 2 4h后两株Kp诱导细胞IL 8表达量均显著高于DH5α(P <0 .0 1 ) ,且随细菌数 /细胞数比例增大而上升。结论 :Kp分泌因子及活菌都能够诱导肺上皮细胞IL 8表达 ,而活菌上调IL 8的效应较培育上清分泌因子更显著 ,提示肺上皮细胞在Kp感染刺激的肺部炎症反应中起重要作用。     

HNP对肺炎克雷伯杆菌粘附呼吸道上皮细胞的影响

目的：探讨呼吸道抗感染防御机制，观察人中性粒细胞α-防御素（HNP）对肺炎克雷伯杆菌粘附呼吸道上皮细胞的影响。方法：从人中性粒细胞分离纯化HNP。A549细胞与HNP（20μg·ml^-1）及两株肺炎克雷伯杆菌临床分离株共同孵育4小时，用平板培养茵落计数法测定与细胞粘附的活茵数。结果：在HNP存在的情况下，Kp03.33株细菌对肺上皮细胞的粘附提高了12倍（P〈0.01），Kp03116株细菌对上皮细胞的粘附提高了5倍（p〈0.01）结论：HNP显著增强肺炎克雷伯杆菌粘附于呼吸道上皮细胞，可能有利于呼吸道清除细菌。     

铜绿假单胞菌活菌对呼吸道上皮细胞表达IL-8的影响

目的:探讨铜绿假单胞菌活菌与人呼吸道上皮细胞的相互关系,细菌对呼吸道上皮炎症反应的影响。方法:采用PAO1及ATCC 27853两株铜绿假单胞菌,在体外与培养的呼吸道上皮细胞株A549及无血清培养的人支气管上皮原代细胞相互作用,收集细胞培养上清,ELISA检测上清IL-8浓度。结果:两株绿脓杆菌均能诱导呼吸道上皮细胞IL-8分泌增加,在细菌刺激下,A549细胞IL-8分泌比对照高出5倍(P<0.05),原代上皮细胞IL-8分泌比对照高出8倍(P<0.05)。结论:铜绿假单胞菌呼吸道感染的过程中,细菌与上皮细胞的直接作用可能是呼吸道炎症反应的重要原因。铜绿假单胞菌刺激上皮细胞炎症的分子机制和信号传导值得进一步探讨。     

呼吸道上皮细胞与致病菌相互作用--上皮细胞内吞细菌实验研究

目的：呼吸道上皮细胞在防御这类机会致病菌感染时发挥了重要的作用。本研究旨在探讨上皮细胞能否清除胞内的绿脓杆菌，胞内模式识别受体Nods蛋白家族是否参与胞内杀菌，防御素是否能通过促经克雷伯杆菌粘附到上皮细胞而被上皮细胞内在化而清除。方法：首先用绿脓杆菌活菌刺激支气管原代上皮细胞及A549细胞，活菌细胞共孵育两小时后庆大霉素杀死未进入胞内的细菌，继续孵育4小时，24小时后，用TritonX-100溶解细胞，采用平板菌落计数法计数胞内活菌数。绿脓杆菌与细胞按不同比例共孵育两小时后庆大霉素杀死未进入胞内的细菌，继续培养24小时后收集细胞培养上清，酶联免疫吸附法（ELISA）检测IL-8的表达量。为进一步研究Nods蛋白是否在胞内杀菌及活菌在胞内引起IL-8分泌中发挥作用，我们用超声处理的绿脓杆菌菌体成分刺激使细胞膜通透性增加的温和去污剂digitonin处理和未使用digitonin处理A549细胞，ELISA检测细胞IL-8表达水平。胞内模式识别受体Nod1，Nod2可以识别菌体成分，用RT-PCR检测肺上皮细胞Nodl，Nod2的表达。其次，     

全植床深板层角膜移植术的手术配合

穿透性角膜移植（pentrating keratoplasty,PKP）是先天性角膜基质异常性疾病（congenital corneal stromal disease,CCSD）的传统手术方法,此术式优点是方法简单、手术时间短,缺点是存在终身排斥反应,特别是年轻患者排斥反应尤为明显。全植床深板层角膜移植术（full bed deep lamellar kerato plasty,FB-DLKP）是一种新的深板层角膜移植术,与其他的深板层角膜移植术相比,具有无基质残留、