非编码RNA调控骨质疏松信号通路的研究进展

随着全球人口的老龄化,骨质疏松在绝经后女性和老年男性中越来越常见;其严重的并发症脆性骨折可显著影响患者的生活质量,并造成严重的家庭和社会负担,已经成为全人类的重要经济和社会问题。非编码RNA是介导细胞染色质重塑、转录、转录后修饰和信号转导等功能的调节分子,在多种生理和病理过程中充当关键的调节剂。越来越多的研究表明,非编码RNA参与了骨重建的过程,对其的深入研究也可加深对骨质疏松分子机制的了解。本文综述了近年来关于非编码RNA在骨重建及成骨细胞和破骨细胞功能中的作用,有助于理解非编码RNA在骨生物学中的作用,并为骨重建过程的调节以及骨质疏松的潜在治疗方案提供新的线索。     

Ⅰ型胶原促进骨髓基质干细胞粘附的细胞机制

目的观察骨髓基质干细胞(BMSCs)经Ⅰ型胶原作用后细胞粘附能力增加、细胞骨架肌动蛋白的表达和细胞内钙水平变化情况。方法以密度梯度离心法获得成年兔BMSCs,在含10%小牛血清的RPMI 1640培养基条件下,以一定初始浓度分别接种盖玻片(实验组包被Ⅰ型胶原,对照组不做处理)。培养一定时间后,检测细胞的粘附情况,分别以免疫荧光技术并参照El-Amin方法观察细胞骨架肌动蛋白结构分布、以Fluo-3作为钙指示剂行细胞内游离Ca~(2 )测定。结果观察细胞接种12 h内细胞骨架肌动蛋白结构分布显示：细胞接种6 h时,实验组Ⅰ型细胞占56%,Ⅱ型细胞占44%；而对照组Ⅰ型细胞则占79%,Ⅱ型细胞为21%。接种12 h时,实验组Ⅰ型细胞占11%,大部分为Ⅱ型细胞；而对照组Ⅰ型细胞只占45%。提示材料经Ⅰ型胶原修饰后,细胞多数表现为圆形,铺展良好,细胞骨架肌动蛋白的构建活跃。细胞内游离Ca~(2 )测定显示：在Ⅰ型胶原存在的条件下生长的细胞内荧光明显增强,说明细胞内游离Ca~(2 )浓度较对照组高。结论兔BMSCs经Ⅰ型胶原作用后,细胞粘附能力增强不仅与细胞骨架肌动蛋白的构建活跃有关,还与细胞内游离Ca~(2 )浓度明显提升有关。     

同种异体骨移植后移植愈合的影响因素

同种异体骨目前已成功用于修复因肿瘤、感染、创伤后造成的骨缺损。异体骨的愈合机制也得到广泛的研究。作者对影响异体骨愈合的因素作一综述。     

骨肉瘤MG-63细胞中Survivin的表达及其反义寡核苷酸对细胞增殖与凋亡的作用

目的 探讨Survivin在骨肉瘤细胞中的表达及Survivin反义寡核苷酸（ASODN）对骨肉瘤MG-63细胞增殖和凋亡的影响。方法 设计针对Survivin的ASODN和正义核苷酸（SODN）序列,制备脂质体-寡核苷酸复合物并转染MG-63细胞,分为空脂质体（Lip）组、脂质体介导的SODN（Lip-SODN）组和脂质体介导的ASODN（Lip-ASODN）组。采用免疫细胞染色法检测MG-63细胞中Survivin的表达情况,Western blotting检测各组转染48h后的Survivin蛋白水平,MTT法检测转染24、48和72h后MG-63细胞的增殖情况,流式细胞仪检测转染48h后MG-63细胞的凋亡情况。结果 Survivin主要表达于MG-63细胞的胞核。Lip-ASODN组的Survivin蛋白水平均低于Lip-SODN组和Lip组。不同浓度Survivin ASODN对MG-63细胞的增殖抑制程度不同,Lip-ASODN组的细胞增殖抑制率高于Lip组,且呈浓度依赖性;而Lip-SODN组的增殖抑制率与Lip组的差异无统计学意义（P＞0.05）。Lip-ASODN组的凋亡率为（88.47±0.79）％,高于Lip组的（10.01±0.90）％和Lip-SODN组的（4.12±0.25）％,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论 靶向Survivin的ASODN可以显著抑制骨肉瘤MG-63细胞的增殖能力,并促进其凋亡。     

肿瘤靶向给药系统的研究进展

目前抗肿瘤药物中常用的小分子药物虽然疗效高，但其中许多品种同时存在很大的副作用。在进入人体后的短时间内，血液中药剂的浓度远远超过治疗所需的浓度，过高的浓度可能引起很多副作用，同时它们在生物体内新陈代谢速度快，半衰期短，易排泄，故随着时间的推延，药剂的浓度降低较快，影响疗效；另一方面，小分子药物对进入体内指定部位也缺乏选择性，     

新辅助化疗加保肢治疗四肢成骨肉瘤

目的 对成骨肉瘤患者实施新辅助化疗加保肢治疗后进行随访分析.方法 121例经病理诊断为成骨肉瘤患者,根据Enneking分级实施新辅助化疗,化疗药物为氨甲喋磷、顺铂、阿霉素和异环磷酰胺,部分ⅡB期的患者术前实施肿瘤血管栓塞.术后根据肿瘤坏死率选择化疗药物进行进一步化疗.手术方法主要为大段同种骨与关节移植47例,人工肿瘤型假体置换52例.随访采用MSTS保肢评分系统对保肢者进行功能评分.结果 121例患者随访16～101个月,生存76例,总生存率62.8% .大段同种移植骨与关节移植47例,术后3～24个月完成骨愈合,MSTS得分(22.60±4.13)分,优良率76.3% .肿瘤型假体置换52例患者,MSTS得分(24.32±3.85)分,优良率84.6% .结论 新辅助化疗加保肢手术是目前临床治疗成骨肉瘤较为有效的方法.     

S100A4蛋白在骨肉瘤中表达及其与肿瘤侵袭转移的关系

目的探讨S100A4蛋白的表达与骨肉瘤的侵袭转移的关系。方法应用免疫组织化学方法检测61例骨肉瘤患者和15例骨软骨瘤患者的S100A4蛋白表达情况,分析其与骨肉瘤临床病理特征的关系。结果 S100A4蛋白在骨肉瘤中的表达阳性率75.4%,明显高于骨软骨瘤患者的13.3%(P<0.05)。S100A4的表达与病理分型和肺转移显著相关,随着肺转移的发生,S100A4表达量增高(P<0.05);但与患者的性别、年龄、肿瘤部位和临床分期无关。结论 S100A4表达增强与骨肉瘤侵袭转移有关,可能成为判断骨肉瘤恶性程度及预后指标。     

BEP方案联合重组人血管内皮抑素治疗睾丸卵黄囊瘤1例

套细胞淋巴瘤于1992年由Banks在国际会议上首次提出,由非典型小B淋巴细胞组成,广泛围绕正常生发中心,套区增宽(起源于淋巴结滤泡套区内的小B细胞),故称为套细胞淋巴瘤,占非霍奇金淋巴瘤的5％～10％,具有独特的生物学特征,兼具惰性和侵袭性淋巴瘤的最差特征.结外孤立病灶为首发症状的套细胞淋巴瘤鲜有报道,现将我院收治的1例以肘部孤立包块为首发症状套细胞淋巴瘤患者的诊治情况报告如下.     

胸腰椎神经鞘瘤手术治疗的临床分析

目的　探讨胸腰椎神经鞘瘤应用后正中入路实施一期肿瘤切除手术的疗效及并发症。方法　２００１年至２０１０年我科收治胸腰椎椎管内神经鞘瘤患者３９例,其中男性２５例,女性１４例;年龄１４～７２岁,平均年龄４１.５岁;发病部位：胸段椎管１７例,胸腰段椎管４例,腰段椎管１５例,腰骶段椎管３例,均为单发。手术均取后正中切口,切除相应节段的小关节突和椎板,一期切除椎管内外的神经鞘瘤,部分患者行椎弓根螺钉内固定。结果　３９例手术均完整切除肿瘤。随访时间为１０～６９个月,平均３５个月。１例良性神经鞘瘤术后局部复发,１例恶性神经鞘瘤患者术后１７个月因复发及肺转移死亡。２２例存在感觉障碍的患者术后ＡＳＩＡ感觉评分平均提高１.６分。１０例存在运动障碍的患者术后ＡＳＩＡ运动评分提高７例,平均提高２.５分。未行内固定的６例患者中术后有２例发生脊柱失稳。结论　胸腰椎神经鞘瘤切除术中需确保术野足够显露,必要时可切除一侧的横突和肋骨头,为勉强保留神经根而忽略肿瘤切除的彻底性可能带来较高的局部复发率和相应增高的再次手术率。除肿瘤位于中段胸椎管外,术中均应通过确切的内固定和植骨融合来维持远期的脊柱稳定性。     

骨形态发生蛋白在大段同种异体骨移植中的表达

目的:通过动物实验来探讨骨形态发生蛋白在大段同种异体骨移植愈合中的表达及其意义。方法:实验于2005-10/2006-01在南京军区总院动物实验中心完成。①24只新西兰大白兔随机分为实验组和对照组各12只。实验组,手术移植用梯度降温深低温保存的同种异体兔股骨半髁植入,以金属螺钉固定;对照组将取下的自体股骨半髁原位植入,用与实验组相同的内固定方法固定。②术后4,8,12周取标本行大体标本观察,苏木精-伊红及骨形态发生蛋白免疫组织化学染色,观察骨形态发生蛋白在大段同种异体骨愈合过程的表达情况。结果:24只兔均进入结果分析。①两组移植骨段大体观察:第12周,实验组与对照组移植骨段已与宿主完全连接成一整体,外周骨痂已塑形。②两组自体骨与异体骨苏木精-伊红染色结果:第12周,实验组自体骨与异体骨间见较多成熟骨小梁,自体骨与异体骨连接处髓腔基本融合,于异体骨外侧新形成皮质骨结构。对照组已形成新皮质结构,有大量成熟的骨小梁结构,髓腔基本融合。③骨形态发生蛋白免疫组织化学染色结果:第4周:实验组皮质骨外周见较强的骨形态发生蛋白表达,阳性染色主要位于不成熟的骨细胞、成骨细胞、软骨细胞的胞浆及其分泌的基质中,表明骨形态发生蛋白通过“旁分泌”和“自分泌”的形式使得间质细胞分化为软骨细胞和骨细胞。对照组骨折断端两侧均有骨形态发生蛋白表达。第8周:异体皮质骨周围的骨痂中可见阳性表达,新形成的管状结构中呈“镶边”样排列的成骨细胞为阳性表达,其周围尚有一些软骨细胞核阳性表达。对照组与实验组相似,新生血管和新骨生成较实验组为多。第12周:实验组及对照组骨形态发生蛋白表达均较少。深低温保存的同种异体骨移植过程中骨形态发生蛋白表达与自体骨相似。骨形态发生蛋白染色在新生骨及其周围类基质表达阳性。结论:①骨形态发生蛋白在同种异体骨移植愈合早期起重要作用,其通过“旁分泌”和“自分泌”的形式使得间质细胞分化为软骨细胞和骨细胞,从而促使新骨形成。②大段同种异体骨移植愈合早期(4周)过程中骨诱导与骨吸收同时存在时,骨形态发生蛋白发生重要作用。