CYP2B6基因表达质粒的构建及在大肠杆菌中的表达

目的:构建CYP2 B6基因原核表达质粒,在大肠杆菌[Rosetta2(DE3)pLysS]中高效表达重组蛋白。方法:以质粒为模板,用PCR技术扩增出CYP2 B6基因,并将其分别插入pET-22b( )、pET-28b( )和pET-32a( )质粒中,经PCR、测序鉴定后,转化Rosetta2(DE3)pLysS,并用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达。结果:经PCR、测序鉴定,构建了CYP2 B6基因表达质粒;采用考马斯亮蓝染色法检测重组蛋白表达,pET-22b( )-CYP2 B6未见目的蛋白表达;pET-28b( )-CYP2 B6有目的蛋白表达,约占蛋白总量的5%;而pET-32a( )-CYP2 B6可以高效地表达CYP2 B6,在低浓度(50μmol/L)IPTG诱导3 h后,所表达的CYP2 B6蛋白约占细菌总蛋白的30%;质谱分析结果进一步证实所表达的蛋白为CYP2 B6。结论:成功地使CYP2 B6基因在原核系统中高效表达。     

核酶对肝癌SMMC-7721细胞端粒酶活性及凋亡的影响

目的:观察针对人端粒酶RNA模板区的核酶对肝癌细胞端粒酶活性和细胞凋亡的影响。方法:利用脂质体Lipofectamine介导,将已构建好的带有端粒酶核酶基因的重组质粒pBBS212Rz及空载质粒pBBS212转染肝癌SMMC-7721细胞,采用TRAP-ELISA法检测端粒酶活性,用倒置相差显微镜及流式细胞仪观察细胞生长和凋亡情况。结果:重组质粒pBBS212Rz转染的肝癌SMMC-7721细胞的端粒酶活性明显下降,细胞生长速度明显变慢,凋亡加速。结论:端粒酶核酶对肝癌细胞端粒酶活性和细胞生长有抑制作用,可望成为肝癌基因治疗的方法。     

低场MR、DWI、和FLAIR对急性脑梗死20例的诊断

目的评价低场MR弥散加权成像（DWI）和液体衰减翻转恢复序列（FLAIR）在急性脑梗死诊断中的价值。方法用0.2TMR扫描仪对20例急性脑梗死患者进行DWI和FLAIR检查,评价病变的显示范围、边界、与周围组织的对比度、检出病灶的数目及病灶的大小。结果DWI和FLAIR对病变的显示范围、与周围组织的对比均优于常规T2WI,除小脑梗死外,发病时间〈24 h的,以DWI对病变显示更佳;〉24 h的,DWI与FALIR显示病灶大小无明显差异。结论DWI和FLAIR在急性脑梗死诊断中均优于常规T2WI序列,发病时间〈24 h的,以DWI显示病灶最好,对靠近颅底的急性梗死病变,FLAIR优于DWI。     

酒精依赖和戒断时大鼠大脑奖赏回路不同脑区孕烯醇酮及其硫酸酯水平的变化

目的 采用大鼠酒精依赖模型,观察酒精依赖及戒断对大鼠伏隔核、前额叶皮质、杏仁核、海马中神经甾体孕烯醇酮(pregnenolone,PREG)、孕烯醇酮硫酸酯(pregnenolone sulfate,PREGS)水平的影响.方法 大鼠自由饮用含6%的乙醇溶液,连续42 d使大鼠形成酒精依赖,并撤除酒精使其自然戒断.断头取脑分离取出伏隔核、前额叶皮质、杏仁核、海马脑区.使用液液萃取和固相萃取两步法提取脑组织中的PREG、PREGS,以高效液相色谱-质谱联用法测定神经甾体含量.结果 与对照组相比,酒精依赖大鼠伏隔核PREG、PREGS的水平显著降低(P＜0.05),额叶皮质、杏仁核和海马PREGS的水平显著下降(P＜0.05);酒精戒断6、24 h大鼠伏隔核、额叶皮质、杏仁核和海马PREGS的水平显著降低(P＜0.05);酒精戒断24 h大鼠海马PREG水平显著上升(P＜0.05).结论 酒精依赖形成和戒断对伏隔核、前额叶皮质、杏仁核、海马的神经甾体水平具有不同影响.     

低频交变磁场对小鼠骨髓细胞微核率的影响

目的 :研究低频交变磁场对小鼠骨髓嗜多染红细胞微核率的影响。方法 :用强度为 10mT和 15mT的低频交变磁场作用于小鼠后 ,检测其骨髓嗜多染红细胞微核率。结果 :经强度为 10mT的低频交变磁场作用后的小鼠微核率与阴性对照组比较无显著性差异 ,而强度为 15mT的实验组较阴性对照组微核率有明显增高 (P <0 .0 5 ) ,较阳性对照组有非常显著性差异 (P <0 .0 1)。结论 :当小鼠受到 15mT的低频交变磁场作用时 ,细胞微核率增加 ,可能会致突变。     

从加强素质教育着手做好七年制教学改革

为了达到使学生扩充知识、加强能力、提高素质,培养高层次临床医学人才的目的,我们对七年制临床医学专业生理学教学,从加强素质教育入手,在教学内容、教学方法等方面行了较大幅度的改革,取得了较好的教学效果。     

先天性神经母细胞瘤尸检2例

先天性神经母细胞瘤极为少见 ,本院尸检中发现 2例 ,报道如下。例 1男 ,生后 2 0天 ,体重 3 1 0 0ｇ。腹腔肿物急剧增大 2 0天 ,此间曾 3次就诊 ,诊断不明。此次就诊时 ,患儿高热 40℃ ,呼吸急促 ,哭叫不宁 ,频频惊厥。皮肤苍白 ,腋窝及腹膜沟处能扪及花生米大小淋巴结数个。腹部膨大 ,腹壁静脉曲张 ,肝肿大 ,右叶已入盆腔 ,左叶下缘抵左髂骨最高点 ,肝表面扪及密布如黄豆大小之结节。以“贫血、肝脾肿大待查”急诊入院。入院后抢救无效死亡。图 1　神经母细胞瘤细胞及菊形团ＨＥ× 40尸检 :腹腔为肿大之肝脏所占据 ,肝下缘在盆腔 ,肝重 980…     

宫颈活检组织中单纯疱疹病毒2型(HSV-2)抗原的检测意义

目的　探讨宫颈癌与HSV 2型感染的关系。方法　免疫组化法、ELISA。结果　用免疫组化法对 37例宫颈癌病理标本 ,10例宫颈不典型增生标本和 2 5例慢性宫颈炎标本进行HSV 2抗原的检测。宫颈癌组中有 32例检出HSV 2抗原 ,不典型增生组和慢性宫颈炎组分别有 7份和 9份检出HSV 2抗原。三组的抗原检出率分别是 86 4 %、70 0 0 %和 36 0 0 %。三组间相比较 ,宫颈癌组与慢性宫颈炎组之间 ,不典型增生组与慢性宫颈炎组之间 ,结果均有显著性差异 (p <0 .0 5 ) ,宫颈癌组与不典型增生组抗原阳性率比较 ,差异无显著性 (p >0 .0 5 )。结论　HSV 2感染与宫颈癌有密切关系。     

重复经颅磁刺激安全性的初步研究

目的 探讨重复经颅磁刺激的安全性。方法 对接受不同刺激频率和刺激量组经颅磁刺激大鼠的行为、组织病理形态、血清髓鞘碱性蛋白（MBP）及神经元特异性烯醇化酶（NSE）含量进行观察。结果 低频刺激组（5Hz）和高频刺激组（20Hz）在刺激过程中均未出现异常活动,无肢体强直、阵挛等,脑组织形态学包括大体观察、普通光镜改变不明显,其血清MBP和NSE含量与正常对照组比较,无显著性差异（P＞0．05）。结论 在一定强度和频率内经颅磁刺激是比较安全的。     

大鼠胚胎期暴露GSM 900MHz射频场滚动轴测试

目的探索GSM 900MHz电磁场暴露引起的健康危害.方法整个实验采用双盲研究的方法.暴露和对照组各20共40只仔鼠,每组雌雄各半.成年后(16周龄),采用计算机辅助的四个滚动轴程序进行测试.结果暴露和对照仔鼠出生日期、大小、性别比、体重的增加;以及发育指标:开眼、耳廓分离、门齿萌出、平面翻正反射、阴道开启和睾丸下降等两组间没有显著性差异(P ＞0.05);胚胎期暴露和对照组间雌雄运动协调性成绩没有显著性差异(P＞0.05).结论本实验没有证实胚胎期EMF(900MHz,功率密度0.1mW/cm2)暴露对大鼠CNS发育的危害.