波形蛋白促进激素非依赖性前列腺癌细胞侵袭与转移的机制探讨

目的:探讨波形蛋白促进激素非依赖性前列腺癌细胞侵袭与转移的分子机制。方法:应用波形蛋白特异性扩增引物,借助RT-PCR获得波形蛋白正义全长和反义全长cDNA片段,分别插入pcDNA3.1( )和pcDNA3.1(-)表达载体中,并将重组质粒导入激素非依赖性前列腺癌配对细胞系中,G418稳定筛选;应用体外运动和侵袭试验比较细胞侵袭能力的改变;用蛋白免疫印迹法检测相关蛋白的表达。结果:波形蛋白通过C-src激酶调节E-钙黏蛋白(E-cadherin)/β-连环蛋白(β-cate-nin)复合物,促进激素非依赖性前列腺癌细胞侵袭与转移。结论:波形蛋白可以作为判断激素非依赖性前列腺癌细胞侵袭与转移的一个重要指标。     

plexin-B1 在乳腺癌组织中的表达及其与淋巴道转移的关系

 目的 探讨plexin-B1在乳腺癌组织中的表达及其与乳腺癌侵袭、转移的关系。方法 应用免疫组化supervision法分别检测15例正常乳腺组织和85例乳腺癌组织中plexin-B1的表达。结果 plexin-B1在正常乳腺组织中均为阴性表达，在乳腺癌组织中癌细胞和管腔内皮细胞的表达阳性率分别为76．5％（65／85）和70．6％（60／85），其中在有淋巴结转移组分别为87．0％（47／54）和85．2％（46／54），在无淋巴结转移组分别为58．1％（18／31）和45．2％（14／31），两组间的差异有统计学意义（P〈0.001）。plexin-B1在乳腺癌组织中表达与雌激素受体（estrogenreceptor，ER）的状态高度相关，在肿瘤细胞与淋巴管内皮细胞的表达呈显著的正相关（r=0．666，P〈0．01））。但其表达与肿瘤大小、临床分期及淋巴结转移数目无关。结论 乳腺癌组织中plexin-B1的高表达可能与乳腺癌发生及淋巴道转移密切相关。     

Screening of Differently Expressed Genes in Human Prostate Cancer Cell Lines with Different Metastasis Potentials

In order to screen the genes differentially expressed in two human prostate cancer cells with different metastasis potentials,suppression subtractive hybridization(SSH) was done twice on human prostate cancer cell line with high potential of metastasis PC3M-1E8 and its synogenetic cell line PC3M-2B4 with low metastasis potential.In the first subtraction PC3M-2B4 was used as tester and PC3M-1E8 as driver and the forward subtractive library was constructed.In the second one the tester and driver were interchanged and the reverse subtractive library was constructed.The screened clones of both libraries were sequenced and Gene Bank homology search was performed.Some clones were confirmed by quantitative real-time PCR.The results showed that two subtractive libraries containing 238 positive clones were constructed.Analysis of 16 sequenced clones randomly picked from two libraries showed that 4 differentially expressed gene fragments were identified as new EST with unknown functions.It was concluded that two subtractive libraries of human prostate cancer cell lines with different metastasis potentials were constructed successfully.     

卵巢癌细胞PCDGF的表达与意义

目的研究人卵巢癌细胞PCDGF的表达,探讨其与卵巢癌恶性表型的关系.方法应用半定量RT-PCR和Western blot分别检测3株卵巢癌细胞中PCDGF mRNA和蛋白表达水平.单层细胞增殖实验测定3株卵巢癌细胞的增殖能力;Boyden小室体外侵袭实验测定不同细胞株的侵袭能力.结果 3株卵巢癌细胞PCDGF转录和翻译水平呈同步变化(P<0.05),均为SW626最高,A2780稍低,Skov-3最低.而其增殖、侵袭能力亦为SW626最强, A2780次之, Skov-3最弱.结论 3株卵巢癌细胞PCDGF mRNA和蛋白表达水平与其增殖、侵袭能力呈正相关(前者r1=0.97, r2=0.89,后者r1=0.85,r2=0.84),提示PCDGF在卵巢癌发生演进中可能作为独立因素起多种作用,有望成为治疗的新靶点.     

川芎嗪、苯那普利对5/6肾切除大鼠肾小管间质低氧及微血管生成的作用

目的研究川芎嗪及苯那普利对慢性肾衰大鼠肾脏肾小管间质低氧诱导因子-1α（HIF-1α）及血管内皮生长因子（VEGF）表达的影响。方法建立5／6肾大部切除模型,随机分为A：川芎嗪治疗组[150mg／（kg&#183;d）],B2苯那普利治疗组E10mg／（kg&#183;d）],C2模型对照组,D2假手术组。在造模成功后第1、4、8、16周分别杀检,留取血、尿及肾组织标本送检。检测①24h尿蛋白定量;②血肌酐（Scr）及尿素氮（BUN）水平;③免疫组化法检测肾组织HIF-1α、VEGF及CD34表达,计数肾小管间质微血管密度（MVD）,④RT-PCR法及Westernblot法分别检测肾组织HIF-1α、VEGF的mRNA及蛋白质表达。结果①川芎嗪及苯那普利均可明显降低尿蛋白排泄量,但用药组尿蛋白排泄仍高于假手术组。②川芎嗪及苯那普利组BUN及Scr低于模型对照组。③从第1周起,苯那普利组HIF-1αmRNA及VEGFmRNA表达即高于其他3组;川芎嗪组HIF-1αmRNA表达略低于模型对照组,但是其VEGFmRNA的表达却高于模型对照组。④川芎嗪及苯那普利组第8周起MVD值大于模型对照组,但低于假手术组。结论苯那普利可通过上调5／6肾切除大鼠肾组织HIF-1α的表达,刺激小管间质VEGF的表达。从而促进小管间质微血管的保留来保护肾脏。HIF-1α-VEGF-血管内皮细胞途径在川芎嗪对慢性肾衰的早期治疗中可能起作用,在后期可能还有其他机制的参与。     

右美托咪定联合咪达唑仑辅助臂丛神经阻滞镇静效果

目的:观察右美托咪定联合咪达唑仑辅助臂丛神经阻滞的镇静效果及安全性。方法:臂丛麻醉择期手术患者80例,随机双盲分为4组,每组20例,咪达唑仑组(A组:咪达唑仑0.04 mg/kg静脉注射+0.9%氯化钠溶液恒速泵入),右美托咪定恒速输注组[B组:右美托咪定0.7μg/(kg·h)恒速泵入],眯达唑仑+右美托咪定恒速输注组[C组:眯达唑仑0.04 mg/kg静脉注射+右美托咪定0.7μg/(kg·h)恒速泵入],右美托咪定负荷量+恒速输注组(D组:负荷量2.5μg/(kg·h)诱导10 min+右美托咪定0.7μg/(kg·h)恒速泵入]。记录静脉给药前(T_0)、给药后10 min(T_1)、20 mm(T_2)、30 min(T_3)、60 min(T_4)及术毕(T_5)各时点的平均动脉压(MAP)、心率(HR)、血氧饱和度(SPO_2)、心电图(ECG)和警觉/镇静(OAA/S)评分。结果:与T0MAP、HR和OAA/S评分相比,A组仅T_1下降,差异有显著性(P<0.05);B组T_1-T_5均平稳,差异无显著性(P>0.05);C和D组T_1-T_4均下降,差异有显著性(P<0.05)。4组间T_1-T_4MAP、HR和OAA/S评分比较,A组仅T_1较B组一过性下降,C组和D组均较B组下降,差异有显著性(P<0.05);C组和D组除T_1外均较A组降低,但C组和D组相比,D组较C组下降更明显,差异均有显著性(P<0.05)。四组组内和组间给药前后SPO_2比较,差异均无显著性(P>0.05)。因心率减慢(HR≤45次/min)需给阿托品者,C组1例,D组5例,C组和D组相比,差异有显著性(P<0.05)。结论:右美托咪定联合咪达唑仑辅助臂丛神经阻滞镇静效果满意安全可行。     

Semaphorin4C 在乳腺癌子宫内膜癌及前列腺癌中的表达及意义*

目的:研究轴突导向分子Semap horin4C（Sema4C）在乳腺癌、子宫内膜癌及前列腺癌组织和细胞水平的表达情况及其与上述三种恶性肿瘤转移的关系。方法:应用免疫组化技术检测45例乳腺癌、42例子宫内膜癌及49例前列腺癌组织中Sema4C的表达情况,分别采用蛋白免疫印迹法Western Blot及细胞免疫荧光方法检测Sema4C 在三种乳腺癌细胞（MDA-MB-435S、MDA-MB-231、MCF-7）、两种子宫内膜癌细胞株（AN3CA、HEC-1-B）和两种前列腺癌细胞株（PC- 3M-1E8、PC- 3M-2B4）的蛋白表达及其亚细胞定位情况。结果:乳腺癌和子宫内膜癌中,其分别在有淋巴结转移的乳腺癌组和子宫内膜癌组的原发灶中的表达高于无淋巴结转移组,差异有统计学意义（P<0.05）。 前列腺癌中,Sema4C 的阳性表达率随着Gleason评分增加而升高（P<0.05）。 Western blot在七株肿瘤细胞均检测到Sema4C 的表达,且提示Sema4C 的表达与细胞的转移潜能呈正相关。荧光显微镜下观察到Sema4C 主要定位在细胞膜和细胞浆。结论:Sema4C 在乳腺癌、子宫内膜癌和前列腺癌组织和细胞中表达具有普遍性,且与上述三种恶性肿瘤转移关系密切,有望成为上述三种恶性肿瘤治疗的一个新的分子靶点。      

Ⅲ/Ⅳ期卵巢子宫内膜异位症保守手术后复发相关因素分析

目的 探究Ⅲ/Ⅳ期卵巢子宫内膜异位症保守手术治疗后复发的影响因素.方法 选取2010年在同济医院接受保守手术治疗的106例Ⅲ/Ⅳ期卵巢子宫内膜异位症患者进行随访,根据随访期间患者卵巢子宫内膜异位症是否复发,将纳入患者分为未复发组(80例)和复发组(26例),综合两组患者临床资料、病理信息,采用Cox回归分析保守手术治疗...     

“五个三”打响“五大攻坚”行动战

<正>今年以来,贵州省余庆县推进环境卫生整治、基础设施补短、市民素质培育、公共秩序引导、营造宣传氛围“五大攻坚”行动,营造人人参与文明建设的浓厚氛围,推动文明城市创建工作走深走实。“三大行动”开展环境卫生整治。一是开展全域环境卫生大清理大清扫行动。组织党员干部、志愿者一周一次到县城背街小巷开展大清理、大清扫,引导广大群众养成良好的生活习惯,破除陈规陋习。二是开展最美小区创建行动。注重共建共治共享,实施背街小巷“管家制”,整治脏乱差、规范垃圾分类、规范车辆停放,加大公益广告投入,破解街巷治理难题。三是开展公路沿线环境整治行动。以二级路沿线为重点,重点整治乱搭乱建、乱堆乱放、乱扔乱倒,破损广告,砂石不封闭运输、带泥上路等行为,努力打造“畅、安、舒、美”公路环境,不断增强群众的获得感、幸福感和安全感。     

人外周血Tie2-expressing monocytes的初步研究

目的:探讨健康人外周血中tyrosine kinase with Ig-like loops and epidermal growth factor homology domains-2(Tie2)-expressing monocytes(TEMs)的存在以及其所占的比例。方法:采用红细胞裂解法获得人外周血白细胞,Phycoerythrin(PE)标记抗人Cluster of Differentiation 14(CD14)抗体及Tie2抗体分别孵育所获取的白细胞,流式细胞仪检测CD14阳性细胞及Tie2阳性细胞的比例。结果:外周血白细胞中,CD14阳性率为2.04%,Tie2阳性率为0.71%。CD14阳性细胞中,Tie2阳性率为13.07%。结论:TEMs在健康人外周血白细胞中存在,并且主要分布于CD14阳性的单核细胞群。