知母须根总皂苷提取工艺的优化及其对糖氧剥夺损伤的PC12细胞保护作用研究

目的优化知母须根总皂苷提取工艺,探讨其对糖氧剥夺(oxygen-glucose deprivation,OGD)损伤的PC12细胞的保护作用。方法在单因素实验基础上,利用响应面法优化知母须根总皂苷提取工艺;建立OGD损伤的PC12细胞模型,采用终质量浓度为20、40、80 mg/L的知母须根总皂苷进行干预。分别用倒置显微镜观察细胞形态,MTT法测定细胞存活率,荧光探针二氯荧光素-双乙酸盐(DCF-DA)法测定细胞内活性氧(ROS)含量,Annexin V/PI双染法测定细胞凋亡率,蛋白免疫印记法检测凋亡信号蛋白Bcl-2、Bax表达情况。结果知母须根总皂苷提取的最优条件为乙醇体积分数72.22%,料液比1∶11,提取时间73.33 min,在此条件下,理论提取率为8.38%,实测提取率为8.33%。PC12细胞经OGD损伤4 h后细胞活力显著降低,知母须根总皂苷对其呈现保护作用,并随着知母须根总皂苷质量浓度的升高而增强;流式细胞术分析结果表明知母须根总皂苷能明显减少OGD损伤PC12细胞中ROS含量及凋亡率,免疫印迹实验结果表明知母须根总皂苷可上调PC12细胞Bcl-2表达并下调Bax表达。结论通过响应面法优化的工艺得率高、提取效果好。知母须根总皂苷对OGD损伤的PC12细胞具有一定的保护作用,其机制可能与减少OGD诱导PC12细胞ROS含量、抑制线粒体凋亡通路有关。     

刍芍不同炮制品化学成分含量比较

目的：比较白芍不同炮制品的芍药苷、水溶性多糖和鞣质含量。方法：采用紫外分光光度法、高效液相色谱法测定白芍不同炮制品中芍药苷、水溶性多糖和鞣质的含量。结果：白芍不同炮制品芍药苷含量大小为生白芍〉炒白芍〉醋白芍〉酒白芍,水溶性多糖含量为酒白芍〉生白芍〉炒白芍〉醋白芍,鞣质含量为酒白芍〉生白芍〉醋白芍〉炒白芍。结论：白芍不同炮制品的化学成分含量存在一定的差异。     

基于指纹图谱结合化学模式识别绿萼梅质量标志物的评价研究

目的 利用化学模式识别技术对绿萼梅药材指纹图谱数据进行分析,筛选特征性指标成分从而建立绿萼梅Q-Marker的定量分析策略,为绿萼梅质量评价提供科学依据。方法 采用超高液相色谱法建立3个产地绿萼梅的指纹图谱,运用相似度分析、聚类分析、主成分分析和偏最小二乘判别分析等化学模式识别技术筛选出不同产地绿萼梅化学成分的特征成分作为绿萼梅Q-Marker,并定量分析。结果 30批绿萼梅UPLC指纹图谱标定8个共有峰,相似度在0.816～0.969;通过聚类分析、主成分分析和偏最小二乘判别分析较好的区分各产地绿萼梅,综合分析筛选绿原酸、芦丁、金丝桃苷、异槲皮苷作为绿萼梅Q-Marker,质量分数分别在3.08%～4.71%、0.41%～0.71%、0.13%～0.25%、0.25%～0.38%。结论 通过指纹图谱结合化学模式识别技术的分析策略可快速有效的筛选绿萼梅Q-Marker,为绿萼梅质量评价提供参考。     

绿萼梅药材超高效液相色谱指纹图谱研究

目的 采用超高效液相色谱法（ultra performance liquid chromatography,UPLC）建立绿萼梅药材的指纹图谱,为有效控制绿萼梅药材的质量奠定基础。方法 采用CORTECS C18色谱柱（2.1 mm×100 mm,1.6 μm）,以乙腈（A）-0.1%甲酸水（B）溶液为流动相进行梯度洗脱,进样量为1 μL,流速为0.3 mL/min,检测波长260 nm。结果 通过相似度分析确定19个色谱峰构成绿萼梅药材指纹图谱的特征峰。结论 采用UPLC方法建立的指纹图谱具有精密度、稳定性、重复性良好的特点,可为绿萼梅化学成分的进一步提取分离和药效物质基础的研究提供科学依据。     

高效液相色谱法测定山核桃外蒲壳中4,8-二羟基-1-四氢萘酮的含量

目的采用高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)测定山核桃外蒲壳中4,8-二羟基-1-四氢萘酮的含量。方法采用HPLC,色谱柱为Shim-pack C18(250mm×4.6mm,5μm),以甲醇-水(40∶60)为流动相,流速为0.8ml/min,检测波长为333nm,柱温为25℃。结果 4,8-二羟基-1-四氢萘酮在1.13～20.34μg/ml范围内与峰面积呈良好线性关系,r=0.999 9,平均回收率为101.8%,相对标准偏差为1.21%(n=6)。结论所建立的HPLC准确可靠、结果稳定、重现性好,可用于山核桃外蒲壳4,8-二羟基-1-四氢萘酮的含量测定。     

不同产地牡丹皮饮片质量评价

目的对不同产地牡丹皮饮片进行质量评价。方法采用化学及仪器分析的方法测定3种不同产地牡丹皮饮片的水分、灰分、浸出物、丹皮酚、丹皮总苷及丹皮多糖含量。结果不同产地牡丹皮饮片有效成分含量有显著差异。结论3种不同产地的牡丹皮饮片样品中,安徽铜陵牡丹皮饮片质量最优。     

高效液相色谱法测定山核桃外蒲壳中4,8-二羟基-1-四氢萘酮的含量

目的 采用高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)测定山核桃外蒲壳中4,8-二羟基-1-四氢萘酮的含量.方法 采用HPLC,色谱柱为Shim-pack C18 (250 mm×4.6 mm,5 μm),以甲醇-水(40∶60)为流动相,流速为0.8 ml/min,检测波长为333 nm,柱温为25 ℃.结果 4,8-二羟基-1-四氢萘酮在1.13～20.34 μg/ml范围内与峰面积呈良好线性关系,r=0.999 9,平均回收率为101.8%,相对标准偏差为1.21%(n=6).结论 所建立的HPLC准确可靠、结果稳定、重现性好,可用于山核桃外蒲壳4,8-二羟基-1-四氢萘酮的含量测定.     

高效液相色谱法测定复方丹皮汤中丹皮酚含量

目的：运用高效液相色谱法检测复方丹皮汤中丹皮酚的含量。方法：选用岛津VP—ODS柱（4．6mm×150mm,5μm）;流动相：甲醇-水（50：50）;流速：1．00ml／min;检测波长：274nm;柱温：30℃.结果：丹皮酚浓度为5．36～26．8μg／ml时与峰面积呈良好的线性关系（r=0．9997）,平均回收率为99．12％（n=5）,RSD1．25％。结论：运用高效液相色谱法检测复方丹皮汤中丹皮酚的含量简便、准确、重复性好,可作为复方丹皮汤的一种质量控制方法。     

多指标正交试验优选凤丹皮醇提工艺

目的优选凤丹皮最佳乙醇回流提取工艺。方法采用L9(34)正交试验设计,选择乙醇浓度、料液比、提取时间、提取次数为考察因素,以凤丹皮中6个活性成分(氧化芍药苷、儿茶素、芍药苷、苯甲酰氧化芍药苷、苯甲酰芍药苷、丹皮酚)的含量及浸膏率作为指标,进行综合评分。结果凤丹皮的最佳乙醇回流提取工艺为10倍量90%的乙醇,每次提取60 min,提取2次。结论采用多指标综合评分法考察凤丹皮乙醇回流提取工艺,指标全面,方法客观,对于规范凤丹皮的提取工艺具有一定的意义。     

HPLC法测定金花消痤颗粒中栀子苷的含量

目的建立测定金花消痤颗粒中栀子苷含量的高效液相色谱法。方法色谱柱:Shim-pack C18(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相:乙腈-水(15∶85);检测波长:238 nm;柱温:40℃;流量:1 ml.min-1。结果栀子苷进样量在0.052 4～0.524 0μg范围内与峰面积呈良好的线性关系,平均加样回收率为98.56%,RSD=2.06%(n=6)。结论该方法测定金花消痤颗粒中栀子苷的含量,操作简便,结果稳定,精密度、重现性、回收率均较好。