免疫组织化学方法在肺癌病理诊断中的应用

应用免疫组织化学方法,观察低分子细胞角蛋白（ＣＫ－ＬＭＷ）、神经烯醇化酶（ＮＳＥ）、嗜铬粒蛋白（ＣｇＡ）、突触泡蛋白（Ｓｙｎ）和α_１－抗胰蛋白酶（α_１－ＡＴ）在细支气管肺泡癌、肺乳头状腺癌、肺大细胞癌癌组织中的表达。结果发现,三型肺癌均有神经内分泌分化,细支气管肺泡癌和乳头状腺癌具有多种细胞分化成分。结果支持肺癌细胞来源于共同干细胞的假说。同时说明,在肺癌病理诊断上,免疫组织化学方法具有较为实用的价值。     

低氧诱导因子-1α和环氧合酶-2及血管生成素-2蛋白在非小细胞肺癌中的表达及临床病理意义

目的探讨非小细胞肺癌（NSCLC）中低氧诱导因子-1α（HIF-1α）、环氧合酶-2（Cox-2）与血管生成素-2（Ang-2）蛋白表达的相关性及临床病理意义。方法免疫组化SP法检测NSCLC中HIF-1α、Cox-2、Ang-2表达情况。结果46例NSCLC组织中HIF-1α、COX-2、Ang-2的阳性表达率明显高于癌旁肺组织（P〈0．05），与患者的年龄、性别、吸烟史、分化程度及组织学类型无明显关系（P〉0．05）；HIF-1α和Ang-2表达与淋巴结转移无明显关系（P〉0．05），但COX-2的表达与淋巴结转移有关（P〈0．05）；HIF-1α的表达与COX-2、Ang-2的表达呈正相关。结论HIF-1α、Cox-2、Ang-2在NSCLC中呈过表达，HIF-1α的表达与COX-2、Ang-2的表达呈正相关，HIF-1α可能通过调控Cox-2、Ang-2的表达，与NSCLC肿瘤血管的生成及预后有关。     

缺氧诱导因子1α在肝癌中的表达及意义

目的检测肝癌组织及培养的肝癌细胞株HepG2细胞中缺氧诱导因子1α（HIF1α）的表达及意义.方法用免疫组织化学、Western blot和逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）法检测肝癌和正常肝组织及HepG2细胞中HIF1α蛋白质和mRNA的表达,并分析其与肝癌病理特点的关系.结果免疫组织化学显示HIF1α在肝癌组织中表达明显,阳性率达76.4%,显著高于正常肝组织;其表达与肿瘤的分化程度、有无癌栓有关（P＜0.05）,而与门静脉癌栓、乙型肝炎表面抗原及预后无关（P值均＞0.05）;Western blot 和RT-PCR检测结果与免疫组织化学结果一致.HIF1 α在HepG2细胞中表达的阳性率为93.6%.缺氧或加二氯化钴（150μmol/L）作用2 h后HIF1 α蛋白质及mRNA表达增加.结论HIF1α蛋白质在肝癌中表达明显,在癌组织中表达主要受氧的调节,与肿瘤分化程度及有无转移有关,而与有无门静脉癌栓、乙型肝炎表面抗原表达及预后无关.     

心钠素对神经肽Y刺激培养的血管平滑肌细胞蛋白合成的影响

为研究高血压时肽类神经激素与血管壁结构改变之关系，应用自发性高血压大鼠（SHR）及Wistar大鼠动脉平滑肌细胞（SMC）培养以及3H－胸腺嘧啶核苷、3H－亮氨酸掺入方法，观察到用神经肽Y（NPY）作用48h后可促进SHR离体培养的血管SMCDNA合成增加28．0％，蛋白会成增加54．6％（与血清对照组比较），而细胞数无明显增加。当同时加入心钠素（ANP）后，正常血压大鼠中DNA和蛋白合成分别下降42．3％和44．3％，而SHR中仅分别降低11．4％和10．6％。结果表明NPY可促进血管SMC肥大（蛋白含量增加40％即表明细胞肥大），ANP可拮抗NPY促细胞肥大效应，但在SHR中ANP对血管SMC的调节作用减弱是引起细胞肥大的重要原因之一。     

神经肽Y对培养的自发性高血压大鼠动脉平滑肌细胞的影响

应用细胞培养，＾３Ｈ－胸腺嘧啶核苷和＾３Ｈ－亮氨酸的掺入及细胞计数方法，研究缩血管物质神经肽Ｙ对血管平滑肌细胞生长的作用。结果发现，用神经肽Ｙ作用４８ｈ后可促进离体培养的自发性高血压大鼠动脉平滑肌细胞ＤＮＡ合成增加２８．０％，蛋白质合成增加５４．６％，与对照组比较有显著性差异；而细胞数无明显增加。     

骨巨细胞瘤组织中p53和VEGF表达的意义

目的:探讨p53、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的表达与骨巨细胞瘤血管新生、肿瘤增殖、转移及复发的关系。方法:采用免疫组化法检测82例骨巨细胞瘤标本p53、VEGF、增殖细胞核抗原(proliferation cell muclear antigen, PCNA)、CD34表达,分析其与骨巨细胞瘤转移、复发的关系。结果: p53、VEGF 的阳性率分别为31 70%、57. 32%。VEGF阳性组p53阳性率为44. 68 %,增殖指数(proliferation index,PI)值、微血管密度(microvessel density, MVD)值分别为(55. 81±23 .42)%和(35. 17±12. 58)条,VEGF阴性组p53阳性率为14 .29 %, PI 值、MVD 值分别为(42 .41±25 .43)%和(24. 69±8 .66)条,不同VEGF表达组间p53表达、PI值、MVD值差异有统计学意义,P<0 .05(P值分别为0 .003、0 .016和0 .000),且MVD值、PI值与VEGF表达强度正相关,P<0 .05 (P值分别为0 .000和0 .004)。复发组VEGF、p53的阳性率分别为75 .86%和48. 28%,未复发组VEGF、p53的阳性率分别为47. 17%和22 .64%,两组间VEGF、p53的表达差异有统计学意义,P<0 .05(P值分别为0. 012和0. 017)。多因素logistic回归分析显示,VEGF、p53及手术方式对复发有显著影响,P<0 .05(P值分别为0 .027、0 .033和0 .009)。其中VEGF、p53为促进肿瘤     

大鼠大脑新皮质组织移植后免疫组织化学及辣根过氧化物酶追踪的研究

采用李15～17天的Wistar大鼠胎脑新皮质组织移植到同种幼鼠大脑新皮质的相应区。分别手术后7、15、30、60、150天应用免疫组织化学和辣报过氧化物酶（HRP）追踪观察移植物存活、生长分化及其与宿土脑的整合和神经纤维联系的相关性。结果表明，大部分移植物内的幼稚神经兀不仅能存活，且能生长分化直至成熟，其形态结构和宿上脑神经允相似，移植物和宿主脑界面建立不同程度的整合，部分存活的移植物和宿上脑间形成纤维径路联系。     

姜黄素对胃癌细胞株凋亡抑制蛋白家族及Smac基因表达的影响

目的　观察姜黄素(curcumin) 对人胃癌细胞株凋亡抑制蛋白(IAP) 家族和Smac基因表达的影响, 探讨姜黄素诱导胃癌细胞凋亡的分子机制。方法　10~40μmol/L 姜黄素分别处理胃癌细胞株MKN -45 6~24 h后, MTT比色法检测癌细胞生长活性, 末端TdT酶标记技术和DNA Ladder检测细胞凋亡; 逆转录聚合酶链反应(RT PCR)和Western blot法检测IAP家族(Survivin、XIAP) 和Smac基因表达; 比色法检测癌细胞Caspase 3活性改变。结果　同对照组比较, 不同浓度姜黄素作用后癌细胞生长明显减慢, 抑制率为12. 18%~68. 15% (P<0. 01), 部分细胞呈现典型凋亡形态学改变, 凝胶电泳可见“梯形”条带, 凋亡率为9 .24%~28. 12% (P<0. 01); Survivin、XIAP基因mRNA和蛋白水平显著下调(均P<0. 01), 而Smac基因表达增强(P<0. 01), 癌细胞Caspase- 3 活性增强2 27~6 67倍(P<0 .01)。结论　姜黄素可显著诱导胃癌MKN- 45 细胞凋亡, 通过上调Smac、下调Survivin和XIAP基因表达, 进而活化Caspase- 3是其作用机制之一。     

非小细胞肺癌中人乳头瘤病毒感染与细胞增殖及凋亡的关系

目的探讨人乳头瘤病毒（HPV）16、18型感染与原发性非小细胞肺癌（NSCLC）组织中细胞增殖及凋亡的关系及其意义。方法应用PCR、TUNEL和免疫组化SP法分别检测76例NSCLC及13例肺良性病变中HPV16、18型DNA、细胞凋亡和增殖细胞核抗原（PCNA）的表达，并分别计算增殖指数（MI）和凋亡指数（AI）。结果NSCLC中HPV16、18型总阳性率为40．8％（31／76），而肺良性病变组阳性率为7．7％（1／13），差异有显著性意义（P〈0．05）。HPV感染在不同组织学类型及有无淋巴结转移间差异无显著性意义，而在不同组织分化程度间差异有显著性意义（P〈0．05）。NSCLC中HPV阳性组与阴性组之间MI及AI差异均有显著性意义（均P〈0．05）。结论HPV16、18型感染在NSCLC发生中可能有病因学意义，其致癌机制之一可能通过减少癌变细胞凋亡和促进细胞异常增殖而导致细胞癌变。     

肺癌与人乳头状瘤病毒感染和胰岛素样生长因子Ⅱ蛋白表达的相关性及其临床意义

目的:研究肺癌发生、发展中人乳头状瘤病毒(human papillomavirus, HPV)感染的病因学意义以及胰岛素样生长因子Ⅱ(insulin-like growth factor-Ⅱ, IGF-Ⅱ)蛋白的表达,并探讨肺癌发生与这2者之间的相关性.方法:采用PCR和免疫组织化学SP法分别检测68例肺癌组织和12例肺良性病变组织中HPV16/18型DNA﹑高危广谱型HPVE6/E7原癌蛋白和IGF-Ⅱ蛋白的表达水平.结果:肺癌组织的HPV阳性检出率为44.1%,高于肺良性病变组织的8.3%,差异有统计学意义(P＜0.05).HPV感染仅与肿瘤分化程度相关.IGF-Ⅱ蛋白在肺癌组织中的表达水平明显高于肺良性病变组织,且与肿瘤分化程度﹑淋巴结转移和临床分期相关(P<0.05).肺癌组织HPV阳性组与阴性组IGF-Ⅱ蛋白的表达水平差异有统计学意义(P<0.05),HPV阳性组中IGF-Ⅱ蛋白的表达水平较高.结论:高危HPV16/18型感染在肺癌的发生中具有重要的病因学意义,并可能通过整合的HPVE6/E7原癌蛋白促使有丝分裂原IGF-Ⅱ高表达,从而在肺癌的发生、发展中发挥重要作用.