AIF重组质粒的构建、表达和功能的研究

目的构建人凋亡诱导因子(AIF)基因功能片段的真核表达载体pcDNA3.1( )AIF,并初步研究AIF在细胞凋亡中的作用。方法从人细胞中提取总RNA,RTPCR扩增AIF基因片段;克隆到pMD18T载体上,通过酶切和测序进行鉴定;将AIF基因片段插入pcDNA3.1( ),构建真核表达载体;电转化淋巴母细胞Raji细胞,观察AIF的表达水平和功能。结果成熟AIF蛋白分子在真核细胞中表达,并转移到细胞核中,诱导Caspase非依赖性细胞凋亡。结论成功构建了pcDNA3.1( )AIF真核表达载体,AIF在Caspase非依赖性细胞凋亡中发挥重要作用。     

四物合剂并逍遥丸治疗黄体功能不全59例

黄体功能不全是妇科临床的常见病、多发病.笔者 2003年 1月～ 2004年 6月采用四物合剂并逍遥丸为主治疗黄体功能不全 59例,疗效满意.现报告如下.     

硅胶柱色谱/RP-HPLC/LC-ESI-MS分离纯化鉴定拳卷地钱中芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷

目的:建立分离纯化鉴定拳卷地钱中芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷的硅胶柱色谱/RP-HPLC/LC-ESI-MS方法.方法:拳卷地钱叶经过80%乙醇提取后,减压蒸馏,得粗提物.拳卷地钱叶粗提物用甲醇溶解后上硅胶柱,用甲醇-氯仿配比为25:1,25:2,25:3……2:25,1:25混合溶液洗脱,各洗脱液进行RP-HPLC分析,较纯的洗脱液进行LC-ESI-MS分析,为制备分离黄酮类化合物单体提供指导.结果:氯仿与甲醇配比为25:15、25:16、25:17、25:18的洗脱液经过RP-HPLC分析为单一组分,tR为12.1min,与对照品芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷共注射进行RP-HPLC实验,发现峰高增加,tR为12.1min,UV[λmax为336/296(sh)/267nm]和IR光谱与芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷基本一致.LC-ESI-MS测定结果表明,与对照品芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷的分子量相同为446.结论:由此可以鉴定该洗脱组分为芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷.     

中医治疗糖尿病的用药思路与方法

糖尿病是一种常见的代谢内分泌疾病。近20年来,由于改革开放,经济发展,生活方式的改变,体力活动减少,缺乏体育锻炼,营养不合理(包括过剩与缺乏)的影响,我国糖尿病和糖耐量减退的患者增长迅速,而且还有继续增加的趋势。糖尿病总人数已由700余万增至2600多万。因此,加强对糖尿病病人的宣传教育,做好糖尿病的防治工作是一件大事。中医有消渴病,包括现代医学中的糖尿病和尿崩症。中医治疗糖尿病,对糖尿病及并发症状改善有独特的疗效,其降糖作用尚不够理想,有待进一步研究提高。经过我们多年研究与临床实践,总结出以下7个用药思路。中医辨证与西…     

羟基喜树碱对兔毒性作用的研究

目的 以兔为实验对象研究抗癌药羟基喜树碱的毒性作用与剂量的相关性，为进一步对羟基喜树碱毒性作用的防治研究提供科学参考资料。方法 选择新西兰兔，经耳廓静脉连续注射羟喜17天，观察不同剂量对兔免疫功能、肾脏、肝脏和心脏的毒性作用及生化指标的变化。结果 羟基喜树碱可引起兔明显腹泻及IgG、ICM、ALT、WBC、RBC等指标的异常变化。结论 羟喜可引起兔明显的肝组织、免疫功能和造血功能的损伤，明显的腹泻和轻度心脏毒性。但对其损伤机制有待进一步研究。     

食管斜切口加覆大网膜预防吻合口狭窄的临床观察

目的：探讨食管癌切除后预防胃食管吻合口狭窄发生的方法，以提高术后的生存率。方法：用食管斜切口加覆大网膜的手术方法施术的330倒患者预防吻合口狭窄的分析。结果：用食管斜切口加覆大网膜的手术方法进行食管癌切除330例患者，术后随访186倒，随诊率56.36％，随访期6月-2年；经行钡剂造影等检查。有5例食管胃吻合口狭窄，吻合口狭窄的发生率1．50%。结论：用食管斜切口加覆大网膜的手术方法可以预防吻合口狭窄。本手术操作简单适用性广，不失为一种可取的手术方法。     

苦丁茶中熊果酸的分离纯化研究

 目的研究苦丁茶(Ilex kudingcha C.J.Tseng)中熊果酸的分离纯化,建立分离纯化工艺条件,以利于苦丁茶资源的开发利用。方法以熊果酸浸出率为考核指标,采用正交实验法考察诸因素对浸出率的影响。乙醇提取液经沉淀富集和大孔树脂柱色谱纯化得到熊果酸,采用HPLC分析检测。结果优化的提取条件为:在85℃水浴中,以体积分数90％乙醇水溶液为提取溶剂。固液比为1:14,提取2次,每次提取2.5h,熊果酸的浸出率可达到1.44％。D₈树脂分离富集的最优条件:样品溶液熊果酸浓度1～2 mg·mL^-1,样品溶液pH=6.0～7.0,吸附1h,洗脱剂pH=11.0,依次用水、4倍体积30％乙醇、4倍体积90％乙醇以2～3mL·min^-1的流速洗脱,收集90％乙醇洗脱液,熊果酸回收率为97.82％,纯度为95.0％。结论 该工艺产品纯度高,收率高,可实现工业化。     

针刺对吗啡戒断后焦虑模型小鼠脑去甲肾上腺素和血乳酸含量影响的研究

目的:探讨针刺对吗啡戒断后焦虑模型小鼠的抗焦虑作用机制.方法:以小鼠热板法镇痛ED50,即吗啡2.95mg/kg为基础,按照逐日递增原则进行吗啡戒断后焦虑小鼠模型造模.针刺三阴交后,分别采用荧光法、分光法检测脑内去甲肾上腺素(NE)和血乳酸的含量.结果:模型组小鼠脑NE的含量比对照组和迷宫空白组明显升高(P＜0.05,P＜0.01),针刺可明显降低模型小鼠脑内NE的含量(P＜0.05);各组之间血乳酸含量未见明显差异(P＞0.05).采用吗啡依赖戒断后焦虑模型,观察了针刺对吗啡模型小鼠脑内NE和血乳酸的影响作用,为初步揭示针刺抗吗啡戒断后焦虑的作用机理提供依据.结论:针刺对吗啡戒断后的抗焦虑效应可能与针刺调节焦虑模型小鼠脑内NE的释放有关.     

逍遥滴鼻液对实验性偏头痛模型大鼠c-fos基因表达的影响

目的 :研究逍遥滴鼻液通过鼻腔给药对实验性偏头痛模型大鼠c fos基因表达的影响 ,探讨逍遥滴鼻液治疗偏头痛的作用机理。方法 :将 6 0只Wistar大鼠随机分为 6组 ,即正常对照组、模型组、生理盐水滴鼻组、太极通天口服液组、逍遥滴鼻液灌胃组及逍遥滴鼻液滴鼻组 ,根据文献方法改进 ,用硝酸甘油 9.5mg·kg-1剂量皮下注射复制偏头痛模型 ,用免疫组化SABC法观察c fos基因表达的阳性细胞数、面积及灰度 ,并进行组间比较。结果 :逍遥滴鼻液滴鼻组大鼠脑干、下丘脑中的c fos表达阳性细胞数目和面积显著低于逍遥滴鼻液灌胃组和太极通天口服液灌胃组。结论 :逍遥滴鼻液能显著抑制c fos的表达 ,其作用机理可能是干预c fos产生的某个环节 ,在作用效果上优于太极通天口服液 ,鼻腔给药优于灌胃给药