复方甘草甜素治疗慢性乙型肝炎临床疗效观察

复方甘草甜素(美能 ,日本美能发源制药公司 )是以甘草中的活性物质———甘草甜素为主要成分的强力肝细胞膜保护剂 ,在日本作为慢性肝炎的标准治疗药物已被长期、广泛应用。在我国也曾有报道 ,认为该药在肝病治疗上确有显著疗效。为了进一步探讨该药的临床疗效及其应用规律 ,笔     

重症SARS的临床特点和胸部X线表现

目的总结和观察重症SARS的临床特点和胸部X线表现.方法对我院经临床诊断为重症SARS的24例患者的临床和胸部X线资料进行回顾性分析.结果 24例重症SARS患者中高热24例(100%),呼吸困难23例(95.8%),干咳19例(79.2%),胸闷、胸痛17例(70.8%).2例合并肝炎,1例合并糖尿病,1例同时伴有妊娠.外周血白细胞均正常或降低、淋巴细胞明显降低、低氧血症.胸部X线表现呈斑片状或小片状阴影15例(62.5%),大片状阴影5例(20.8%)及磨玻璃影9例(37.5%),肺纹理增粗11例(45.8%);肺部病灶位于两肺者18例(75%),其中病灶位于两中、下肺野者15例(62.5%),2例(8.3%)同时并发肺不张;肺部病灶位于一侧肺者6例(25%).病情未得到有效控制时,病灶24～48h内进展＞50%者14例(58.3%),且具有游走性.所有患者病灶吸收时间相对于非重症SARS明显延长,平均吸收时间为19d.8例(33.3%)肺部渗出性病灶吸收后肺内有不同程度的纤维化改变.结论重症SARS具有发热、咳嗽和呼吸困难以及外周白细胞正常和降低,CD4T淋巴细胞明显降低和低氧血症等特点.肺部X线表现以两中下肺野多叶多段、大小片状影为主;游走性及磨玻璃样影多见.     

大鼠TIMP1 miRNA慢病毒RNAi载体的构建及其对HSC-T6细胞TIMP1表达影响的研究

目的构建大鼠TIMP1 miRNA慢病毒RNAi载体，并观察其转染HSC-T6细胞后对TIMP1基因表达的影响。方法根据BLOCK-iT Poll miR RNAi Expression System with EmGFP要求，应用在线miRNA设计工具http：//maidesigner．invitrogen．com／maiexpress／，针对大鼠TIMP1基因（GenBank：U06179）的598位点设计、合成Oligo DNA，退火形成双链DNA后，与载体pcDNA TM^6．2-GW／EmGFP-miR连接，转化Top10感受态细胞，构建TIMP1 miRNA慢病毒RNAi载体。经PCR扩增及测序鉴定正确后，以脂质体Lipofectimine TM^2000介导转染经TGF-β1刺激的大鼠肝星状细胞株HSC-T6，24、48、72h后收集细胞，应用RT-PCR鉴定TIMP1的表达情况。结果经PCR及测序鉴定构建的TIMP1 miRNA慢病毒RNAi载体正确；将其转染经TGF-β1刺激的大鼠肝星状细胞株HSC-T6，48h即可见TIMP1 mRNA表达量下降，72h检测不到TIMP1 mRNA的表达，而未转染组及转染pLacZ-miR／GFP（阴性对照）组未见此改变。结论成功构建大鼠TIMP1 miR—NA慢病毒RNAi载体pTIMP1-miR／GFP；pTIMP1-miR／GFP使大鼠肝星状细胞株HSC-T6TIMP1基因沉默。提示了RNA干扰可使肝纤维化形成过程中的关键因子TIMP1基因沉默，为RNA干扰技术进一步应用治疗大鼠肝纤维化模型奠定了基础。     

SARS患者合并肺纤维化的影像学随访

目的探讨SARS患者并发肺纤维化的程度和发生率.方法对确诊的44例SARS患者进行影像学随访观察,包括摄胸部X线及CT扫描检查.结果44例SARS患者中,24例在住院时期有不同程度的肺部纤维化改变,其中19例重症病例中15例出现肺纤维化,25例普通型中9例并发肺纤维化(P＜0.05).出院时,12例(27%)存在肺纤维化.随访1个月、3个月、6个月及12个月时,分别有5例(11%)、3例(6%)、2例(4%)及2例(4%)两肺见纤维条索状影.结论肺纤维化是SARS患者较常见的并发症,重症较普通型者易发生肺纤维化,而且程度较重,吸收慢.     

基因芯片技术在乙型肝炎病毒分型和耐药突变检测中的应用

目的通过基因芯片检测系统，快速检测临床样品中乙型肝炎病毒的基因亚型和耐药突变情况。方法用基因芯片法检测352例临床样品，对慢性乙型肝炎患者感染的HBV亚型及耐药情况进行分析。结果在352例临床病例中，共检出耐药突变病例124例，检出率为35．7％。发现3种基因亚型，其中B型222例，占63．8％；C型115例，占33．0％；D型1例，占0．3％；B、C混合感染9例，占2．6％；型别未分1例，占0．3％。结论PCR与膜芯片杂交技术可检测乙型肝炎病毒基因亚型及耐药突变类型，并具有快速、高通量、敏感的特点，适合各临床医院开展应用。     

肺结核患者结核分支杆菌EIS抗原特异性细胞免疫的临床研究

目的 探讨肺结核患者结核分支杆菌EIS抗原特异性细胞免疫水平与病情的关系。方法 选择30例初治、痰涂片结核杆菌阳性的活动性肺结核患者，采用比色法测定其外周血淋巴细胞对结核分支杆菌EIS抗原的增殖反应，酶联免疫吸附法测定细胞分泌的γ-干扰素（IFN-γ）及白细胞介素-10（IL-10）的水平，并与20名健康对照者和16例康复的肺结核患者进行比较。结果 康复者对EIS的细胞免疫最为强烈，其外周血淋巴细胞的细胞增殖强度显著高于健康对照者和活动性肺结核患者（P均〈0．01）。活动性肺结核患者外周血淋巴细胞在受到EIS刺激时分泌的IFN-γ显著低于康复者（P〈0．05）。EIS抗原刺激主要诱导细胞分泌Th2型细胞因子IL-10。结论 活动性肺结核患者对EIS抗原的细胞免疫水平低下，经抗结核治疗康复后，细胞免疫维持在较高水平。EIS抗原诱导Th1／Th2免疫失衡可能是EIS参与结核发病的机制之一。     

结核病患者血浆和胸水中白介素6水平及其临床意义

目的通过检测结核病患者血浆及胸水中白细胞介素6（IL-6）的浓度变化情况,探讨IL-6与结核菌感染的临床转归、疾病严重程度的关系。方法用ELISA法检测30例健康体检者、30例潜伏感染者、30例活动性肺结核患者、20例结核性脑膜炎患者及20例结核性胸膜炎患者血浆和胸水中的IL-6的浓度。结果肺结核患者血浆中IL-6水平明显高于健康对照组及结核潜伏感染者（P〈0.01,P〈0.01）;结核性胸膜炎患者血浆中IL-6水平明显高于肺结核患者（P=0.0029）;结核性胸膜炎患者胸水中的IL-6显著高于相应血浆中IL-6水平（P〈0.0001）。结论 IL-6与结核菌感染的临床转归、结核病严重程度相关,是局部病灶炎症反应的重要作用因子。     

CD59在艾滋病感染者CD4^＋T细胞表达及凋亡的影响

目的探讨补体调节蛋白CD59在艾滋病（HIV）感染者外周血CD4^＋T细胞上的表达及与凋亡之间的关系。方法收集12例确诊HIV感染者外周血标本（观察组）,同时收集10例健康对照者外周血标本（对照组）。分离外周血单个核细胞（PBMC）,并进行细胞表面染色。使用BDFACSCanto流式仪检测各项指标,采用FACSDiva软件分析CD4^＋T细胞CD59的表达情况,并分析CD59^＋CD4^＋T、CD59^-CD4^＋T细胞的凋亡情况。结果观察组CD4^＋T细胞CD59表达明显高于对照组（t=5．198,P〈0．01）;CD59＋CD4^＋细胞凋亡比率明显升高（t=5．968,P〈0．01）;而CD59^-CD4^＋T细胞的凋亡比例二组间差异无统计学意义（t=0．1353,P=0．8577）。结论HIV感染可引起CD4^＋T细胞补体调节蛋白CD59的表达,而CD59的表达会使CD4^＋T细胞凋亡增加。     

结核分枝杆菌IFN-γ酶联免疫斑点检测在结核诊断中的应用

目的采用结核分枝杆菌特异性IFN-γ酶联免疫斑点（简称Elispot）检测技术对不同的人群进行检测,评价其在结核诊断中的应用情况。方法290例结核病人（结核组）,其中肺结核221例中痰抗酸染色（AFB）阳性者89例,AFB阴性者132例;同时选取133例健康志愿者为健康组。采用自行建立的Elispot技术对2组外周血结核菌特异性IFN-γ水平进行检测;对11例结核病人和10例健康者同时采用T-SPOT.TB试剂盒进行平行检测。结果Elispot反应阳性率结核组为83.79%,显著高于健康组的16.54%（P〈0.001）;AFB（＋）肺结核病人阳性率为89.89%,AFB（—）肺结核病人阳性率为81.06%,两者差异无显著性意义（P〉0.05）。T-SPOT.TB与Elispot平行检测阳性率比较,差异无显著性意义（P〉0.05）。结论结核菌特异性IFN-γElispot检测技术在结核诊断中显示出较好的特异性和敏感性,可作为临床结核病诊断的辅助手段。     

涂阳活动性肺结核患者HRCT评分与细菌学及免疫学相关性分析

目的探讨HRCT评分标准在诊断活动性肺结核中的应用价值。方法对42例痰涂阳性肺结核患者,进行HRCT检查和评分,每侧肺组织划分为为三个区域,分别对各类型CT征象所累及范围进行评分;分析评分结果与痰细菌学检查结果和外周血结核菌特异性IFN—y水平之间的相关性。结果根据结核菌涂片结果分为4组,其中,AFB（＋）12例、AFB（＋＋）11例、AFB（＋＋＋）10例、AFB（＋＋＋＋）9例,相关性分析显示（1）HRCT总评分与痰阳性分级有正相关性（r=0．9661 P〈0．0001）：（2）HRCT总评分与结核菌抗原ESAT6、P4-6、P8．10特异性IFN—y释放水平均呈正相关（r=0．4805,P=0．0017,r=0．4451,P=0．0083,r=0．4211,P=0．0131）。结论以活动性肺结核患者复杂的CT征象的范围为基础的HRCT评分标准与细菌学及免疫学均呈正相关,表明该HRCT评分标准对临床诊断治疗和疗效判定具有一定指导意义。