冷缺血期氢混合气膨肺对大鼠肺移植后的能量代谢保护作用

目的探讨冷缺血期氢混合气膨肺对大鼠肺移植后能量代谢的保护作用。方法健康雄性SD大鼠42只,8～10周龄,体重250～300 g,随机取21只大鼠为供体大鼠,其余21只为受体大鼠,采用随机数字法将两组大鼠进一步分为三个亚组(每组7只):对照组、氧气组和氢气组。冷缺血期对照组不使用气体膨肺,氧气组采用40%O_2+60%N_2膨肺,氢气组采用3%H_2+40%O_2+57%N_2膨肺,2 h后肺移植。受体大鼠于肺移植前、再灌注3 min、1、2 h时行动脉血气分析检测PaO_2、PaCO_2、pH、碱剩余(BE),计算氧合指数(OI),留取血清与移植肺组织,术后2 h采用ELISA法检测血清白介素-8(IL-8)、白介素-10(IL-10)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)浓度。肺组织HE染色,记录肺组织损伤评分(LIS)。采用ELISA法检测肺组织中乳酸(Lac)、丙酮酸(PA)、三磷酸腺苷(ATP)浓度,采用透射电镜观察肺线粒体结构。结果与对照组比较,再灌注2 h氢气组、氧气组pH、BE、OI明显升高(P0.05);与对照组比较,氢气组、氧气组血清IL-8、TNF-α浓度明显降低,IL-10浓度明显升高(P0.05)。与氧气组比较,再灌注2 h氢气组OI、pH、BE明显升高(P0.05);与氧气组比较,氢气组血清IL-8、TNF-α浓度明显降低,IL-10浓度明显升高(P0.05)。LIS评分氢气组明显高于氧气组(P0.05)。对照组移植肺组织肺泡中有大量透明膜形成,肺泡内出血明显,肺泡隔和肺泡重度水肿,大量中性粒细胞浸润;氢气组、氧气组移植肺组织病理损伤程度轻于对照组,氢气组轻于氧气组。与对照组比较,氧气组和氢气组受体大鼠移植肺组织中Lac、PA浓度明显降低(P0.05),ATP浓度明显升高(P0.05),移植肺组织线粒体的面积、周长、费雷特径明显增大(P0.05),线粒体圆度明显降低(P0.05),嵴紊乱比例明显小于氧气组(P0.05)。结论冷缺血期氢混合气膨肺能提高大鼠移植肺氧合功能,降低乳酸/丙酮酸比值,减轻炎症反应,部分改善肺损伤,提高组织ATP含量,保护肺线粒体,对移植肺的能量代谢功能具有保护作用,这种效果可能是通过对线粒体保护作用而产生的。     

家猪失血性休克容量复苏时内皮素和一氧化氮的变化及其与肾功能的关系

目的 探讨家猪失血性休克容量复苏时血浆内皮素(ET)和一氧化氮(NO)的变化及其与肾功能的关系.方法 雄性家猪14头,体重14～17 kg,随机分为2组(n=7):假手术组(S组)和失血性休克容量复苏组(HS-VR组).HS-VR组经股动脉放血建立失血性休克模型[通过放血和回输放出的血液维持平均动脉压(MAP)35～45 mm Hg,持续90 min],然后回输全部放出的血液及等容量的复方乳酸钠林格氏液进行容量复苏.S组除不放血及容量复苏,其他操作同HS-VR组.分别于放血前(基础值)、失血性休克模型制备成功时(T1)、容量复苏结束时(T2)、容量复苏结束后30 min(T3)、60 min(T4)、120 min(T5)、240 min(T6)时记录MAP、心率(HR)、中心静脉压(CVP)、肺动脉压(PAP)、肺动脉楔压(PCWP)和心输出量(CO),并于上述时点采集血样,测定血浆ET、NO、尿素氮(BUN)和肌酐(Cr)浓度,并计算ET/NO比值,ET/NO比值分别与血浆BUN、Cr浓度进行直线相关分析.结果 与S组比较,T1时HS-VR组MAP、PAP、CVP和CO降低,HR增加,血浆ET、BUN和cr浓度升高,ET/NO比值升高,T2时PAP和CVP升高,T4时HR降低,T6时PAP和ET/NO比值降低,T4-6时血浆NO浓度升高(P<0.05或0.01);HS-VR组血浆ET/NO比值与BUN、Cr浓度呈正相关.结论 容量复苏可纠正ET与ND功能失衡,改善失血性休克家猪肾功能.     

吸入高浓度氢气对大鼠肺缺血再灌注损伤的影响

目的 探究高浓度氢气对大鼠肺缺血再灌注损伤的影响。方法 雄性SD大鼠30只,体重220～260 g,随机分为3组(n=10):假手术组(Sham组)、缺血再灌注组(I/R组)和氢气组(H2组)。采用阻断左侧肺门30min,再灌注1h的方法制备大鼠肺缺血再灌注模型。Sham组,只开胸,不建立缺血再灌注模型,I/R组和H2组建立缺血再灌注模型,H2组在再灌注期间吸入67%H2。再灌注1h后,采用ELISA法检测肺组织中白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的水平,采用黄嘌呤氧化酶法和硫代巴比妥酸法检测肺组织中超氧化物歧化酶(SOD)的活性和丙二醛(MDA)的水平,并且用Western blot方法测定凋亡相关蛋白caspase-3和caspase-9的含量。结果 与Sham组比较,I/R组IL-6、TNF-α和MDA水平显著升高,SOD的活性降低,caspase-3和caspase-9的含量明显升高(P<0.05)。与I/R组比较,H2组IL-6、TNF-α和MDA水平显著降低,SOD的活性升高,caspase-3和caspase-9的含量明显降低(P<0.0...     

高效液相色谱法测定卡介菌多糖核酸中苯酚残留量

目的采用高效液相色谱法测定卡介菌多糖核酸注射液中苯酚的残留量。方法色谱柱C18ODS柱(250×4.6mm,5μm)。流动相:水-甲醇(50:50V/V),流速为1ml.min-1;检测波长为270nm,柱温为25℃;进样量:10μl。结果在5μg/ml-25μg/ml间,苯酚峰面积与浓度的线性方程为Y=9.2766X-0.3115(r=0.9994),线性关系良好,检测限为0.04μg/ml,且卡介菌多糖核酸中苯酚能得到良好分离,重现性好。结论本方法快速简单,结果准确,灵敏度高,且无污染。     

无心跳兔呼出气中异戊二烯浓度变化

目的观察兔心跳停止后不同时间呼出气中异戊二烯浓度变化。方法无心跳兔随机分为A-E组(n=8),分别为心跳停止后0 min、30 min、60 min、90 min和120 min。使用气相色谱-质谱仪测量呼出气中异戊二烯浓度;传统肺损伤检测方法包括:肺脏组织湿干重(W/D)比、丙二醛(MDA)浓度、肺损伤评分(LIS)和气道压30 cm H2O时肺容积(Vmax)。结果 A-E组呼出气中异戊二烯浓度[中位数(四分位区间)]分别为1.39(3.70-0.68)ppb、0.94(2.02-0.32)ppb、1.00(1.73-0.48)ppb、0.95(0.99-0.86)ppb和0.39(1.45-0.34)ppb,E组显著低于A组(P<0.05)。传统肺脏损伤检测指标随时间进行性加重,E组损伤最重。结论呼出气中异戊二烯浓度在心跳停止120 min内随肺损伤加重呈渐进性下降。     

大鼠静脉输注罗哌卡因与利多卡因混合液的毒性反应

目的 探讨罗哌卡因与利多卡因混合应用对中枢神经系统(CNS)和心血管(CV)毒性反应的影响。方法 Wistar大鼠36只,随机分为3组,每组12只。A组静脉注射(ⅳ)0.5％罗哌卡因2mg·ks~(-1)·min~(-1),B组ⅳ 1.0％利多卡因4mg·ks~(-1)·min~1,C组ⅳ 0.5％罗哌卡因2mg·kg~(-1)·min~(-1) 1.0％利多卡因4mg·kg~(-1)·min~(-1)。麻醉及相关操作后持续监测脑电图、心电图、平均动脉压(MAP)。待呼吸、循环稳定20min后,血气分析值正常,记录此时的MAP、心率(HR)作为基础值,输入相应的局麻药。记录出现CNS毒性(SZ)、心律失常(DYS)和心脏停搏(ASYS)三个中毒点的时间、计算输入局麻药累积剂量。在各点采动脉血,用高效液相色谱仪测血浆中局麻药浓度。结果 A组发生SZ、ASYS时罗哌卡因累积剂量大于C组(P<0.05),但发生DYS时差异无显著性。B组发生SZ、DYS、ASYS时利多卡因累积剂量大于C组(P<0.05)。A组发生SZ、DYS、ASYS时罗哌卡因血药浓度与C组比较差异无显著性;B组发生SZ、DYS、ASYS时利多卡因血药浓度与C组比较差异无显著性。结论 0.5％罗哌卡因与1.0％利多卡因混合应用后增加了CNS和CV系统毒性。     

吸入一氧化碳对大鼠脑死亡致肺损伤的影响

Objective To investigate the effects of carbon monoxide (CO) inhalation on lung injury induced by brain death (BD) in rats. Methods Adult male Wistar rats weighing 250-300 g were used in this study. The animals were anesthetized with intraperitoneal pentobarbital sodium 60 mg/kg, tracheostomized and mechanically ventilated (VT 10 ml/kg, RR 50 bpm, PEEP 2 cm H2O). A balloon-tip catheter was placed in the cranium. Twenty-four rats in which Fogarty catheter was successfully placed in the cranium without complication were randomly divided into 3 groups ( n = 8 each) : group I sham operation (group S) ; group II BD and group Ⅲ BDCO. BD was induced by increase in intracranial pressure produced by inflating the balloon at the tip of the catheter. In group S the balloon of the catheter was not inflated. The animals inhaled 40% O2 for 150 min. In group BD, BD was induced and confirmed at 30 min after inflation of the balloon. Then 40% O2 was inhaled for 120 min. In group BDCO, 40% O2 and 0.025% CO were inhaled for 120 min after BD was confirmed at 30 min after balloon inflation. At the end of the experiment the animals were killed. Arterial blood samples were obtained for blood gas analysis before anesthesia (basline), immediately after confirmation of BD, and at 30, 60, 90 and 120 min of CO inhalation. Blood was collected for determination of plasma TNF-α, IL-6 and IL-10 concentrations at 120 min of CO inhalation. The lungs were obtained for determination of W/D lung weight ratio, and MPO activity in the lung tissue and microscopic examination. Lung injury scores were calculated. Results PaO2/FiO2 was stable during the 150 min in group S. Brain death significantly decreased PaO2/FiO2 at 30 min after balloon inflation. PaO2/FiO2 was gradually decreasing during the 120 min in group BD. CO inhalation prevented PaO2/FiO2 from decreasing further. W/D lung weight ratio and MPO activity were significantly higher in group BD than in group S and BDCO. The lung injury score (1 = normal, 4= severely injured) and plasma TNF-αα IL-6 and IL-10 concentrations were significantly higher in group BD than in group S. CO inhalation ameliorated the BD-induced lung injury and attenuated the increase in plasma TNF-a and IL-6 concentration. Plasma IL-10 concentration was significantly higher in group BDCO than in group BD. Conclusion CO inhalation can ameliorate acute lung injury induced by BD through decreasing the local and systemic inflammatory response.     

脑死亡供体吸入一氧化碳对肺移植后细胞凋亡的影响

目的观察脑死亡(brain death,BD)肺移植供体吸入一氧化碳(carbon monoxide,CO)对移植肺细胞凋亡的影响。方法将24只大鼠随机分为3组,对照组(sham组)供体鼠颅内置入Fogarty导管,但不膨胀前端球囊;脑死亡组(BD组)和脑死亡CO治疗组(BDCO组)供体鼠颅内置入Fogarty导管,并膨胀前端球囊建立BD模型。sham组和BD组吸入氧气浓度为40%的氧氮混合气150 min,BDCO组在开始BD诱导后30 min,确认BD后,吸入氧气浓度为40%的氧氮混合气和250 ppm的CO2 h。然后进行肺移植,移植后2 h取移植肺组织切片进行TUNEL染色观察移植肺中细胞凋亡情况,使用RT-PCR和免疫组化技术观察Caspase-3 mRNA和蛋白表达情况。使用免疫组化评分(immunohistoche micas scores,IHS)对细胞凋亡和Caspase-3蛋白表达进行评估。结果BD组细胞凋亡程度,Caspase-3蛋白和mRNA表达显著高于sham组(P0.05),BDCO组与BD组相比,上述指标显著降低(P0.05)。结论供体BD过程增加了移植肺细胞凋亡比率,BD供体吸入CO对移植肺再灌注后细胞凋亡有拮抗效应。     

布-加综合征手术的麻醉体会

布-加综合征(Budd-Chiari's Syndrome,BCS)是由肝静脉(HV)或/和肝段下腔静脉(IVC)部分或完全阻塞所引起的,主要表现为腹胀、肝大、腹水、胸腹壁静脉曲张、下肢水肿,外科分流手术是治疗的有效方法[1,2].由于BCS的病理生理和循环改变的特征,麻醉处理要慎重、有效,术中管理要严密.本文着重探讨麻醉处理及术中管理.     

吸入一氧化碳对大鼠脑死亡致肺损伤的影响

目的 评价吸入一氧化碳(CO)对大鼠脑死亡致肺损伤的影响.方法 成年雄性Wistar 大鼠24只,随机分为3组(n=8),假手术组(SH组)颅内置入Fogarty管,但不诱导脑死亡,吸入40%氧气,持续150 min;脑死亡组(BD组)膨胀Fogarty球囊,确认脑死亡后吸入40%氧气,持续120 min;脑死亡+CO组(BDCO组)膨胀Fogarty球囊,确认脑死亡后吸人40%氧气+0.025%CO混合气,持续120 min.于麻醉前、确认脑死亡即刻、吸入CO 30、60、90、120 min时行动脉血气分析;于吸人CO 120 min时.检测血浆白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和IL-10的浓度;计算肺湿干重比(W/D);检测肺组织髓过氧化物酶(MPO)活性,行肺组织损伤评分.结果 与SH组比较,BD组和BDCO组脑死亡后PaO2/FiO:、BE和pH值下降,血浆IL-6、TNF-α和IL-10的浓度和肺组织损伤评分升高,BD组肺W/D、MPO活性升高(P<0.05);与BD组比较,BDCO组脑死亡后PaO2/FiO2、BE、pH值和血浆IL-10浓度升高,肺组织MPO活性、血浆IL-6、TNF-α的浓度和肺组织损伤评分降低(P<0.05).结论 吸入CO可减轻大鼠脑死亡诱发的肺损伤,其机制可能与CO降低肺组织局部和全身炎性反应有关.