聚乙二醇修饰对苦瓜籽中RIP抗肿瘤活性及免疫学特性的影响

目的 探讨苦瓜籽核糖体失活蛋白(RIP)经聚乙二醇(PEG)修饰后的体外及动物体内免疫学特性的变化.方法 用MTT法测定RIP和RIP-PEG结合物对小鼠黑色素瘤细胞的抑制率;通过间接ELISA法测定RIP和RIP-PEG结合物在小鼠体内的免疫原性;以全身主动过敏实验(ASA)和被动皮肤过敏实验(PCA)来比较二者在豚鼠和大鼠体内的过敏毒性.结果 RIP-PEG结合物对小鼠黑色素瘤细胞B16的抑制率约为RIP的70%,产生的特异性IgG与RIP比较显著下降(P<0.01),诱发的过敏反应也显著降低.结论 苦瓜籽RIP经PEG修饰后,其抗肿瘤活性、免疫原性和过敏毒性均显著降低.     

马桑内酯对瞬时外向钾电流的影响及在致痫机制中的作用

目的本实验拟采用全细胞膜片钳记录技术,研究马桑内酯(CL)对培养大鼠皮层神经元瞬时外向钾电流(ⅠA)的影响,从而探讨CL致癫痫的电生理机制及与ⅠA的关系,为临床更有效地防治癫痫提供新的依据。方法采用全细胞膜片钳技术记录ⅠA,进行以下方面实验①培养大鼠皮层神经元ⅠA的特性及鉴定;②三种不同浓度CL对神经元ⅠA的影响;③CL对神经元ⅠA的I-V曲线的影响。结果测试电压为+65mV时,三种不同浓度CL后均可抑制IA的电流振幅,其抑制差异均有统计学意义。结论CL具有抑制瞬时外向钾电流的作用,且在一定范围内抑制呈剂量依赖性,推测CL致癫痫的发生机制可能与IA的抑制有关。     

生物化学实验技术多媒体课件的设计与制作

目的:制作一套适用于医学本科实验教学的生物化学实验技术多媒体教学课件.方法:采用Flash作为主创软件,Photosphop、Corl draw、Premiere、Creative Wave Studio为辅助软件,通过编写课件脚本,将实验技术操作演示过程进行摄像、图片制作、Flash动画设计和实验模拟操作设计与制作等构成CAI课件.结果:制作完成的CAI软件,可对生物化学中常用实验技术进行生动形象地动画演示与模拟操作.结论:已应用于医学本、专科生物化学和分子生物学的实验教学,软件开发成功.     

马桑内酯对大鼠瞬时外向钾电流的影响

目的:用全细胞膜片钳记录技术,研究马桑内酯(Coriaria Lactone,CL)对培养大鼠皮层神经元瞬时外向钾电流(Transient outward potassium current,IA)的影响,从而探讨CL癫痫的电生理机制及与IA的关系,为临床更有效地防治癫痫提供新的依据.方法:采用全细胞膜片钳技术记录IA,进行以下实验:①培养大鼠皮层神经元IA的特性及鉴定;②三种不同浓度CL对神经元IA的影响;③CL对神经元IA的I-V曲线的影响;结果:测试电压为 65mV时,5μg·ml-1、50μg·ml-1、100μg·ml-1CL后均可抑制IA的电流振幅,其抑制均有统计学差异;50μg·ml-1与100μg·ml-1CL的效应无显著性差异.结论:CL具有抑制瞬时外向钾电流的作用,且在一定范围内呈剂量依赖性,这可能与CL的致痫机制有关.     

血清脂联素检测对2型糖尿病肾病早期诊断的应用价值

目的探讨脂联素在2型糖尿病肾病不同阶段的水平变化及临床诊断应用价值。方法选择2型糖尿病住院患者120例作为观察对象,并根据尿清蛋白排泄量分为4组：单纯糖尿病组、极微量清蛋白尿组、微量清蛋白尿组、大量清白蛋白尿组;同时选择健康体检者30例作为正常对照组。测定血清脂联素水平,同时测定空腹血糖（FBG）、血清肌酐（Scr）、血清尿素（BUN）、尿微量清蛋白（mAlb）、尿β2-微球蛋白（β2-MG）,比较各组间的差异。结果 2型糖尿病组血清脂联素水平明显低于正常对照组（P〈0.05）,大量清蛋白尿组血清脂联素水平明显高于单纯糖尿病组（P〈0.05）,血清脂联素水平与血清肌酐、血清尿素、尿微量清蛋白、尿β2-微球蛋白水平呈正相关（P〈0.05）。结论脂联素与糖尿病肾病发生、发展有关,检测血清脂联素对于2型糖尿病早期肾损伤的诊断有重要参考价值。     

抗菌肽PGG酰胺化合成物的生物学特性研究

目的:对比人工设计合成的抗菌肽PGG与它的酰胺化产物PGG-NH2的生物学特性。方法:根据NCCLS的方法,以天然蜂毒肽Melittin为对照,测定抗菌肽对大肠埃希菌和表皮葡萄球菌的最低抑菌浓度(MIC);同时测定在不同盐浓度及不同MgCl2浓度下对金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌的MIC。使用5%的红细胞悬液,与抗菌肽混合孵育后540nm的吸光度评价溶血性,用超声完全溶解后红细胞悬液作为评价标准。结果:PGG-NH2对大肠埃希菌和表皮葡萄球菌MIC为4～8μg/mL和8～16μg/mL;随着离子浓度的增加,抗菌肽对金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌的MIC出现不同程度的增高,NaCl和MgCl2浓度对PGG-NH2活性的影响小于PGG;100μg/mLPGG-NH2的溶血性小于10%。结论:PGG-NH2有较强的抗菌活性,比PGG耐受更高的离子强度,同时具有更低的溶血性。     

危险化学物品在实验教学使用中的管理探讨

在长期的教学、科研管理过程中,根据国家出台的<危险化学品安全管理条例>、<常用危险化学品储存通则>、<易燃易爆性商品储藏养护技术条件>等一系列相关法律法规,针对实验教学中心的运行情况,制订了切实可行的实验室化学危险品的各项管理及措施,以保障化学危险品在实验室的安全.     

盐酸胍消化法用于结核杆菌不同检样前处理及结果分析

肺结核病是严重威胁人类健康的重大传染性疾病之一,“是单病因所致的感染性疾病中死亡率最高的疾病”,但只要能早期诊断合理用药,绝大多数的结核病人可以治愈。因此提高诊断阳性率和诊断速度对于防治结核病具有重要意义。现有的结核病实验室诊断方法阳性率普遍较低。     

MAP30-PEG结合物对A549体外细胞增殖作用的研究

目的探讨苦瓜籽核糖体失活蛋白MAP30及其聚乙二醇修饰物对人肺腺癌细胞A549增殖、细胞凋亡的影响和caspase3相关凋亡途径的诱导作用。方法用MTT法测定MAP30和MAP30-PEG结合物对人肺腺癌细胞A549的抑制率;通过Hoechst33258荧光染色观察A549细胞凋亡形态,并用流式细胞术测定细胞凋亡率以及用western blot检测凋亡细胞caspase3表达。结果 MAP30和MAP30-PEG结合物均对A549有抑制作用,且呈时间和剂量依赖性关系;MAP30-PEG结合物对A549细胞增值抑制率约为MAP30的60%;Hoechst33258荧光染色后均呈典型凋亡形态;流式细胞术检测显示,MAP30和MAP30-PEG结合物作用于A549细胞48 h后均可使A549细胞呈现Sub-G1凋亡峰,凋亡率分别为58.7%、42.7%;MAP30和MAP30-PEG结合物对胞内caspase3在凋亡过程中显示有激活作用。结论 MAP30和MAP30-PEG结合物均对A549增殖有明显的抑制作用;两者均能通过caspase3途径诱导细胞凋亡。     

高浓度EGF对小鼠肝细胞信号转导的动力学研究

目的:探讨高浓度表皮生长因子(EGF)对小鼠肝细胞信号转导的动力学改变。方法:从细胞整体水平的角度出发,采用双向电泳及放射性同位素标记技术,并结合相关数据库资源和双向电泳专用分析软件,分析小鼠肝细胞在高浓度的EGF信号持续刺激不同时间得到的EGF信号蛋白在EGF信号转导过程中其磷酸化水平发生的动力学变化。结果:在高浓度EGF持续刺激下,小鼠肝细胞内的某些结点信号蛋白如Eps15和ERK2的磷酸化动力学曲线表现为持续活化状态。结论:在高浓度的EGF持续刺激下,EGF信号网络系统中的某些信号蛋白将会发生一定的改变,这些改变可能与肿瘤的发生、发展有密切关系。