几种快速制片技术的应用与比较

快速制片是病理诊断的常规技术,广泛应用于临床病理快速诊断、教学及科研。半导体冷冻切片受环境影响较大,超过25℃时就无法正常开展工作;酒精火焰加热法制作快速切片,因其每一步骤需加温处理,易使组织标本变脆变硬,组织收缩变形,不易切出完整切片。目前,超声波水浴法和微波电磁法快速制片已应用于临床病理快速诊断,能在短时间内完成制片,满足临床快速诊断要求。以下介绍几种快速制片方法。     

定量核磁共振波谱法测定坎地沙坦酯氨氯地平片中2个活性成分的绝对含量

目的:建立坎地沙坦酯氨氯地平片中坎地沙坦酯及苯磺酸氨氯地平2个活性成分绝对含量的定量核磁共振氢谱测定方法。方法:以坎地沙坦酯化学位移δ 5.51,苯磺酸氨氯地平化学位移δ 5.31为定量峰,马来酸化学位移δ 6.27为内标定量峰,氘代二甲基亚砜(DMSO-d₆)为溶剂,使用超导核磁共振波谱仪采集供试液的氢谱,对坎地沙坦酯氨氯地平片中坎地沙坦酯及苯磺酸氨氯地平2个活性成分绝对含量进行定量测定。结果:该方法专属性强,溶剂峰、水峰及辅料峰对待测定量峰无干扰。坎地沙坦酯在1.580 0～9.480 2 mg·mL^-1质量浓度范围内呈现良好的线性关系r=1.000,精密度、重复性及稳定性的RSD分别为0.070%、1.7%和0.68%,低、中、高浓度加标回收率在98.1%～99.2%;苯磺酸氨氯地平在0.983 9～5.903 6 mg·mL^-1质量浓度范围内呈现良好的线性关系(r=0.999 9),精密度、重复性及稳定性的RSD分别为0.050%、1.8%和0.79%,低、中、高浓度加标回收率在99.1%～102.0%。运用该方...     

房颤时心房组织和心肌电通道变化

心房颤动(房颤)是常见的室上性心律失常之一。研究发现房颤患者可出现心房的结构重构和电重构,结构重构主要表现为肌纤维溶解和肌细胞膜上缝隙链接蛋白密度降低及分布不均等;电重构则有钾离子外流增加和钙离子内流减少等变化,导致复极化速度加快、动作电位时程缩短。     

力竭运动对大鼠窦房结显微结构的影响

目的:观察大鼠力竭性游泳后窦房结病理组织学和缺血缺氧性变化。方法:实验于2004-09/12在扬州大学医学院解剖研究室完成。①选用8周龄的SD大鼠32只,雌雄各半。采用300L塑料水箱作为大鼠游泳槽,水深60cm,约为大鼠身长2倍,水温控制在(34±1)℃。按随机抽签法将大鼠分为4组:安静对照组(不运动),中等强度训练组(无负重游泳,120min/d,共7d),一次力竭训练组(尾部负荷体质量的2%,进行1次力竭游泳)和1周力竭训练组(尾部负荷体质量的2%,每天1次力竭游泳,共7d)。力竭标准:大鼠连续3次沉入水底,每次超过10s,不能自主浮上水面。②运动后即刻摘取窦房结,经固定、切片后分别进行苏木精染色、Masson’s染色和Nagar-Olsen染色。③用图像分析仪检测窦房结内P细胞、T细胞、心房肌细胞、胶原纤维胞浆吸光度(A值)。④组间计量资料差异比较采用t检验。结果:大鼠32只均进入结果分析。①苏木精-伊红和Masson’s染色显示,对照组窦房结内各细胞形态正常;中等强度训练后窦房结内部各细胞的形态结构无明显改变;1次力竭训练后窦房结内P细胞、T细胞与心房肌细胞病理改变明显,而胶原纤维的改变不明显。1周力竭训练后窦房结内P细胞、T细胞与心房肌细胞病理改变减轻,但胶原纤维的染色强度增加。中等强度训练后窦房结内各细胞胞浆A值与对照组相近(P>0.05)。1次力竭训练组窦房结内P细胞、T细胞和心房肌细胞胞浆A值均明显低于对照组和中等强度训练组(P<0.05～0.01)。1周力竭训练组窦房结内各细胞胞浆A值明显低于对照组和中等强度训练组(P<0.05),T细胞和心房肌细胞胞浆A值明显高于1次力竭训练组(P<0.05)。1周力竭训练组窦房结内胶原纤维胞浆A值明显高于其他3组(P<0.05)。②Nagar-Olsen染色(反映窦房结组织缺血缺氧程度)显示,对照组与中等强度训练组的窦房结内部细胞无缺血缺氧改变;1次力竭训练后,窦房结呈缺血缺氧性改变,缺血缺氧的程度依次为心房肌细胞>T细胞>P细胞;1周力竭训练后窦房结内部的各细胞缺血缺氧程度减轻。中等强度训练后窦房结内各细胞的胞浆A值与对照组相近(P>0.05)。1次力竭训练组窦房结P细胞、T细胞和心房肌细胞胞浆A值明显高于对照组和中等强度训练组(P<0.05～0.01)。1周力竭训练组窦房结内各细胞的胞浆A值明显高于对照组和中等强度训练组(P<0.05～0.01),P细胞和心房肌细胞胞浆A值明显低于1次力竭训练组(P<0.05)。结论:中等强度训练对大鼠窦房结的显微结构影响不明显,1次力竭训练可使窦房结内部的各细胞出现较明显的损伤性变化,1周力竭性游泳训练后窦房结出现了一定程度的适应性改变。     

盐酸戊乙奎醚抑制脂多糖性肺损伤大鼠肺泡II型上皮细胞损伤和ERK活化

目的： 观察盐酸戊乙奎醚(PHC)对脂多糖(LPS)性肺损伤(ALI)大鼠肺泡II型上皮细胞(ATII)和肺组织细胞外信号调节激酶（ERK）活化的影响。 方法： SD大鼠随机分为对照组、LPS组（静脉注射5 mg/kg LPS）和LPS+PHC高、中、低(3.0、1.0和0.3 mg/kg)3个剂量组,每组8只,测定肺湿重/干重（W/D）比值,考马斯亮蓝法测BALF蛋白含量,双缩脲法测血浆蛋白含量,并计算肺通透指数（LPI=BALF蛋白/血浆蛋白）,透射电镜观察各组ATII超微结构,并进行PHC影响肺组织ERK表达的量效性分析;另取大鼠在注入生理盐水（NS）后即刻0 h（对照组）和注射LPS后2 h、4 h、6 h和12 h共5个时点,每时点6只,进行PHC影响肺组织ERK表达的时效性分析。蛋白免疫印迹法检测肺组织ERK的表达。 结果： LPS组大鼠电镜下可见ATII板层小体排空明显而致空泡化,微绒毛脱落,微丝模糊、断裂、缩短,线粒体空泡变性,基膜不完整,而PHC显著减少ATII板层小体空泡化,减轻ATII损伤。LPS模型组大鼠肺W/D比值、LPI及肺组织磷酸化ERK表达显著高于对照组（均P＜0.05),PHC高剂量组显著降低LPS诱导的大鼠肺W/D比值、LPI（均P＜0.05),显著抑制LPS诱导的大鼠肺组织磷酸化ERK表达（P＜0.05);PHC在LPS注射后6h时最能有效抑制ERK磷酸化。结论： PHC抑制LPS诱导的ALI大鼠肺组织通透性增加、ATII损伤和肺组织ERK活化,PHC对LPS诱导大鼠肺组织通透性增高和ATII损伤的拮抗作用可能与抑制ERK活化有关。     

鸡肝散总黄酮提取物对大鼠实验性心肌缺血的保护作用

目的　研究鸡肝散总黄酮提取物(total flavone extract of Elsholtzia blanda ,TFEEB)抗急性心肌缺血作用及其机制。方法　采用雄性大鼠iv垂体后叶素(pituitrinum ,pit)引发急性心肌缺血模型,以Ⅱ导心电图、血清CK ,Ca²⁺,NO含量,心肌匀浆Ca²⁺,NO ,MDA含量等为指标,综合评价TFEEB连续ig给药5d后,对pit诱发大鼠急性心肌缺血的作用及其机制。结果　TFEEB 200mg/kg可显著降低ivpit后心律失常的发生率、对抗心电图T波的抬高和心率的减慢(P<0.05) ,TFEEB 100,150和200mg/kg均可显著降低血清CK和心肌匀浆MDA ,Ca²⁺的水平(P<0.05或P<0.01) ,升高血清NO ,Ca²⁺和心肌匀浆NO水平(P<0.05或P<0.01)。结论　TFEEB对大鼠心肌缺血有一定的保护作用,其机制与TFEEB防止心肌钙超载、增加心肌组织NO含量和抗脂质过氧化有关     

鸡肝散总黄酮对大鼠实验性心律失常的作用研究

目的:研究鸡肝散总黄酮(Total flavone of Elsholtzia blanda,TFEB)抗大鼠实验性心律失常的作用.方法:大鼠采用结扎冠脉左前降支(left anterior descending coronary artery,LAD)、iv垂体后叶素(pituitrnum,pit)、恒速iv乌头碱诱发大鼠心律失常的动物模型,记录Ⅱ导ECG,分男观察大鼠心律失常发生的情况.结果:TFEB 150、200mg/kg能显著减少结扎后15min内室性早博(ventricular extrasystole,VE)的发生次数,减少发生室性心动过速(ventricular tachycardia,VT)的动物数,降低iv pit所致心律失常发生的百分率;TFEB各剂量组均能极显著提高乌头碱致大鼠VE的阈值,TFEB 300mg/kg还能显著提高乌头碱诱发大鼠VT、VF和心脏停搏(heart stop,HS)的阈值.结论:TFEB具有抗实验性心律失常作用.     

问题意识与创新能力在解剖学教学中的应用

本文讨论在解剖学教学中,如何培养学生的创新能力和解决实际问题能力。强调主要实现三个转变:一是要变成以学生为中心,在教学中要充分发挥学生的主体地位与作用;二是使学生积极主动地参与教学,从而培养其动手能力、自学能力、科研能力;三是培养学生问题意识,激发其创新能力。     

阿伐他汀伍用大豆异黄酮预防大鼠脂质代谢紊乱的作用

目的探讨阿伐他汀(AT)伍用大豆异黄酮(SI)调节大鼠脂质代谢紊乱的药效学及相关分子机制以提供联合疗法的科学依据。方法采用喂养法建立食物性高脂血症大鼠模型,正常对照组和模型组给予蒸馏水,其他供试组给予不同剂量的药物:AT 20 mg.kg-1,AT伍用SI(40 mg.kg-1+120 mg.kg-1,20 mg.kg-1+60 mg.kg-1,10 mg.kg-1+30mg.kg-1),每日给药一次,连续给药12周。酶法测定血清中各项脂蛋白含量;制作冰冻切片进行病理学观察;RT-PCR检测肝脏组织低密度脂蛋白受体(LDLR)和载脂蛋白apoA-1的mRNA表达,W estern印迹检测LDLR蛋白表达变化。结果AT伍用SI(40 mg.kg-1+120 mg.kg-1,20 mg.kg-1+60 mg.kg-1)与单用AT 20 mg.kg-1相比,明显降低血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL-C)(P<0.05),明显升高高密度脂蛋白(HDL-C)(P<0.05);AT伍用SI(10 mg.kg-1+30 mg.kg-1)与单用AT 20 mg.kg-1相比,对指标TC,TG及LDL-C的作用具有药效等效性,明显升高HDL-C(P<0.05);能够减少肝脏对脂蛋白颗粒的蓄积,RT-PCR实验和W estern印迹实验表明能够增强大鼠肝脏LDLR mRNA和蛋白的表达,并上调HDL-C代谢相关蛋白apoA-1 mRNA的表达。结论AT伍用SI对高脂血症大鼠的血脂和脂蛋白代谢紊乱有预防作用,该脂质代谢紊乱调节作用机制与上调LDLR和apo-A1 mRNA表达及促进LDLR蛋白表达有相关性。     

基于研究型人才培养为目标的药理学实验教学改革

药理学实验教学是药学专业人才培养过程中的关键环节之一,如何使实验教学的模式适应人才培养目标的需要是各大专院校亟待解决的重要课题.文章从药理学开放性实验教学环节涉及的实验教学模式改革、实验考核及学生能力评价两方面进行了探讨,并创新提出"四段式"实验教学模式.