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阻断神经生长因子信号部分抑制雌二醇对恒河猴视网膜血管内皮细胞的作用 总被引:2,自引:0,他引:2
目的研究神经生长因子(NGF)信号系统在雌激素调控视网膜血管内皮细胞中的作用。方法选用恒河猴视网膜-脉络膜血管内皮细胞系RF/6A,RT-PCR检测雌激素受体(estrogen receptor,ER)、NGF及其受体在视网膜血管内皮细胞中的表达。分别观察雌二醇(estradiol,E2)、NGF及VEGF、EGF、BDNF等对血管内皮细胞活力(MTT法)的作用。用流式细胞术-细胞周期法检测E2、NCF及E2与K252a共同处理组的凋亡率。NGF抗体和选择性TrkA拮抗剂K252a研究对上述作用的阻断效应。同样的分组进行细胞划痕修复实验。96孔板AngioMatrix胶上观察E2及NGF对RF/6A内皮细胞管腔形成能力的影响。结果RF/6A在细胞外基质胶上可形成管腔样结构。RT-PCR检测到ER-α、NGF及NGF受体TrkA的mRNA。1nmol/L~100nmol/L E2可以剂量依赖性的增强细胞活力及单层细胞的划痕修复能力,其增强作用可部分被NGF抗体及100nmol/L的K252a选择性阻断。凋亡率检测显示各组凋亡率相近。E2可促进RF/6A形成管腔,但不能被NGF抗体、TrkA阻断。结论除VEGF外,E2还可通过NGF信号系统对视网膜血管内皮细胞活力、划痕修复起促进作用。但结果提示,阻断NGF信号系统不影响E2促RF/6A形成管腔的作用。 相似文献
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患者男,48岁,双下肢活动不灵来院就诊并收入院。体检:患者跛行,步态僵硬不稳,颈腰椎无明显叩痛,胸椎中段压痛,肋弓以下皮肤感觉减退。左下肢感觉减退较重,左下肢肌力3+级,右下肢肌力4级,右下肢肌张力增高,左下肢肌张力正常,双膝反射亢进,左侧跟腱反射(++),右侧跟腱反射(+),双侧巴彬斯基征阳性。实验室检查:球蛋白:39.0 g/L,白蛋白:40.8 g/L,白球比:1.1; 相似文献
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目的:建立N-甲基-N亚硝脲(N-methyl-N-nitrosourea,MNU)损伤视网膜的模型,研究视网膜神经元凋亡对Müller细胞生物学特性的影响及神经营养因子的表达变化.方法:腹腔注射MNU建立视网膜损伤模型,免疫荧光染色方法研究感光细胞缺失对Müller细胞的生物学特性的影响,并检测主要神经营养因子表达的变化.结果:TUNEL法显示,腹腔注射MNU后2 d,视网膜外核层细胞凋亡现象明显.核增殖抗原(PCNA)及细胞周期素CyclinD1的表达明显增高.与此同时,Müller细胞也开始表达神经干细胞抗原巢蛋白(nestin) RT-PCR显示胰岛素样生长因子(IGF),碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和肝细胞生长因子(HGF)mRNA的表达均升高.结论:在视网膜受到损伤时,Müller细胞增殖、去分化呈现出干细胞的特性.而视网膜中IGF、bFGF和HGF等细胞因子的表达明显增高,提示视网膜损伤后可能通过大量分泌细胞生长因子,促进Müller细胞的增殖. 相似文献
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目的 建立兔角膜缘干细胞体外培养方法,观察其生物学特性。方法 用含20%胎牛血清1640培养液对兔角膜缘干细胞进行体外培养,倒置显微镜观察培养细胞体外生长的形态,电镜观察培养细胞的超微结构并进行免疫细胞化学和间接免疫荧光鉴定。结果 植块48~72h细胞开始贴壁生长,7~10d形成良好的单层,细胞呈圆形、卵圆形或多边形,类似角膜上皮细胞;电镜下,可见细胞表面有许多微绒毛,细胞间有桥粒连接,胞质丰富,胞质细胞器较多,含有线粒体等结构;免疫细胞化学和间接免疫荧光染色显示,培养第8天少量细胞角蛋白K3(AE5)免疫反应呈阳性,细胞质被染色,培养第14天和第21天,较多细胞.AE5免疫反应阳性。结论 含20%胎牛血清1640培养液能作为角膜缘干细胞培养的基础液。应用组织培养方法获得的原代培养细胞具有与正常角膜缘干细胞相一致的生物学特性。 相似文献
28.
目的:检测细胞外基质(ECM)中各蛋白酶在视神经损伤后的变化,分析ECM蛋白酶活性的变化与小鼠视神经损伤和损伤后再生之间的关系。方法:本实验采用建立小鼠视神经钳夹伤的动物模型,用WesternBlot方法检测小鼠视神经损伤后不同时间点神经丝(NF)、金属基质蛋白酶-9(MMP-9)、IgG的表达变化。同时采用原位酶谱分析法检测纤溶酶原激活剂(PA)活性在视神经损伤后各阶段的变化,并分析这种变化与纤维蛋白(原)沉积、髓鞘碎片清除等影响神经再生的因素之间的关系。结果:小鼠视神经损伤后发生进行性Wallerian变性,血-神经屏障(BNB)修复迟缓,沉积的纤维蛋白(原)于损伤后第2d清除。MMP-9在损伤后2d达到高峰,以后仍呈现高水平的表达,且均以前体形式出现。PA活性在损伤后第7d达到高峰,并持续至第28d。结论:视神经损伤后,损伤部位BNB重建、PA激活、纤维蛋白(原)的清除以及MMP-9的表达与周围神经截然不同,正是由于微环境的迥然差异,导致了中枢神经系统(CNS)髓鞘碎片清除不利、轴突再生障碍。 相似文献
29.
目的 报道一种简单高效显示小鼠视网膜中两种不同类型神经节细胞的方法.方法 利用特殊标记物Brn3a和Melanopsin,通过视网膜铺片免疫荧光双标染色结合激光共聚焦显微镜,分别标记小鼠视网膜中普通视网膜神经节细胞和内在光敏视网膜神经节细胞.结果 免疫荧光染色结果表明,内在光敏视网膜神经节细胞与普通视网膜神经节细胞均位于视网膜节细胞层,相间互补分布.内在光敏视网膜神经节细胞数量较少,为普通视网膜神经节细胞的1% ~2%,其轴突朝向视神经盘方向汇集,树突野较大,伸向内网层.结论 免疫荧光双标染色是小鼠视网膜内两种不同类型视网膜神经节细胞简单易行、稳定高效的标记方法. 相似文献
30.
131例小儿腹泻患者住院治疗回顾性分析 总被引:4,自引:0,他引:4
目的探讨小儿腹泻病的住院治疗方案,提高诊疗水平。方法研究对象为2008年6月至2009年5月住院的131例小儿腹泻病患者,对其临床资料进行回顾性分析。结果患儿均预后良好,但存在治疗方案不合理,如滥用抗菌药物、重复使用止泻收敛药及助消化药的问题。结论对不合理的治疗方案应及时干预,并保证患儿治疗的安全、有效、经济。 相似文献