重组CD_(13)单链抗体和蝎毒素多肽AGAP融合蛋白真核表达及对NB4细胞的靶向杀伤作用

目的:本研究应用基因工程技术方法,构建含重组编码CD13单链抗体和蝎毒素镇痛抗肿瘤缬精甘肽(analgesic antitumoral peptide,AGAP)融合蛋白基因的表达载体,并研究CD13-AGAP融合蛋白对CD13阳性白血病细胞NB4影响。方法:克隆东亚钳蝎活性肽AGAP的基因,插入真核表达载体pSecTag2/CD13/RFP,得到pSecTag2/CD13/AGAP重组真核表达载体。酶切及测序鉴定后,脂质体介导重组质粒转染293T细胞,通过RT-PCR和免疫印迹方法检测融合基因和蛋白的表达。纯化融合蛋白,作用NB4细胞,CCK8检测细胞活性,流式细胞仪检测细胞周期。结果:酶切及测序结果证实pSecTag2/CD13/AGAP重组真核表达载体构建成功,转染293T细胞后,RT-PCR和免疫印迹方法结果证实重组质粒得到有效表达,并纯化真核表达融合蛋白CD13-AGAP对血液肿瘤CD13阳性白血病细胞NB4有一定的生长抑制作用,并且使细胞周期G1期阻滞,S期减少。结论:成功构建了融合蛋白真核表达载体pSecTag2/CD13/AGAP,并在293T细胞中成功表达,进一步证实融合蛋白对CD13阳性白...     

急性胰腺炎的中医治疗概况

<正> 急性胰腺炎属于祖国医学“胃脘痛”、“腹痛”、“结胸”等痖范畴,近年来文献报道中医药治疗效果满意,现将近几年来的治疗情况综述如下:辨证分型论治王氏治疗113例分三型;1.肝郁气滞型,治宜理气开郁清热,用小柴胡汤加减(党参、柴胡、黄芩、甘草、枳壳、藿香、双花、连翘、大黄、桅子、半夏,竹茹);2.湿热交结型,治宜清热解毒,通里攻下,用大柴胡汤加减(柴胡、大黄、(?)实、黄芩、栀子、龙胆草、双花、连翘、茯苓、泽泻、甘草、芒硝);3.热血相搏型,相当于急性坏死性出血性胰腺炎,多用手术治疗,中医以清热解毒、活血化瘀、通里攻下为主,术后则用滋阴清热、健脾理气、活血化瘀法,本组除4例手术外,余均治愈。浙江中医学院附院治疗本病27例分二型,1.脾胃实热型用柴胡、黄芩、生白芍、生大黄(后下)、川朴、木香,枳实、川连、元明粉;2.肝胆湿热型用柴胡、生白芍,元胡、焦山     

油脂中过氧化值的分光光度测定法

目的建立油脂中过氧化值的分光光度测定方法。方法在无水酸性条件下,油脂中的过氧化物使I-定量的氧化成I2,I2与I-结合生成易溶于水的I3-,利用I3-的颜色与标准碘液进行比较定量。结果该方法牟精密度与准确度试验结果其变异系数为1.53%～6.19%;回收率为86%～108%。分光光度法测定油脂中的过氧化值与国家标准检验方法比较差异无统计学意义(t=0.11,P0.05)。结论方法简单易行,准确可靠,灵敏度高,适合于基层大批量样品的检测分析。     

建水县酒类残留污染物调查报告

目的:通过对2007、2008年建水县生产和销售的酒类的调查分析,掌握建水县酒类残留污染物的状况,提出相应的预防控制措施。方法:采用整群抽样和随机抽样的方法,对建水县生产和销售的酒类共644件进行检测分析。结果:本次调查蒸馏酒355份,合格率为82.5%;配制酒261份,合格率为93.1%;发酵酒28份全部合格。结论:建水县酒类残留污染物超标项目均为杂醇油,但也应注意其他残留污染物的存在,相关部门仍须加强监管力度。     

芪冬瘫复胶囊治疗气虚血瘀型脑梗死恢复期疗效及其对血液流变学的影响

脑梗死是临床常见的急危重症,具有高发病率、高致残率、高病死率的特点。2011年5月-2012年5月,笔者对80例气虚血瘀型脑梗死恢复期患者在西医常规治疗基础上采用芪冬瘫复胶囊辅助治疗,观察其临床疗效及对血流变的影响,现将结果报道如下。     

泛影葡胺对糖尿病肾病大鼠心肌细胞内皮素受体A表达的影响

目的 :观察造影剂泛影葡胺对糖尿病肾病大鼠心肌细胞内皮素受体A (endothelinreceptorA ,ETAR)表达的影响。方法 :应用链脲佐菌素 (STZ)腹腔注射建立SD大鼠糖尿病肾病模型。设对照组、模型组、泛影葡胺组 ,BQ1 2 3 泛影葡胺组 ,利用RT PCR和westernblot方法检测心肌组织ETAR表达的变化。结果 :与对照组比较 ,各组糖尿病大鼠心肌ETAR表达上调 ,CM组上调尤为明显(P <0 .0 5) ,注射BQ1 2 3后 ,可见其表达下调。结论 :有糖尿病肾病基础病史时 ,泛影葡胺可引起心肌组织ETAR表达变化 ,从而影响心脏功能 ;预防性使用选择性ETAR拮抗剂BQ1 2 3 ,可下调ETAR蛋白表达 ,改善心脏功能     

胰淀素对人胰岛β细胞凋亡的影响及其分子机制的初步研究

目的：初步探讨胰淀素（amylin）对人胰岛β细胞凋亡的影响及其分子机制。方法：分离培养人胰岛细胞,免疫组化鉴定β细胞后分为对照组（培养液中含56mmol/L葡萄糖）、胰淀素组（培养液中含10μmol/L胰淀素+56mmol/L葡萄糖）及氨基胍组（培养液中含10μmol/L胰淀素+05mmol/L氨基胍+56mmol/L葡萄糖）,于37℃、5%CO2培养24h后做胰岛素释放实验,测定培养液上清胰岛素、一氧化氮（NO2-/NO3-）、还原型谷胱甘肽(GSH)水平。原位末端核苷酸标记法（TUNEL）和胰岛素免疫组化双染色法及ELISA检测胰岛β细胞凋亡,RT-PCR检测胰岛细胞p53和bcl-2mRNA表达水平。结果：胰淀素组胰岛β细胞凋亡小体富计系数（217±021）、β细胞凋亡百分数（13%）、NO2-/NO3-（2013±173）μmol/L和p53mRNA表达水平（034±004）显著高于氨基胍组和对照组(P<001),而胰岛素（334±131）mU·L-1/1×106cells、GSH［（56±08）mg/L］和bcl-2mRNA（007±001）表达水平则显著低于氨基胍组和对照组(P<005)。结论：胰淀素可诱导人胰岛β细胞凋亡,其机制可能与胰岛β细胞抗氧化能力降低引起p53高表达有关。